優(yōu)良綠僵菌菌株的篩選及應(yīng)用性研究

優(yōu)良綠僵菌菌株的篩選及應(yīng)用性研究

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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文優(yōu)良綠僵菌菌株的篩選及應(yīng)用性研究姓名:馬麗娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):農(nóng)業(yè)昆蟲(chóng)與害蟲(chóng)防治指導(dǎo)教師:李靜;李瑞軍20120529摘要本研究對(duì)保定地區(qū)土壤中僵菌資源進(jìn)行了調(diào)查研究,利用黃粉蟲(chóng)誘集法獲得白僵菌178株,綠僵菌279株僵菌,對(duì)分離獲得的菌株進(jìn)行了初步篩選。通過(guò)混合毒力測(cè)定方法,選出20株具有較高致病力的金龜子綠僵菌菌株。20株菌株死亡率在66.67%"-'100.00%之間,僵蟲(chóng)率在42.22%"-'-'100.00%之間,致死中時(shí)在2.64d~5.72d之間。各菌株僵蟲(chóng)率從大到小依次為:[M7.

2、9,M7.(16.18)】>M7.(64.65)>M7一(283—285)>[M7-287,M7-105]>M7—169>[M7—19,M8—249]>M7—119>M7·130>【M7一(58-59),M7-67,M7—77]>[M7—184,M7一(83—84)]>[M7-43,M7—194】>M7-149>M7.57;,致死中時(shí)從小到大依次為:M7.9>M7.(16—18)>M7一(283.285)>M7.287>M7-(64·65)>M7一(58-59)>M7—19>M7—119>M7-67>M7-43>M7—184>

3、M7—130>M7—105>M8—249>M7-77>M7—169>M7—149>M7—57>M7一(83—84)>M7—194;在初篩獲得5株菌株的基礎(chǔ)上,以M7—9r、M7.(16.18)、M7.(64.65)為研究對(duì)象,對(duì)美國(guó)白蛾、大豆卷葉螟、東亞飛蝗、榆藍(lán)葉甲、斜紋夜蛾、紅脊長(zhǎng)蝽、小菜蛾等不同齡期的幼蟲(chóng)進(jìn)行殺蟲(chóng)活性測(cè)定,最終確定3株毒力較好的菌株進(jìn)行抗紫外能力、抗高溫能力的測(cè)定,比較了它們?cè)诙喾N條件下的性狀,并結(jié)合毒力測(cè)定的結(jié)果篩選出一株具有高毒力且性狀優(yōu)良的綠僵菌菌株M7—9。通過(guò)采用二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)方案,將篩選

4、出的菌株M7.9進(jìn)行液固雙向發(fā)酵研究,以產(chǎn)孢量為指標(biāo),選取較佳的發(fā)酵條件。在95%置信區(qū)間產(chǎn)孢量大于9.17x108孢子儋的優(yōu)化方案為液體培養(yǎng)基發(fā)酵時(shí)間72.24h~73.68h,固體培養(yǎng)基中水分比例88.24%,-01.14%,麥殼占麥麩的比例16.34%,-16.95%,液體種子液的接種量14.85m1-15.24ml,固體培養(yǎng)基發(fā)酵天數(shù)7.94如8.06d。為便于實(shí)際生產(chǎn),將優(yōu)化方案定為液體培養(yǎng)基發(fā)酵時(shí)間73h,固體培養(yǎng)基中水分比例90%,麥殼占麥麩的比例16.5%,液體種子液的接種量為15ml,固體培養(yǎng)基發(fā)酵天數(shù)8d。

5、通過(guò)二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)方案得出的最佳培養(yǎng)條件,對(duì)綠僵菌菌株M7.9和M7.(16.18)進(jìn)行液固雙向發(fā)酵,后進(jìn)行田間試驗(yàn),施用劑量分別為l萬(wàn)、5萬(wàn)、10萬(wàn)億孢子/畝(處理A,B,C),農(nóng)藥對(duì)照為辛硫磷、毒死蜱和白僵菌顆粒劑。各處理經(jīng)DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)隨機(jī)排列,在夏花生種植區(qū)進(jìn)行根施,花生收獲期調(diào)查?;ㄉ贩N不同,各菌株的防治效果也不盡相同??傮w上,兩株金龜子綠僵菌對(duì)病蟲(chóng)害的防治均有一定的效果。在花生品種H.1處j里小區(qū),兩株金龜子綠僵菌的防治效果甚至優(yōu)于化學(xué)防治。結(jié)果表明,本試驗(yàn)對(duì)金龜子綠僵菌的篩選、發(fā)酵及應(yīng)用具有理論和實(shí)踐

6、意義。關(guān)鍵詞:金龜子綠僵菌;生物測(cè)定;抗逆性;通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計(jì);液固雙相發(fā)酵ThescreeningvirulentstrainofMetarhiziumanisopliaeandthestudyofapplicationAuthor:MaLijuanSupeI啊sor:LiJing,LiRuijunMajor:AgricultureinsectandpestcontrolAbs仃actIntllisPaper,resourceofMetarh拓m,,lanisopliaeandBeauveriabassianainthesurr

7、oundingsofBaodingisinvestigatedbyTenebriomoHtor砌玎elarvaetrappingmethod.Allthestrainsisolatedwereusedtoconductapreliminarybioassay.Bymixedmethods,20Metarhiziumanisopliaestrainswereselected.ThemoaaliWofthesestrainswasbetween66.67%to100.00%,andthestiffwormsrateoftheses

8、trainswasbetween42.22%to100.00%.I凡0of20strainswasbetween2.64dto5.72d.ThestiffrankorderoftheMetarhiziumanisopliaeisolatedwas【M7-9,M7-(16.18

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