蚓激酶活性的測定方法

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1.蚓激酶活性的測定方法由于蚓激酶粉既具有激活纖維蛋白溶酶原變?yōu)槔w維蛋白溶酶，從而溶解血栓，同時又能直接溶解血纖維蛋白，尿激酶只起激酶性質(zhì)，目前還無法找到一個合適的試樣作為標準對照品，故參照尿激酶瓊脂糖—纖維蛋白平板法，制定了纖維蛋白平板法,采用直接測定纖維蛋白板中溶解纖維蛋白圈的大小來衡量蚓激酶粉的質(zhì)量好壞。a.試劑配制：（1）0.06MpH7.8磷酸鹽緩沖液（PBS）稱取Na2HPO4·12H2O21.4g，NaCl5.26g，加水900mL，用1NHCl調(diào)至pH7.8后，補水至1000mL。（2）（牛）纖維蛋白原（70μ/瓶）取70μ纖維蛋白原，溶于20mLPBS（3.5μ/mL）中，水浴微熱使溶。2

1（3）（牛）纖維蛋白溶酶原（12μ/瓶）取12μ纖維蛋白溶酶原，加入12mLPBS（1酪蛋白單位/毫升）使溶，同時取3mL。（4）（牛）凝血酶（70μ/瓶）取70μ凝血酶，加入7mLPBS（10μ/mL），同時取3mL。（5）稱瓊脂糖330mg，加22mLPBS，加熱使溶后體積變?yōu)?0mL,放55oC水浴中使之恒溫待用。a.纖維蛋白板的制作：將(2)、(5)、(3)、(4)按順序依次加入混勻后，迅速倒入水平放置的（7.5×22.5cm）平板中，若有氣泡，可在未凝固之前，用小鋼鏟將氣泡趕走，待其凝固后，蓋上蓋，放4oC冰箱1小時后，即可使用。此板即為標準纖維蛋白板。b.蚓激酶粉的活力的測定：2

2用直徑為3mm的不繡鋼小管，在纖維蛋白板上打若干個小孔，稱取蚓激酶粉若干（3-10mg），加蒸餾水配成1mg/mL的濃度，使其充分溶解，取溶液部份10μL點入每個小孔中，將板水平放37oC恒溫箱中保溫18個小時后，測得溶圈直徑（mm）。按下列公式計算溶圈面積S=（D/2）2×3.14蚓激酶粉的活性=S×100（μ/mg）1.乙醚不溶物、丙酮不溶物的檢測方法按SB/T10206—94磷脂的質(zhì)量標準執(zhí)行6.角鯊烯可參照脂肪酸的檢測方法進行測定2