三聚氰胺測(cè)定不確定度評(píng)估報(bào)告

《三聚氰胺測(cè)定不確定度評(píng)估報(bào)告》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、HPLC法測(cè)定奶粉中三聚氰胺含量的不確定度評(píng)估1.目標(biāo)為了三聚氰胺測(cè)量方法的優(yōu)化和更準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)三聚氰胺的結(jié)果，采用B類評(píng)定方式確定該方法的相對(duì)不確定度。2.測(cè)定程序2.1.方法依據(jù)：GB/T2388-2008《原料乳與乳制品中三聚氰安檢測(cè)方法》2.2.樣品提取稱取3g（精確至0.01g）試樣于50mL具塞塑料離心管，加入15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超聲提取10min，再振蕩提取10min后，以不低于4000r/min離心10min。上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤(rùn)濕的濾紙過濾后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL濾液，加入5mL水混勻

2、后做待測(cè)凈化液。2.3.凈化將待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱（BESEPHR-XC）中。依次用3mL水和3mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脫。整個(gè)固相萃取過程流速不超過1mL/min。洗脫液于50℃下用氮?dú)獯蹈?，殘留物?mL流動(dòng)相定容，渦旋混合1min，過微孔濾膜后，供HPLC測(cè)定。2.4.液相色譜條件a)C18柱，250mm×4.6mm×5umb)離子對(duì)試劑緩沖溶液-乙腈（88+12，體積比）。c)流速：1.0mL/mind)柱溫：40℃e)波長(zhǎng)：240nmf)進(jìn)樣量：20uL2.5.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制2.5.1.標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的

3、配制準(zhǔn)確稱取0.2330g三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品于50mL容量瓶中，用甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成濃度為464ug/mL的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。2.5.2.標(biāo)準(zhǔn)工作液用流動(dòng)相將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋得到濃度分別為0.8、2、20、40、80ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，濃度由低到高進(jìn)樣檢測(cè)，以峰面積-濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。具體配制過程見下表：第頁共頁表1標(biāo)準(zhǔn)工作液配制過程標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度（ug/mL）稀釋過程吸取液濃度（ug/mL）吸取量（mL）定容體積（mL）804641.72510408051020802.5102800.

4、25100.8800.1101.建立數(shù)學(xué)模型試樣中三聚氰胺結(jié)果計(jì)算公式如下：式中：X——試樣中三聚氰胺的含量，單位是毫克每千克（mg/kg）；C——樣液在標(biāo)準(zhǔn)曲線所讀的濃度值；V——樣液最終定容體積，單位為mL；m——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；f——稀釋倍數(shù)。2.分析確定不確定度的來源從測(cè)量過程和數(shù)學(xué)模型分析，影響三聚氰胺含量的測(cè)量不確定度主要來源于：體積的相對(duì)不確定度、質(zhì)量的相對(duì)不確定度、標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)的相對(duì)不確定度和前處理影響因子的相對(duì)不確定度。體積的相對(duì)不確定度是由人員、溫度和量具本身影響的；質(zhì)量的相對(duì)不確定度是由稱量過程中人員和

5、天平本身影響而導(dǎo)致的；標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)的相對(duì)不確定度是由工作曲線的非線性、標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度影響；前處理影響因子的相對(duì)不確定度是由儀器不穩(wěn)定性、前處理和其他因素影響。詳細(xì)如圖一魚骨圖所示。第頁共頁圖一魚骨圖（曲線校準(zhǔn)）（前處理影響因子）工作曲線擬合定容過程配制容器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱量稀釋過程標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度儀器測(cè)試的影響樣品中三聚氰胺含量測(cè)量重復(fù)性測(cè)量重復(fù)性實(shí)驗(yàn)室溫度波動(dòng)可讀性（電子天平的量化誤差）器具校準(zhǔn)的不確定度天平校準(zhǔn)產(chǎn)生的不確定度(體積)（樣品質(zhì)量）1.計(jì)算不確定度分量1.1.由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣液中三聚氰胺的濃度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u（C

6、x）1.1.1.配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液引入的不確定度1.1.1.1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u（p）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書給出的信息，三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的相對(duì)不確定度為0.5%，參考文獻(xiàn)[3]中由于標(biāo)準(zhǔn)證書給出無法定量的限值，因此按矩形分布處理：=0.002891.1.1.2.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱量引起的標(biāo)準(zhǔn)不確定度準(zhǔn)確稱取0.2330g標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)電子天平檢定證書，0≤m≤5g，天平最大允差為：0.0005g，按均勻分布考慮，=2.89g，天平重復(fù)性誤差：±0.0001g，，稱量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度=0.0003，相對(duì)不確定度=0.00129。1.1.1.3

7、.配制工作液配制過程中量器校準(zhǔn)引入的不確定度第頁共頁標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程中使用了一系列量器，容量瓶按均勻分布計(jì)算，移液器不確定度按照正態(tài)分布計(jì)算。如表2所示：表2玻璃量器校準(zhǔn)引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度玻璃量器最大允差標(biāo)準(zhǔn)不確定度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度50mL容量瓶0.05mL0.02890.00057710mL容量瓶B級(jí)（使用5次）0.04mL0.0230.00235mL移液器（使用2次）0.0050.002890.0005771mL移液器（使用2次）0.0020.001160.00116=0.00551.1.1.1.標(biāo)準(zhǔn)工作液配制過程中人員讀數(shù)引起的不

8、確定度參考文獻(xiàn)[3]中有關(guān)數(shù)據(jù)，人員讀數(shù)允許有1%的不確定度即0.01V，按三角分布考慮，則人員每次讀數(shù)引起的相對(duì)不確定度為。配制標(biāo)準(zhǔn)工作液使用玻璃量器6次，因此人員讀數(shù)引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：、、、相互