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《中藥天年飲對(duì)衰老大鼠睪丸生精細(xì)胞凋亡及相關(guān)因素的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、中藥天年飲對(duì)衰老大鼠睪丸生精細(xì)胞凋亡及相關(guān)因素的影響論文杜金凱，李艷，陳志宏，薛景鳳【關(guān)鍵詞】天年飲；,,衰老；,,生精細(xì)胞；,,凋亡；,,睪酮；,,p53基因摘要：目的研究中藥天年飲對(duì)衰老大鼠睪丸生精細(xì)胞凋亡及相關(guān)因素的影響。方法40只SD大鼠隨機(jī)分為4組，正常組、衰老模型組、天年飲用藥組及陰性對(duì)照組，每組均為10只。D-半乳糖連續(xù)腹腔注射制作亞急性衰老的大鼠模型。采用ELISA方法檢測(cè)各組大鼠血清睪酮含量、SP免疫組化法檢測(cè)睪丸生精細(xì)胞p53蛋白的表達(dá)情況、TUNEL法檢測(cè)各組大鼠睪丸生精細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果衰老大鼠血清睪酮含量明顯降低（模型組與正常組比較：P0.0
2、5），衰老大鼠睪丸p53陽(yáng)性細(xì)胞率及凋亡指數(shù)明顯高于正常大鼠（P0.01）。天年飲用藥組大鼠血清睪酮含量較衰老大鼠明顯升高（P0.05），天年飲用藥組大鼠睪丸p53陽(yáng)性細(xì)胞率及凋亡指數(shù)較衰老大鼠明顯降低（P0.05.freeledicineTiannianyinonapoptosisandrelatedfactorsofspermatogeniccellsintestisofagingrats.Methods40SDrats:normalgroup,agingmodelgroup,Tiannianyingroup,.freelodelratsadebyinjecting
3、D-galintoabdominalcavitycontinuously.ELISA,SPimmunohistochemistrytoobservethep53expressionandTUNELtodetectapoptosisofspermatogeniccellsintestis.ResultsThetestosteronecontentinserumofagingratsdecreasedsignificantlyparedalrats(P0.05);thep53positivecellsandapoptoticindexofagingratsuchhigher
4、thanthoseinnormalrats(P0.01).Tiannianyincouldinhibitthedecreaseoftestosteronecontentinserumsignificantly(Tiannianyingroupparedodelgroup:P0.05),anddecreasethep53expressionandapoptoticindexsignificantly(P0.05,P0.01).ConclusionTraditionalChinesemedicineTiannianyincanimprovethespermatogenicf
5、unctionofagingrats,andhasfairlyanti-agingeffects.Keyatogeniccell;Apoptosis;Testosterone;p53gene抗衰老是一個(gè)古老的話題，目前國(guó)內(nèi)、外應(yīng)用的抗衰老方法有很多。中藥延緩衰老作用的研究已逐漸深入，在細(xì)胞傳代、壽命實(shí)驗(yàn)、免疫內(nèi)分泌代謝等領(lǐng)域進(jìn)行了多方面的研究，揭示了不少藥物的抗衰老機(jī)理，但各自研究的方面不同。天年飲由劉河間《宣明論方》何首烏丸加味而成，由何首烏、肉蓯蓉、懷牛膝等組成，具有補(bǔ)肝腎、益精血、延年益壽之功效。本研究采用D-半乳糖致亞急性衰老的大鼠模型，觀察天年飲對(duì)睪丸生精細(xì)胞
6、凋亡及相關(guān)因素的影響，探討天年飲延緩衰老的作用機(jī)制。1材料與方法1.1動(dòng)物的選擇及分組成年雄性SD大鼠40只，體重180~250g（由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證書：醫(yī)動(dòng)字第04057號(hào)）。將大鼠隨機(jī)分為4組，正常組、衰老模型組、天年飲用藥組和陰性對(duì)照組，每組10只。其中模型組、用藥組、陰性對(duì)照組均采用D-半乳糖連續(xù)腹腔注射（按200mgkg1-d-1給藥，1次/d，連續(xù)40d）制作亞急性衰老大鼠模型。模型組大鼠造模成功后不再做任何處理；用藥組大鼠造模成功后每天用天年飲灌胃，共30d；陰性對(duì)照組大鼠在造模成功后灌胃同等劑量的生理鹽水，時(shí)間同用藥組大鼠。1.2藥品
7、與試劑D-半乳糖(D-gal)由北京化學(xué)試劑公司生產(chǎn)(批號(hào)020402)。天年飲由炙何首烏、懷牛膝、肉從蓉、淫羊藿、丹參、茯苓等六味中藥組成，經(jīng)熬制后每毫升含生藥1.5g灌胃。檢測(cè)血清睪酮含量的ELISA試劑盒及免疫組化、凋亡試劑盒均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。1.3指標(biāo)檢測(cè)1.3.1血清睪酮含量的檢測(cè)大鼠經(jīng)內(nèi)眥取血，離心取上清，采用ELISA方法檢測(cè)睪酮含量。1.3.2p53表達(dá)的檢測(cè)及定量數(shù)據(jù)處理大鼠腹腔注射戊巴比妥麻醉，4%多聚甲醛灌注固定，取雙側(cè)睪丸，后固定過(guò)夜，常規(guī)石蠟包埋、切片，片厚5μm，按試劑盒說(shuō)明以SP免疫組化法檢測(cè)p
