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《十七 常用培養(yǎng)基配方》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、十七常用培養(yǎng)基配方17.1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分蛋白胨10g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂15~20g蒸餾水1000mL制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內(nèi),加入15%氫氧化鈉溶液約2ML,校正PH7.2—7.4,加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝在三角錐瓶中,在121℃下高壓滅菌15分鐘。17.2乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基(單料)成分蛋白胨20g豬膽鹽5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸餾水1000mlPH7.4制法將蛋白胨,膽鹽及乳糖溶于水中,校正PH值,加入指示劑分裝,每支管10ml,并放入一個(gè)小倒管(
2、產(chǎn)氣管),在115℃下高壓滅菌15分鐘。注:雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基除蒸餾水外,其他成分加倍。17.3乳糖發(fā)酵管培養(yǎng)基(單料)成分蛋白胨20g乳糖?10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸餾水1000mlPH7.4制法將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正PH,加入指示劑分裝,每支管3ml,并放入一個(gè)小倒管(產(chǎn)生氣),在115℃下高壓滅菌15分鐘。注:雙料乳糖發(fā)酵管培養(yǎng)基除蒸餾水外,其他成分加倍。97317.4伊紅美瓊脂(EMB)培養(yǎng)基成分蛋白胨10g乳糖10g磷酸氫二鉀2g瓊脂2g2%伊紅溶液20ml0.65%美蘭溶液
3、10ml蒸餾水1000mlPH7.1制法將蛋白胨,磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正PH,分裝于三角錐瓶?jī)?nèi),在121℃下高壓滅菌15分鐘后備用。臨用時(shí)加入乳糖并加熱熔化瓊脂,冷卻至50—60℃,加入伊紅和美藍(lán)溶液搖勻,澆注平板。17.5遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基配方:蛋白棟10.0g乳糖10.0g磷酸氯二鉀3.5g亞硫酸氫鈉2.5g堿性品紅0.4g瓊脂10.0g蒸餾水100ml制備:配料放入蒸餾水中,攪拌15分鐘,使其溶解,分裝到三角瓶或試管,121℃滅菌20分鐘,冷卻后貯于暗處,最佳溫度為4—8℃以保持淺粉紅色。17.6UB
4、A培養(yǎng)基酵母浸膏6.1g蛋白胨15g番茄汁(244ml)12.2g葡萄糖16gK2HPO40.31gKH2PO403.1gMgSO·7H2O0.12gNaCl0.006gFeSO4·7H2O0.006gMnSO4·H2O0.006g瓊脂12g蒸餾水750ml啤酒250g973將上述配料加入水中,加熱至沸,攪拌至完全溶解,趁熱加入未脫氣的啤酒,輕輕攪拌混合,用HCI或NaOH調(diào)pH為6.0+0.1,分裝于三角瓶中,,121℃蒸汽滅菌20min。待冷卻后,放置在36±℃培養(yǎng)24h小時(shí)備用。17.7乳酸桿菌培養(yǎng)基UB
5、A+ABP抑制劑溶液(UBA見(jiàn)前)ABP抑制劑溶液配料放線菌酮0.1g溴甲酚綠0.15g無(wú)離子水80ml2-苯乙醇20ml配制把溴甲酚綠放入50毫升水中,煮沸至完全溶解,把放線菌酮溶于30毫升水中,將兩種溶液混合,分裝于帶螺旋蓋的瓶中,每瓶20毫升,在121℃蒸汽滅菌10分鐘,冷卻后,每個(gè)瓶?jī)?nèi)加5毫升2-苯乙醇,并擰緊瓶蓋。該溶液會(huì)分成兩層,使用前須用力搖勻。17.8KOT培養(yǎng)基配方胰朊酶蛋白胨5.0g麥汁浸出生2.5g酵母浸出物2.5g肝濃縮物1.0g麥芽糖5.0g葡萄糖5.0gL-蘋果酸0.5g吐溫-801
6、mlK2HPO40.5gMgSO4·7H2O0.125gMnSO4·5H2O0.025g鹽酸半光氨酸0.5g胞苷0.2g胸苷0.2g啤酒800ml放線菌酮100mlNaN350mg瓊脂20g蒸餾水至100mlPH25.497317.9日本KL-2B培養(yǎng)基配方:胰蛋胨20.0g麥汁浸生物10.0g酵母浸出生5.0g麥芽糖10.0gK2HPO43.0gMgSO4·7H2O1.0gMnSO4·5H2O0.25g檸檬酸2.75g吐溫-80100mgNaN350mg瓊脂20g蒸餾水至1000mlPH5.217.10MRS
7、麥芽糖瓊脂培養(yǎng)基沒(méi)有一種單獨(dú)的方法能夠檢測(cè)所有的乳酸細(xì)菌,這些細(xì)菌對(duì)各種糖的利用能力是有差別的,許多菌株能在好氧條件下在瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng),而另一些菌株則更容易在厭氧條件下生長(zhǎng)。下面列出的培養(yǎng)基,能檢測(cè)出許多種的乳酸細(xì)菌。但是,這些培養(yǎng)基不是絕對(duì)的,使用者可根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行修正后采用。原理:液體樣品培養(yǎng)在含有合適的不同種類瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,計(jì)算活菌落數(shù)。麥芽糖5.0g蛋白胨10.0g牛肉浸膏粉8.0g酵母浸出物4.0g葡萄糖20.0g吐溫-801.0mlK2HPO42.0g醋酸鈉5.0g檸檬酸銨2.0gMn
8、SO4·5H2O0.2gMgSO4·7H2O0.05g瓊脂15g在蒸餾水中溶解,并定容至1L。用1.0NHCl或0.1NNaOH調(diào)至4.7。蒸汽滅菌121℃,20分鐘。17.11Ra-Ray培養(yǎng)基NBB培養(yǎng)基是德國(guó)進(jìn)行啤酒有害菌檢查常用培養(yǎng)基,正如大家所知德國(guó)在有害菌研究領(lǐng)域處于領(lǐng)先地位,所以很多文獻(xiàn)中提到使用NBB培養(yǎng)基有必要講清楚。NBB培養(yǎng)基是Prof.Back專門為檢查啤酒有害