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《碩士研究生畢業(yè)論文答辯》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文答辯會www.themegallery.comLOGO歡迎各位專家光臨指導(dǎo)研究生嚴(yán)青春導(dǎo)師熊小亮副教授專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)研究方向腫瘤病理www.themegallery.comLOGONF-κB抑制劑PDTC對TRAIL誘導(dǎo)人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞凋亡的影響EffectofNF-κBinhibitorPDTCinTRAILinducedBurkitt’slymphomaRajicellsapoptosis目錄材料方法結(jié)果討論結(jié)論引言www.themegallery.comLOG
2、O引言www.themegallery.comLOGO腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體[tumorsnecrosisfactor(TNF)-relatedapotosis–inducingligand,TRAIL]，是新發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子TNF家族成員，它能夠選擇性地誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡，但不影響正常體細(xì)胞的生長分化，故而應(yīng)用重組TRAIL進行腫瘤治療已引起人們極大的興趣。www.themegallery.comLOGO重組TRAIL能誘導(dǎo)多種白血病、肺癌、胃癌等細(xì)胞株凋亡，并且呈時間和劑量依賴性。但是后來的研究發(fā)現(xiàn)，部分腫瘤細(xì)胞對
3、TRAIL誘導(dǎo)的凋亡作用并不敏感，且TRAIL重復(fù)作用會導(dǎo)致某些敏感細(xì)胞對TRAIL產(chǎn)生獲得性抗性，這與TRAIL介導(dǎo)的復(fù)雜的生物學(xué)功能有關(guān)。www.themegallery.comLOGOTRAIL蛋白廣泛表達于人體組織TRAIL的受體結(jié)合區(qū)與Fas同源性高達23.2％有五個受體：TRAILR1（DR4）、TRAILR2（DR5）、TRAIL-R3（DcR1）、TRAIL-R4（DcR2）、OPG。包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)及胞內(nèi)區(qū)三個部分由281個氨基酸殘基組成的分子量約為32.5kD的Ⅱ型跨膜糖蛋白TRAILwww.themega
4、llery.comLOGOTRAIL胞內(nèi)信號傳導(dǎo)www.themegallery.comLOGO核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclearfactor-kappaB）與Rel家族有較強的同源性，所以又稱為Rel/NF-κB家族有多個成員如：Rel(p65）、RelB、C-Rel、NF-κB1(p50)、NF-κB2(p52)等靜息狀態(tài)通常與其抑制物IκB結(jié)合成三聚體存在于胞漿中。在刺激因子作用下，NF-κB二聚體釋放并發(fā)生核易位。除與機體的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)密切相關(guān)外，還可調(diào)控細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)基因參與腫瘤的生長調(diào)控。NF-κBNF-κB在
5、TRAIL凋亡信號傳導(dǎo)過程中的作用Shetty等認(rèn)為NF-κB在TRAIL凋亡信號傳導(dǎo)過程中具有協(xié)同作用，促進細(xì)胞發(fā)生凋亡.NF-κB在TRAIL凋亡信號傳導(dǎo)過程中的作用Tafuku等則認(rèn)為NF-κB主要參與拮抗TRAIL的誘導(dǎo)凋亡作用，NF-κB的激活正是EBV陽性淋巴瘤對TRAIL不敏感的原因。www.themegallery.comLOGO本課題研究內(nèi)容預(yù)實驗MTTTUNELWestern預(yù)實驗確定TRAIL及PDTC使用濃度MTT檢測不同濃度TRAIL、PDTC單獨及聯(lián)用時對Raji細(xì)胞的生長抑制率TUNEL檢測TRAI
6、、PDTC單獨及聯(lián)用時Raji細(xì)胞凋亡情況觀察不同濃度TRAIL、PDTC單獨及聯(lián)用時DR4、DR5、及核內(nèi)NF-κB的表達吡咯二硫代氨基甲酸鹽（PDTC）為NF-κ特異性抑制劑www.themegallery.comLOGO材料www.themegallery.comLOGOwww.themegallery.comLOGOTUNEL試劑盒核蛋白抽提試劑盒、PMSF、EDTADMEM粉劑、FBS、PMSGHCGwesternblotting相關(guān)試劑、硝酸纖維素膜、超敏發(fā)光液主要試劑人重組TRAIL蛋白吡咯二硫代氨基甲酸鹽（PDT
7、C）www.themegallery.comLOGO細(xì)胞株EBV陽性的人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞株Raji細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物研究所細(xì)胞庫。www.themegallery.comLOGO方法www.themegallery.comLOGORaji細(xì)胞，用含l0％滅活小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液，在常規(guī)5％CO2，37℃飽和濕度下培養(yǎng)，3d傳代1次。取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實驗。一、細(xì)胞培養(yǎng)www.themegallery.comLOGO二、實驗分組1.細(xì)胞對照組2.TRAIL（100ng/ml）組3.TRAIL（1
8、0ng/ml）組4.TRAIL（1ng/ml）組5.TRAIL（1ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）組6.TRAIL（10ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）組7.TRAIL（100ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）組8.PDT
