惡性腫瘤病人外周血免疫指標的流式細胞儀檢測及免疫治療前后免疫功能變化的研究

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1、惡性腫瘤病人外周血免疫指標的流式細胞儀檢測及免疫治療前后免疫功能變化的研究【摘要】目的探討應(yīng)用流式細胞術(shù)(FCM)檢測惡性腫瘤病人外周血淋巴細胞多項免疫指標的變化及該指標對惡性腫瘤免疫治療前后的臨床價值。方法采用流式細胞術(shù)檢測50例惡性腫瘤病人和31例健康人的外周血CD3、CD4、CD8等八項免疫指標變化,并且對其中10例病人應(yīng)用免疫制劑治療前后對抗原表達的結(jié)果進行比較。結(jié)果惡性腫瘤病人免疫功能紊亂:(1)細胞免疫和體液免疫功能低下;(2)活化T淋巴細胞明顯增多(PP結(jié)論用流式細胞儀檢測淋巴細胞抗原為臨床觀察腫瘤病人的免疫狀態(tài)提供有效的依據(jù),免疫治療可激

2、活T淋巴細胞而改善免疫功能?!娟P(guān)鍵詞】惡性腫瘤;流式細胞儀;淋巴細胞;CD;免疫治療【Abstract】ObjectiveToexploretheapplicationofflowcytometryforthechangesofmultipleimmuneindexesinperipheralbloodofmalignanttumorpatientsandtheclinicvalueoftheindexesfortheimmunotherapyofmalignanttumor.MethodsFlowcytometrywasemployedfordeter

3、miningEightindexes,includingCD3、4、8,malignanttumorpatientsand1healthy,theresultsbeforeandafterimmunotherapyof10patientswerecompared.ResultsImmunefunctionofmalignanttumorpatientsisgenerallythecellimmunityandthebodyfluidimmunityareThelevelofactiveTlymphocytesaregreatlyhighwiththeco

4、ntrol(PPConclusionDetermininglymphocytesantigensbyflowcytometryprovidesaneffectivebasisforevaluatingtheimmunefunctionoftumorpatientsincanbeactiveTlymphocytesoastoimproveimmunefunction.【Keywords】flowcytometry;malignanttumor;lymphocyte;clusterofdifferentiation(CD);immunotherapy惡性腫瘤

5、的發(fā)生、發(fā)展與機體免疫系統(tǒng)密切相關(guān)。運用流式細胞術(shù)的方法,檢測T淋巴細胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴細胞表面抗原(CD19、CD20),NK細胞表面抗原(CD16+56)在惡性腫瘤病人外周血中的表達,并檢測活化T、B、NK淋巴細胞的免疫指標(CD3/HLA-DR、CD3/CD25)的變化,探討淋巴細胞在腫瘤中的表達狀況及其意義,并進一步分析惡性腫瘤病人免疫治療前后的免疫功能改變,以致使我們更深一層認識腫瘤在細胞水平的免疫功能。1資料與方法研究對象003年8月~XX年5月本院腫瘤科病房50例惡性腫瘤病人,均經(jīng)病理確診,其中肺癌23例,肝癌6例

6、,乳癌4例,胃癌5例,胰腺癌2例,淋巴瘤4例,結(jié)腸癌3例,鼻咽癌1例,腎癌2例。男28例,女22例,年齡29~65歲,平均57歲。其中10例(肺癌6例,淋巴瘤4例)年齡29~53歲,平均41歲,經(jīng)免疫增強劑(高聚生4ml靜滴,每日1次,共3個月;白介素Ⅱ30萬U皮下注射,每周2次,共3個月)治療一療程(3個月)后,復(fù)查一次。對照組31例為健康體檢者,男18例,女13例,年齡36~50歲,平均43歲,其中年齡和性別構(gòu)成比與病人組差異無顯著性(P>)。材料與儀器小鼠抗人單克隆抗體CD4/CD8/CD3、CD19、CD20、CD3/CD16+56、CD3/HL

7、A-DR、CD3/CD25及同型對照、紅細胞裂解液(OptilyseC)均為法國Immunotech公司出品。流式細胞儀(EpicsXL·MCL)是美國BECKMANCOULTER公司生產(chǎn)。研究方法使用直接免疫熒光標記全血溶血法,流式細胞儀測定腫瘤病人外周血淋巴細胞表面抗原表達。淋巴細胞表面標記取熒光標記單克隆抗體CD4/CD8/CD3、CD3/CD16+56、CD3/HLA-DR、CD3/CD25、CD19、CD20各10μl放入試管中,分別加入外周全血100μl,室溫避光孵育15min。并作同型對照。溶血加入OptilyseC00μl,混勻,室溫避光

8、10min。洗滌離心(1500r/min)5min,棄去上清液,加入PBS液1m

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