上皮性卵巢惡性腫瘤患者外周血t細(xì)胞亞群及nk細(xì)胞

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1、上皮性卵巢惡性腫瘤患者外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞【摘要】目的探討上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞的活性檢測的臨床意義。方法采用流式細(xì)胞儀測定上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞的活性,以良性卵巢上皮性腫瘤及正常人作對照分析。結(jié)果上皮性卵巢癌患者外周血CD3+、CD4+、NK細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CD8+比值較良性腫瘤組、正常對照組均明顯下降(P<0.05),而CD8+細(xì)胞水平顯著升高。外周血T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞數(shù)量的改變與上皮性卵巢癌臨床病理分期有關(guān),分期越晚,CD3+、CD4+、NK細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CD8+細(xì)胞比值越低,CD8

2、+細(xì)胞水平越高;Ⅰ、Ⅱ期上皮性癌患者與Ⅲ、Ⅳ期患者之間有顯著差異(P<0.05)。結(jié)論檢測T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞可用于上皮性卵巢癌患者的檢測及免疫狀態(tài)監(jiān)測?!娟P(guān)鍵詞】卵巢癌T淋巴細(xì)胞亞群NK細(xì)胞【Abstract】ObjectiveTostudyontheexpressionandclinicalsignificanceofTlymphocytesubsetandNKcellactivityinthepatientsa.MethodsFloetryarksofTlymphocytesubsetsandNKcellsinbloodsamplesfrompat

3、ientsa.Dataobtainedfromthebenignepithelialovariantumorandthehealthpeopleplesfromcarcinomagroupthanthatfromthebenigntumorandthehealthcontrol(P<0.05).CD8+TlymphocytemunefunctionoflymphocytesinperipheralbloodofthepatientsaatingthefunctionofcellimmunebydetectingTlymphocytesubsetandNKce

4、ll.【KeyaTlymphocytesubsetsNKcells卵巢惡性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,而死亡率居首位。卵巢癌早期不易發(fā)現(xiàn),大部分惡性腫瘤患者就診時已錯過了治療的最佳時間。因此,如何及時發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤,爭取早期治療是提高療效,延長生存期的關(guān)鍵因素之一[1]。而上皮性卵巢癌占卵巢惡性腫瘤的90%。本實(shí)驗旨在通過檢測上皮性卵巢癌患者外周血中T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的改變,對其臨床意義進(jìn)行探討。1材料與方法1.1研究對象2005年9月至2007年2月住院手術(shù)治療的原發(fā)的上皮性卵巢癌腫瘤患者為檢測對象,均經(jīng)病理證實(shí)。其中惡性腫瘤34例,年齡20~80歲

5、,根據(jù)平均(48.03±11.43)歲。FIGO分期,其中Ⅰ期7例;Ⅱ期9例;Ⅲ期12例;Ⅳ期6例。良性腫瘤組30例:年齡18~75歲,平均年齡(45.23±11.32)歲,正常對照組30例,為本院健康體檢者,年齡20~58歲,平均年齡(44.38±13.58)歲,所有受檢對象均無免疫系統(tǒng)疾病或使用過免疫抑制劑。1.2試劑和儀器單克隆抗體抗CD3FITC、抗CD4PE、抗CD8PE及CD16+56PE,均由BectonDickinson公司生產(chǎn),CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+分別代表總T、TH、TS、NK細(xì)胞。紅細(xì)胞裂解液由BD公司生產(chǎn)。FACSC

6、an流式細(xì)胞儀為BectonDickinson公司產(chǎn)品。1.3檢測方法取肝素抗凝的新鮮外周血100μl,加入上述單抗20μl,混勻,室溫避光20min染色;加入1.5ml紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫避光放置10min,破壞紅細(xì)胞;1500r/min離心5min,棄上清;每管加入2ml0.1%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖液混勻,1000r/min離心5min,棄上清;加PBS1ml,混勻,2h內(nèi)上機(jī)檢測。采用FACSCan型流式細(xì)胞儀CellQuest軟件獲取與分析數(shù)據(jù)。以FSCH/SSCH設(shè)定淋巴細(xì)胞門,IgG/FITC/IgG2aPE確定FL1和FL2的非特異性結(jié)合水平,同時

7、調(diào)節(jié)FSC、SSC電壓,F(xiàn)SC閾值,F(xiàn)L1-FL2%、FL2-FL1%熒光補(bǔ)償。每管獲取1萬個細(xì)胞。1.4統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以x-±s表示,用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。2結(jié)果與良性腫瘤組及正常對照組相比較,卵巢癌患者CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+比值及NK細(xì)胞數(shù)量均顯著降低(P<0.05),而CD8+細(xì)胞則顯著升高(P<0.05),尤其是Ⅳ期患者差異更加顯著(P<0.01)、Ⅰ期~Ⅳ期卵巢癌患者,CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+細(xì)胞比值以及NK細(xì)胞數(shù)量逐漸下降,CD8+細(xì)胞水平逐漸升高,其中Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患

8、者之間以及

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