hplc法測定強肝糖漿中丹酚酸b的含量

hplc法測定強肝糖漿中丹酚酸b的含量

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1、HPLC法測定強肝糖漿中丹酚酸B的含量強肝糖漿由茵陳、丹參、黃芪、板藍根、當(dāng)歸、白芍、黨參、山楂、秦艽、甘草等16味藥組成,其主要功能為清熱利濕、補脾養(yǎng)血、益氣解郁,用于治療慢性肝炎、早期肝硬化、脂肪肝、中毒性肝炎等。丹酚酸B(SalvianolicacidB,SA-B)是丹參中的水溶性有效成分。丹參作為該處方的君藥,其含量的控制直接影響該制劑的療效,因此,我們嘗試采用HPLC法測定強肝糖漿中丹酚酸B的含量,經(jīng)過方法學(xué)考察發(fā)現(xiàn),該法測定結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好,快速簡便,可作為強肝糖漿質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的定量方法。建筑論文發(fā)表  1儀器與試藥L含0.1512mg的溶液,

2、作為對照品溶液?! ?.2供試品溶液的制備精密量取本品10mL,置于100mL具塞三角瓶中,精密加入50%甲醇50mL,稱定質(zhì)量,超聲處理10min,取出,放冷,以50%甲醇補足減失的質(zhì)量,搖勻,用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取出續(xù)濾液,即得?! ?.3陰性對照溶液的制備取處方除丹參以外的15味藥,按工藝制法制成陰性對照品,再按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。2.4色譜條件色譜柱ODS(250mm×4.6mm,5μm);流動相:甲醇-乙腈-1.5%甲酸(30∶10∶60);檢測波長286nm;流速1.0mL/min;柱溫30℃[1]。  2.5專

3、屬性試驗精密吸取供試品溶液、對照品溶液和陰性對照溶液各10μL,按色譜條件進樣,結(jié)果供試品色譜中,在與丹酚酸B對照品相同的保留時間處有色譜峰,與其他組分基本能達到基線分離(R>1.5);陰性對照色譜中,在與丹酚酸B對照品色譜峰相同的保留時間處無色譜峰,表明陰性對照無干擾,具有專屬性。見圖1?! ?.6線性關(guān)系考察建筑論文發(fā)表  精密吸取丹酚酸B對照品溶液2、4、6、8、10μL,分別按色譜條件進樣測定,測定丹酚酸B峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo),進樣質(zhì)量為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:Y=1.27E+004X-2.00E+004,r=0.9999,表明丹

4、酚酸B進樣量在0.3024~1.512μg范圍與峰面積呈良好的線性關(guān)系?! ?.7穩(wěn)定性試驗精密吸取同一強肝糖漿供試品溶液,分別在0、2、4、6、8h進行測定,計算,得丹酚酸B的質(zhì)量分?jǐn)?shù)RSD=0.72%,表明供試品溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定?! ?.8精密度試驗精密吸取同一強肝糖漿供試品溶液10μL,按上述色譜條件連續(xù)進樣5次,測定丹酚酸B峰面積,計算得其RSD=0.48%,表明儀器精密度符合要求?! ?.9重復(fù)性試驗取同一批強肝糖漿5份,制備供試品溶液進行測定,計算,得丹酚酸B平均含量的RSD=0.30%(n=5),表明本法重復(fù)性好?! ?.10加樣回收率

5、試驗取同一批已知含量的樣品5份,每份10mL,精密量取,置具塞錐形瓶中,精密加入丹酚酸B對照品適量,照“2.2”項下方法制備供試品溶液并進行測定,計算丹酚酸B的平均回收率為99.79%,RSD=0.23%。結(jié)果見表1。表1加樣回收率試驗結(jié)果(略)  2.11樣品測定  取3批強肝糖漿,按“2.2”項下方法制備供試品溶液。精密吸取供試品溶液和對照品溶液各10μL,按上述色譜條件進樣測定,外標(biāo)一點法計算丹酚酸B的質(zhì)量分?jǐn)?shù),結(jié)果見表2。表2強肝糖漿中丹酚酸B的含量測定結(jié)果(略)建筑論文發(fā)表  3討論強肝糖漿收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第

6、2冊,原標(biāo)準(zhǔn)沒有含量測定的要求。為確保藥品質(zhì)量,我們建議對該藥增加含量測定項目,測定原處方中作為君藥的黃芪或丹參的含量,但測定黃芪中黃芪甲苷需用蒸發(fā)光散射檢測器,一般單位不具備這樣的檢測設(shè)備,該方法可能難以推廣。筆者參考有關(guān)文獻并通過試驗,擬定了HPLC法測定該制劑中丹酚酸B的方案,結(jié)果表明,陰性無干擾,專屬性強,完全可用于該制劑的質(zhì)量控制。

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