半滑舌鰨多倍體的人工誘導(dǎo)及三倍體生長(zhǎng)與發(fā)育的研究

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1、學(xué)校代碼:10264研究生學(xué)號(hào):M090101028上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文半滑舌鰨多倍體的人工誘導(dǎo)及三倍體生長(zhǎng)題目:與發(fā)育的研究StudiesontheArtificialInductionofPolyploidyandItsEffectonGrowthand英文題目:DevelopmentofTriploidinHalf-SmoothTongueSole(Cynoglossussemilaevis)專業(yè):水產(chǎn)養(yǎng)殖研究方向:魚(yú)類遺傳育種姓名:李文龍指導(dǎo)教師:陳松林研究員二〇一二年五月半滑舌鰨多倍體的人工誘導(dǎo)及三倍體生長(zhǎng)與發(fā)育的研究StudiesontheArtificialI

2、nductionofPolyploidyandItsEffectonGrowthandDevelopmentofTriploidinHalf-SmoothTongueSole(Cynoglossussemilaevis)學(xué)位論文完成時(shí)間:指導(dǎo)教師簽字:答辯委員會(huì)成員簽字:上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:我恪守學(xué)術(shù)道德,崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外,本論文不包括任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫,我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé),并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果

3、由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在年解密后適用本版權(quán)書本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:年月日日期:年月日半滑舌鰨多倍體的人工誘導(dǎo)及三倍體生長(zhǎng)與發(fā)育的研究摘要半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)隸屬于鰈形目(Pleuro

4、nectiformes)舌鰨科(Cynoglossidae),是我國(guó)特有的一種名貴經(jīng)濟(jì)海水魚(yú)類,屬于近海溫水性底層魚(yú)類,我國(guó)沿海均有分布,以黃海、渤海為多。市場(chǎng)價(jià)值極高,養(yǎng)殖前景非常廣闊,是目前我國(guó)北方沿海海水魚(yú)類養(yǎng)殖的主要品種之一。不過(guò),研究表明,半滑舌鰨雌性個(gè)體和雄性個(gè)體,在生長(zhǎng)速率上存在很大差別,其雌性個(gè)體比雄性個(gè)體大3-4倍,由于雄性個(gè)體生長(zhǎng)過(guò)慢,降低了半滑舌鰨的養(yǎng)殖產(chǎn)量,增加了養(yǎng)殖成本,嚴(yán)重影響了半滑舌鰨苗種的推廣及養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,因此,培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗逆性強(qiáng)的新品種,對(duì)于半滑舌鰨苗種的推廣及其養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要意義。由于三倍體魚(yú)潛在的不育性,而四倍體與二倍體雜交

5、又可獲得大量的三倍體,運(yùn)用染色體操作技術(shù)進(jìn)行半滑舌鰨多倍體誘導(dǎo)技術(shù)的研究無(wú)疑是一個(gè)有效手段。因此,我們采用靜水壓休克法對(duì)半滑舌鰨四倍體及三倍體的人工誘導(dǎo)技術(shù)進(jìn)行了研究,并以誘導(dǎo)獲得的半滑舌鰨三倍體魚(yú)為材料,對(duì)其性腺發(fā)育、性別比例及生長(zhǎng)方面進(jìn)行了跟蹤研究?,F(xiàn)將主要研究結(jié)果報(bào)道如下:開(kāi)展了人工誘導(dǎo)半滑舌鰨四倍體魚(yú)苗的研究,采用靜水壓處理抑制半滑舌鰨受精卵卵裂進(jìn)行染色體加倍,篩選出有效的靜水壓處理起始時(shí)間、處理強(qiáng)度及其持續(xù)時(shí)間。結(jié)果表明在孵化水溫23±0.2℃時(shí),受精后21.5min,采用40MPa的靜水壓壓力,持續(xù)休克處理4.5min,四倍體誘導(dǎo)效果最好,魚(yú)苗四倍體率達(dá)到68.3%

6、。采用流式細(xì)胞儀分析了四倍體魚(yú)苗細(xì)胞DNA相對(duì)含量,表明四倍體魚(yú)苗細(xì)胞DNA相對(duì)含量為二倍體對(duì)照組魚(yú)苗的2倍。通過(guò)染色體制作分析表明四倍體魚(yú)苗的染色體數(shù)為84條,而二倍體對(duì)照組魚(yú)苗的染色體數(shù)為42條。本研究采用靜水壓方法,在國(guó)內(nèi)外首次建立了半滑舌鰨四倍體誘導(dǎo)方法。針對(duì)半滑舌鰨雌雄個(gè)體生長(zhǎng)差異過(guò)大、雌性性腺發(fā)育成熟后腹部凸起、影響舌鰨生長(zhǎng)和商品魚(yú)質(zhì)量等問(wèn)題,本文開(kāi)展了人工誘導(dǎo)半滑舌鰨三倍體的研究。采用靜水壓處理抑制半滑舌鰨受精卵第二極體排出進(jìn)行染色體加倍,篩選出有效的靜水壓處理強(qiáng)度及其持續(xù)時(shí)間。結(jié)果表明在孵化水溫23±0.2℃時(shí),受精后5min,采用36MPa的靜水壓壓力,休克處

7、理4min,三倍體率最高,達(dá)到100%。采用該誘導(dǎo)條件,大批量獲得了半滑舌鰨三倍體魚(yú)苗。采用流式細(xì)胞儀分析了三倍體魚(yú)I苗細(xì)胞DNA相對(duì)含量,表明三倍體魚(yú)苗細(xì)胞DNA相對(duì)含量為二倍體對(duì)照組魚(yú)苗的1.5倍。通過(guò)染色體分析表明三倍體魚(yú)苗的染色體數(shù)為63條,而二倍體魚(yú)苗的染色體數(shù)為42條。本研究采用靜水壓方法,在國(guó)內(nèi)外首次建立了半滑舌鰨三倍體魚(yú)苗誘導(dǎo)方法,誘導(dǎo)魚(yú)苗的三倍體率最高可達(dá)100%。以人工誘導(dǎo)獲得的半滑舌鰨三倍體群體為材料,對(duì)其性腺發(fā)育、性別比例及生長(zhǎng)方面進(jìn)行了跟蹤研究。對(duì)240日齡的半滑舌

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