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《DB41T 708-2011 規(guī)模牛場口蹄疫監(jiān)測技術(shù)規(guī)范》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、DB41河南省地方標準DB41/T708—2011規(guī)模牛場口蹄疫監(jiān)測技術(shù)規(guī)范2011-12-20發(fā)布2011-12-20實施河南省地方標準公共服務(wù)平臺河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB41/T708—2011前言本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由河南省畜牧局提出并歸口。本標準由河南省動物疫病預(yù)防控制中心負責(zé)起草，中國動物疫病預(yù)防控制中心參加起草。本標準主要起草人：張志凌、王功民、吳志明、張健、閆若潛、方先珍、謝彩華。河南省地方標準公共服務(wù)平臺IDB41/T708—2011規(guī)模牛場口蹄疫監(jiān)測技術(shù)規(guī)范1
2、范圍本標準規(guī)定了規(guī)模牛場口蹄疫監(jiān)測樣品的采集和保存、監(jiān)測方法和方式、監(jiān)測結(jié)果的處理。本標準適用于規(guī)模牛場口蹄疫監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18935－2003口蹄疫診斷技術(shù)中華人民共和國農(nóng)業(yè)部《口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范》中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第503號《高致病性動物病原微生物菌(毒)種或者樣本運輸包裝規(guī)范》3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1酶聯(lián)免疫吸附試
3、驗（ELISA）一種酶聯(lián)免疫技術(shù)。用于檢測包被于固相板孔中的待測抗原(或抗體)。即用酶標記抗體，并將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除，最后通過酶作用于底物后顯色來判斷結(jié)果。4樣品的采集和保存要求4.1樣品的采集和保存4.1.1組織樣品4.1.1.1樣品的選擇用于病毒分離、鑒定的樣品應(yīng)選擇牛未破裂的舌面或蹄部、鼻鏡、乳頭等部位的水皰皮和水皰液。對臨床健康但懷疑帶毒的牛可在撲殺后采集淋巴結(jié)、脊髓、肌肉等組織樣品作為檢測材料。4.1.1.2樣品的采集和保存
4、4.1.1.2.1水皰樣品采集部位可用清水清洗，不應(yīng)使用酒精、碘酒等消毒劑消毒、擦拭。河南省地方標準公共服務(wù)平臺1DB41/T708—20114.1.1.2.2未破裂水皰中的水皰液用滅菌注射器采集不少于1mL，裝入滅菌小瓶中，加抗菌素（青-1-1霉素終濃度為10000IU·mL,鏈霉素終濃度為10mg·mL），加蓋密封并用膠帶封口，及時冷凍保存。4.1.1.2.3剪取新鮮水皰皮3g～5g放入滅菌小瓶中，加2倍體積的50％甘油/磷酸鹽緩沖液(pH7.4),加蓋密封并用膠帶封口，冷凍保存。4.1.1.2.4在無法采集水皰
5、液和水皰皮時，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脊髓、肌肉等組織樣品3g～5g裝入滅菌的小瓶內(nèi),加蓋密封并用膠帶封口，冷凍保存。4.1.1.2.5每份樣品的包裝瓶上均要貼上防水標簽，并寫明采集地點、樣品編號、動物種類、時間等。4.1.2牛食道-咽部分泌物(O-P液)樣品4.1.2.1樣品的采集4.1.2.1.1被檢動物應(yīng)在采樣前禁食(可飲水)12h，以免反芻胃內(nèi)容物嚴重污染O-P液。4.1.2.1.2采樣探杯在使用前經(jīng)0.2％檸檬酸或2％氫氧化鈉溶液浸泡5min，再用蒸餾水反復(fù)沖洗3次以上。每采完一頭牛,探杯應(yīng)重復(fù)進行消毒和清洗。4.1
6、.2.1.3采樣時動物站立保定，將探杯隨動物吞咽動作送入其食道上部10cm～15cm處，輕輕來回移動2～3次，然后將探杯拉出。如采集的O-P液被反芻胃內(nèi)容物嚴重污染，應(yīng)用生理鹽水或自來水沖洗口腔后重新采樣。4.1.2.2樣品的保存將采集到的8mL～10mLO-P液倒入大于25mL的滅菌玻璃容器中,容器中應(yīng)事先加有8mL～-110mL細胞培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液（0.04mol·L、pH7.4），加蓋密封后充分搖勻，貼上防水標簽，并寫明采集地點、樣品編號、動物種類、時間等，及時放入冷藏箱內(nèi)，12h內(nèi)轉(zhuǎn)往-15℃以下冰箱凍存
7、。4.1.3血清采集牛群發(fā)生疑似疫情而錯過組織樣品采集時機時，應(yīng)無菌操作采集動物血液，每頭不少于10mL。-1自然凝固后無菌分離血清裝入滅菌小瓶中，加適量抗菌素（青霉素終濃度為10000IU·mL，鏈霉素-1終濃度為10mg·mL），加蓋密封后2℃～8℃冷藏保存。每份樣品的包裝瓶上應(yīng)貼上防水標簽，并寫明采集地點、樣品編號、動物種類、時間等。通過抗體檢測，做出追溯性診斷。4.2樣品登記采集樣品后應(yīng)及時填寫樣品采集登記表，一式3份（參見附錄A）。4.3樣品的運送4.3.1將采集好的樣品裝入金屬套筒中，套筒應(yīng)填充防震材料，
8、加蓋密封，與采樣記錄一同裝入專用運輸容器中。專用運輸容器應(yīng)隔熱堅固，內(nèi)裝適當冷凍劑和防震材料。4.3.2外包裝上應(yīng)加貼生物危險警示標識及警告語，并符合《高致病性動物病原微生物菌(毒)種或者樣本運輸包裝規(guī)范》要求。樣品應(yīng)于24h內(nèi)運送到檢測單位。4.3.3送檢材料河南省地方標準公共服務(wù)平臺應(yīng)附有符合4.2樣品采集登記表。2DB41/T708—20
