骨骼肌的單收縮與復(fù)合收縮實驗

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1、1.骨骼肌的單收縮與復(fù)合收縮實驗?zāi)康?.熟悉動物機能信號采集系統(tǒng)的使用方法,2.觀察刺激強度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系3.觀察刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響實驗原理腓腸肌由許多肌纖維組成，刺激腓腸肌時，不同的刺激強度會引起肌肉的不同反應(yīng)。當(dāng)刺激強度過小時，肌肉不發(fā)生收縮反應(yīng)，刺激為閾下刺激。而能引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)的最小刺激為閾刺激，刺激的強度稱為閾強度，當(dāng)全部肌纖維同時收縮時，出現(xiàn)最大的收縮反應(yīng)，引起最大收縮反應(yīng)的最小刺激強度稱為最適刺激強度。肌肉組織對于一個閾上強度的刺激發(fā)生一次迅速的收縮反應(yīng)，稱為單收縮。單收縮的過程可分三個時期：

2、潛伏期、縮短期和舒張期。兩個同等強度的閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本，如果刺激間隔小于單收縮的時程，則出現(xiàn)兩個收縮反應(yīng)的重疊，稱為收縮的總和。收縮的總和(復(fù)合收縮)不完全強直收縮：后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期完全強直收縮：后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期內(nèi)，各收縮不能分開，肌肉維持穩(wěn)定的收縮狀態(tài)實驗對象蟾蜍或其它蛙類、常用手術(shù)器械，蛙板，蛙釘，銅鋅弓，毀脊針(探針)，棉線，廢物盆，培養(yǎng)皿，玻璃分針，任氏液、MD3000生物信號采集系統(tǒng)，換能器，肌槽，支架實驗步驟坐骨神經(jīng)－1、腓腸肌標(biāo)本的制備2.連接裝置3.實驗觀察和記錄單收縮實

3、驗選擇閾上刺激強度刺激方式：單次；波寬：1ms調(diào)節(jié)控制面板的輸入范圍，使觀察的肌肉收縮幅度適當(dāng)d.調(diào)整時間單位(記錄好，不可忘記!)，使收縮曲線成明顯的拋物線狀e.采樣刺激關(guān)鍵技術(shù)坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備單收縮實驗時，調(diào)整好時間單位和刺激強度連續(xù)刺激時刺激強度與頻率的選擇注意事項常用任氏液濕潤標(biāo)本，保持標(biāo)本的良好活性肌肉與換能器的連接松緊適當(dāng)在做復(fù)合收縮實驗時，每改變一次刺激頻率后，應(yīng)休息0.5-1min,每次刺激不要超過5秒，以免標(biāo)本疲勞2.神經(jīng)干動作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度的測定試驗?zāi)康?.掌握蛙坐骨神經(jīng)-脛腓神經(jīng)標(biāo)本的制備方

4、法2.掌握引導(dǎo)神經(jīng)干動作電位和測定其傳導(dǎo)速度、興奮不應(yīng)期的基本原理和方法實驗原理神經(jīng)干動作電位是神經(jīng)興奮的客觀標(biāo)志，給具有興奮性的神經(jīng)干以一定強度的刺激，會發(fā)生動作電位。處于興奮部位的膜外電位負(fù)于靜息部位。當(dāng)神經(jīng)沖動通過后，興奮處的膜外電位又恢復(fù)到靜息時水平。神經(jīng)干興奮過程所發(fā)生的這種膜電位變化稱神經(jīng)干動作電位。神經(jīng)干由很多神經(jīng)纖維組成，故神經(jīng)干動作電位與單根神經(jīng)纖維的動作電位不同，它是由許多神經(jīng)纖維動作電位綜合成的綜合性電位變化。此外，這是在細(xì)胞外記錄，與細(xì)胞內(nèi)記錄不同。所以，神經(jīng)干動作電位幅度在一定范圍內(nèi)可隨刺激強度的變化而變

5、化。如果兩引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干一端興奮后，興奮波先后通過兩個引導(dǎo)電極處，可記錄到兩個方向相反的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為雙相動作電位。如果兩個引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只通過第一個引導(dǎo)電極，不能傳導(dǎo)至第二個引導(dǎo)電極，則只能記錄到一個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為單相動作電位。動作電位在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)有一定的速度。不同類型的神經(jīng)傳導(dǎo)速度（υ）各不相同，神經(jīng)纖維越粗，則傳導(dǎo)速度越快。蛙類坐骨神經(jīng)干中以Aα類纖維為主，傳導(dǎo)速度大約35~40m/s。測定神經(jīng)沖動在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離（s）與通過這些距離所需的時間（t），

6、即可根據(jù)υ=s/t求出神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)速度。試驗步驟一、制備蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本方法一：標(biāo)本制備方法與坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法大體相同。應(yīng)注意：神經(jīng)干應(yīng)盡可能分離得長一些。要求上自脊椎附近的主干，下沿腓總神經(jīng)與脛神經(jīng)一直分離至踝關(guān)節(jié)附近為止。三、啟動生物信號采集處理系統(tǒng)，點擊菜單“實驗/常用生理學(xué)實驗”，選擇“神經(jīng)干動作電位。逐漸增大刺激強度，找出剛能引起微小的神經(jīng)干動作電位的刺激強度（閾強度）。繼續(xù)增強刺激強度，神經(jīng)干動作電位也相應(yīng)增大。找出最大刺激強度。四、測定動作電位傳導(dǎo)速度給予神經(jīng)干最大刺激強度的刺激，在通道2、4的采樣窗中

7、，可觀察到先后形成的兩個雙相動作電位波形。分別測量從刺激偽跡到兩個動作電位起始點的時間，設(shè)通道2為t1，通道4為t2（或可直接測量兩個動作電位起點的間隔時間），求出t2—t1的時間差值。測量標(biāo)本屏障盒中CH2與CH4兩對引導(dǎo)電極之間的距離s（應(yīng)測r1~r2的間距）。觀察和測定單相動作電位波形（在損傷神經(jīng)標(biāo)本之前，可先做“神經(jīng)干動作電位不應(yīng)期的測定”的實驗）。用鑷子將CH4兩個記錄電極之間的神經(jīng)夾傷或用藥物阻斷，再刺激時呈現(xiàn)單相動作電位。讀出最大刺激時單相動作電位的振幅值和整個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。比較單相動作電位的上升時間和下降時

8、間的長短，并分析與雙相動作電位波形的關(guān)系。3.蛙心的期前收縮與代償間歇相關(guān)概念期前收縮：在舒張期內(nèi)（相對不應(yīng)期），給予心室一次閾上刺激，便可在正常節(jié)律到達(dá)心室之前，引起一次擴布性興奮和收縮，稱為期前收縮或早搏。代償間歇：期前收縮也有一個有效不應(yīng)期。