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《中藥貓爪草多糖的免疫活性研究 》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、中藥貓爪草多糖的免疫活性研究張振凌，王磊，吳筱菁，張惠霞【關(guān)鍵詞】貓爪草多糖；,,提取鑒別；,,免疫功能；,,環(huán)磷酰胺 摘要：目的確定貓爪草多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫功能的影響。方法環(huán)磷酰胺造模法制作免疫抑制小鼠模型，灌胃給藥，觀察和比較貓爪草多糖對(duì)其腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、溶血素形成以及外周血T淋巴細(xì)胞數(shù)的影響。結(jié)果貓爪草多糖可使吞噬百分率、吞噬指數(shù)顯著升高；貓爪草多糖可顯著促進(jìn)溶血素的形成并提高外周血中T淋巴細(xì)胞數(shù)。結(jié)論貓爪草多糖對(duì)正常及免疫抑制小鼠均有免疫興奮作用?！ ￡P(guān)鍵詞：貓爪草多糖；提取鑒別；免疫功能；環(huán)磷酰胺 Abstract：
2、ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofthepolysaccharideonimmunefunction.MethodsTheIS.modelinKunmingmiceude,andthephagoctosisofperitonealmacrophage,theformuationofhemoloysinandthenumberofT-lymphocytesinpenpheralbloodRadixRanunculiTernaticouldelevatethepercentandtheindexofph
3、agocytosis,enhancetheformationofthehemolysinobviously,andincreasethenumberofT-lymphocytesinperipheralblood.ConclusionThepolysaccharideofRadixRanunculiTernaticanstimulatetheimmunologicfunctionofnormalandIS.Kunmingmice. Keyination;Immunityfunction;Cyclophosphamide 貓爪草為毛莨
4、科植物小毛莨RanunculusternatusThunb.的干燥塊根。貓爪草性平，味甘、辛，性溫，歸肝、肺經(jīng)。功能解毒、化痰散結(jié)，主治瘰疬未潰、淋巴結(jié)結(jié)核、咽炎等〔1〕。有報(bào)道貓爪草化學(xué)成分主要有糖16%、油1.2%及少量生物堿〔2〕。又有報(bào)道分離得到肉豆蔻酸十八烷基酯，二十烷酸，豆甾醇，β谷甾醇，小毛莨內(nèi)酯，以及豆甾醇和β谷甾醇二者混合品的葡萄糖苷等7個(gè)化合物〔3，4〕，且含有多糖類成分。王愛武等〔5〕對(duì)其含量較高的兩種主要提取物進(jìn)行了體外抗腫瘤作用的初步研究。結(jié)果顯示，貓爪草皂苷及多糖對(duì)肉瘤S180、艾氏腹水瘤EAC及人乳腺癌細(xì)胞
5、株MCF-7的3種腫瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)和集落形成均有不同程度的影響，皂苷比多糖抑瘤效果好。本研究主要提取貓爪草多糖確定是否具有免疫活性。 1器材 1.1藥材購自河南淮濱縣王崗鄉(xiāng)毛莊村，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院生藥教研室董誠明教授鑒定為毛莨科植物小毛莨的干燥塊根?！ ?.2試劑環(huán)磷酰胺（山西普德藥業(yè)有限公司，批號(hào)20051201，規(guī)格200mg×5瓶）；生理鹽水（鄭州化學(xué)藥業(yè)有限公司，批號(hào)010409，規(guī)格500ml/瓶）；瑞氏色素（上海試劑三廠，批號(hào)99030）；其余試劑藥品均為分析純?！ ?.3儀器BS210S電子天平（北京賽多利斯天平有限公司
6、，max210g,d0.1mg）；KQ-500DV型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；TDL-40B型低速臺(tái)式大容量離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）；數(shù)碼生物顯微攝影系統(tǒng)（上海彼愛姆光學(xué)儀器制造有限公司）；DHG-9076A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；載玻片（鹽城市麗帆玻璃有限公司）?！ ?.4動(dòng)物ICR小鼠，雌雄各半，18~20g；雞紅細(xì)胞和豚鼠血清（鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心）?！ ?.5貓爪草多糖的提取及試液配制 1.5.1貓爪草多糖的提取〔6〕本
7、實(shí)驗(yàn)室綜合相關(guān)文獻(xiàn)并結(jié)合預(yù)實(shí)驗(yàn)自行提取?！ ?.5.2Hank’s應(yīng)用液的配制取Hank’s原液1份加雙蒸水9份混合分裝，69.75kPa(10P/cm2)20min高壓滅菌，4℃冰箱備用?！ ?.5.3孵育液（酯酶染色液）的配制取1/15mol/LpH7.6的磷酸緩沖液89ml緩緩加入六偶氮副品紅6ml，充分混勻后，再慢慢滴加2%α醋酸萘酯溶液2.5ml，充分混勻，最后呈琥珀色混濁樣液，調(diào)節(jié)pH到6.4?！ ?方法〔7~9〕 2.1貓爪草多糖對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響取小鼠按體重隨機(jī)分為：①空白組，②CTX模型組，③治療組，④
8、多糖100mg?kg-1。按0.2ml?kg-1灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7d，空白組給等量生理鹽水。除空白組、多糖組外，均ipCTX40mg?kg-1制備免疫低下模型。第7天每鼠腹腔注射5%的雞紅細(xì)胞生理鹽
