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《中華蘆薈抗腫瘤活性成分的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、中華蘆薈抗腫瘤活性成分的研究:李天東,古靜燕,羅英,李俊剛【摘要】 目的分離純化中華蘆薈中具有細胞增殖抑制和細胞凋亡誘導活性的活性成分。方法反復采用硅膠柱色譜、凝膠色譜從蘆薈中分離得到4個化合物,根據(jù)理化性質(zhì)及波譜方法鑒定了結(jié)構(gòu),并以K562腫瘤細胞株采用形態(tài)學、流式細胞儀和SRB法分析了化合物的體外抗腫瘤作用。結(jié)果4種化合物分別鑒定為蘆薈大黃素①,大黃素甲醚②,大黃酚③和大黃素④?;钚詸z測結(jié)果化合物1有較強的體外抗腫瘤活性[10μg/ml時抑制率為(57.13±2.13)%],化合物4在10μg/ml時抑制率為(35.17±1.16)%,化合物2、3(
2、均為10μg/ml)的抑制率分別為[(18.14±1.15)%,(21.13±3.11)%]。結(jié)論化合物1,2,3,4都具有細胞增殖抑制活性,其中1和4活性較強,2,3的活性較弱?!娟P鍵詞】中華蘆薈抗腫瘤細胞增殖抑制 Abstract:ObjectiveToisolateandpurifytheactiveantitumorponentsfromAloeveravar.chinesisBerg.MethodsUsingsilicagelcolumnrepeatly,SephadexLH-20,fourponentsAloeveravarchinesisB
3、erg.Bymeansofphysico-chemicalpropertiesandspectralanalysis,andtheirstructuresined.Theanti-tumoractivitiesofthesepoundsetryusinghumanleukemiacarcinomacellK252.ResultsTheseponentsodin,physcion,chrysophanol,emodin.Itsholpound1,10μg/mlpound2,3,4couldresisitcancercell.ConclusionAllfour
4、ponentscaninhibitthegroodinandemodinshoor;Cellprolifationinhibition 蘆薈是百合科蘆薈屬AloeL.多年生長綠肉質(zhì)多漿植物,原產(chǎn)于非洲,種類約有五百多種,我國常見庫拉索蘆薈、中華蘆薈、木立蘆薈和開普蘆薈,多用于觀賞植物或是美容保健品[1]。文獻報道,該屬植物具有廣泛的生理活性,如抗癌、抗菌、抗炎、免疫增強等功效[2]。20世紀中期國外對蘆薈的化學成分進行了廣泛的研究,已報道蒽醌類、色原酮、生物堿、有機酸和多糖類等多種生理活性物質(zhì)。中華蘆薈又稱斑紋蘆薈,國內(nèi)對其化學成分進行了一定的研究,如袁
5、阿興等[3]發(fā)現(xiàn)蘆薈苦素,但對其抗腫瘤化學成分研究尚未見報道。本文從中華蘆薈中分離得到4個化合物,蘆薈大黃素①、大黃素甲醚②,大黃酚③和大黃素④,并以K562腫瘤細胞株,采用流式細胞儀和SRB法結(jié)合顯微鏡檢測細胞形態(tài)學變化的方法,測定了4個蒽醌類化合物的體外細胞周期抑制和細胞凋亡誘導活性,首次報道了大黃素甲醚和大黃酚的體外抗腫瘤活性?! ?材料與儀器 X4型顯微熔點儀,溫度未校正;JEOLJNM-ECP600型核磁共振波譜儀,TMS為內(nèi)標。SephadexLH-20、薄層硅膠和層析用硅膠分別為Pharmacia公司和青島海洋化工廠產(chǎn)品?;钚詼y試采用人慢性
6、髓原白血病腫瘤細胞K562、胎牛血清(FBS)、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基為Hyclone公司和GIBCOBRL公司產(chǎn)品;磺酰羅丹明B(SRB)為Sigma公司產(chǎn)品。中華蘆薈AloeveravarchinesisBerg購自四川綿陽仙游花卉有限公司,由綿陽師范學院生命科學與技術(shù)學院陳桂芳副教授鑒定?! ?方法與結(jié)果 2.1化合物的分離與純化 2.1.1提取與分離中華蘆薈葉汁濃縮物(1.5kg)以酸性氯仿7.5L提取4h,多次提取(10次以上),濃縮提取液將其溶于乙醇與水的混合液,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯分別萃取。氯仿提取物79g,經(jīng)硅膠柱色譜多次
7、分離(石油醚-醋酸乙酯梯度洗脫)及SephadexLH-20柱色譜(甲醇洗脫)及多次重結(jié)晶分離純化得到化合物1(76mg)、化合物2(20mg)、化合物3(12mg)和化合物4(17mg)。 2.1.2結(jié)構(gòu)鑒定化合物1:橙黃色針狀結(jié)晶(乙醇),mp219~220℃。1H-NMR(DMSO,600MHz)δ:11.97(1H,s),11.91(1H,s),7.80(1H,dd),7.72(1H,dd),7.69(1H,d),7.38(1H,dd),7.30(1H,d),5.62(1H,s),4.63(2H,s);13C-NMR(DMSO,150MHz)δ:
8、191.74,181.59,161.72,161.43,153.8