資源描述:
《芍藥苷對stz損傷的ins1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用的論文》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、芍藥苷對STZ損傷的INS1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用的論文芍藥苷對stz損傷的ins1細(xì)胞的保護(hù)和修復(fù)作用【關(guān)鍵詞】芍藥苷;ins1細(xì)胞;stz;抗氧化能力【摘要】目的研究中藥單體芍藥苷對ins1細(xì)胞的影響,及對鏈脲佐菌素(stz)損傷的胰島細(xì)胞的保護(hù)、修復(fù)作用,并初步探討其保護(hù)機(jī)制。方法ins1細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,用四氮唑藍(lán)(mtt)比色法測定細(xì)胞增殖活力,并測定細(xì)胞培養(yǎng)液中胰島素濃度、丙二醛(mda)濃度、總抗氧化能力(taoc)。結(jié)果芍藥苷可促進(jìn)ins1細(xì)胞釋放胰島素。stz損傷后,ins1細(xì)胞活力降低;胰島素分泌量減少;mda含量明顯升高;taoc下
2、降。芍藥苷保護(hù)組能不同程度改善stz引起的上述指標(biāo)的改變。結(jié)論芍藥苷可促進(jìn)ins1細(xì)胞釋放胰島素,對stz損傷的ins1細(xì)胞有顯著的保護(hù)作用,這種作用可能是通過提高ins1細(xì)胞的抗氧化能力實(shí)現(xiàn)的?!娟P(guān)鍵詞】芍藥苷;ins1細(xì)胞;stz;抗氧化能力 【abstract】objectivetostudytheeffectofthetraditionalchinesemedicinemonomerpaeoniflorinonins1andtheprotectiveandprostheticeffectsofpaeoniflorinonstzinducedins
3、1celldamage,andtoexploreitsprotectivemechanisms.methodsaftersubculturingins1cells,thecellviabilityinedbytetrazolium(mtt)assay;andinsulinconcentrations,malondialdehyde(mda)concentrationandtotalantioxidantcapacity(taoc)ofcellculturemediumotedthereleaseofinsulin;afterstzinjury,thecellvia
4、bilityandinsulinofins1daconcentrationprovedtheseindicatorsthatinducedbystzonvariousextent.conclusionspaeoniflorincanpromotetheinsulinreleaseofins1cells,andhasasignificantprotectiveeffectonstzinducedins1cellsdamage,thatmaybeachievedthroughincreasingantioxidantcapacityofins1cells. 【
5、keyda)的含量,提高總抗氧化能力(taoc)水平。而芍藥苷對胰島細(xì)胞有否作用,目前國內(nèi)外尚未見報道。因此本實(shí)驗觀察了芍藥苷對胰島細(xì)胞的影響及對stz損傷后胰島細(xì)胞的保護(hù)、修復(fù)作用,并初步探討其作用機(jī)制?! ?材料與方法 1.1材料 大鼠胰島素瘤細(xì)胞(ins1)購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心(cctcc),中藥單體芍藥苷購自陜西旭煌植物科技公司,1640培養(yǎng)基購自gibco公司,小牛血清購自杭州四季青公司,噻唑藍(lán)(mtt)購自sigma公司,胰島素放射免疫試劑盒購自中國原子能研究所,taoc、mda試劑盒購自南京建成生物工程研究所?! ?.2方法 1.2.1
6、細(xì)胞培養(yǎng) ins1用含10%小牛血清的1640培養(yǎng)液,37℃,5%co2飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),0.25%胰蛋白酶1ml消化2~4min后傳代,分瓶繼續(xù)培養(yǎng),2~3d傳代一次?! ?.2.2胰島素、mda、taoc測定 ins1按1×105個/ml、每孔200μl置于96孔培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后,分別加入不同濃度的葡萄糖(5.6、8.4、11.2、16.8、22.4、33.6mmol/l)、鏈脲佐菌素(stz)及芍藥苷,藥物容量均為10μl。藥物作用一定時間后,收集細(xì)胞培養(yǎng)液,用放射免疫法測胰島素含量,比色法測定mda含量和taoc?! ?.2.3mtt法
7、測定胰島細(xì)胞增殖活力 ins11×105個/ml、每孔100μl置于96孔培養(yǎng)板,培養(yǎng)24h后,分別加入各濃度藥物作用12h后,每孔加入5mg/ml的mtt10μl,放入孵箱中培養(yǎng)4h后,每孔加入二甲基亞砜100μl,過夜,用全自動酶標(biāo)儀測定570nm處吸光度(a)值,進(jìn)行組間比較?! ?.3分組 共分為五組:①正常對照組:培養(yǎng)的ins1細(xì)胞不做任何干預(yù)處理;②芍藥苷組:培養(yǎng)液中分別加入終濃度為1×10-5mol/l、1×10-6mol/l、1×10-7mol/l的芍藥苷,作用12h;③stz損傷組:培養(yǎng)液中加入stz,使終濃度為3mol/l