新疆多脂鱗傘對不同氮源物質(zhì)的多樣性利用特征

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1、新疆多脂鱗傘對不同氮源物質(zhì)的多樣性利用特征劉淼１ａ，１ｂ，林辰壹１ａ，１ｂ，曹艷１ａ，１ｂ，馬海１ａ，１ｂ，魏鵬２（１．新疆農(nóng)業(yè)大學，ａ．林學與園藝學院；ｂ．設(shè)施農(nóng)業(yè)研究所，烏魯木齊８３００５２；２．新疆農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所，烏魯木齊８３００９１）摘要：通過新疆阿瓦提野生多脂鱗傘（Ｐｈｏｌｉｏｔａａｄｉｐｏｓａ）氮源物質(zhì)的選擇性利用能力評價，掌握新疆野生多脂鱗傘種質(zhì)資源氮代謝特性，為資源保護和種質(zhì)創(chuàng)新提供理論依據(jù)。通過在１５種不同含氮處理培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)特征、菌絲體顯微觀察、生長量、生長速率、生長高峰期、滿皿時間、達到總生長

2、量５０％的天數(shù)的分析表明，當?shù)礊榕Ｈ飧?、蛋白胨、酵母膏、硝酸銨、硝酸鉀、硫酸銨、氯化銨、谷氨酰胺和天門冬氨酸時，多脂鱗傘ＬＬ－０１菌絲體生長速度快、活力強、長勢整齊、菌落形態(tài)結(jié)構(gòu)完整、鎖狀聯(lián)合發(fā)育正常。其中當有機氮為蛋白胨、無機氮為硝酸銨、氨基酸類物質(zhì)為谷氨酰胺時，菌絲體總生長量分別達到７７．７０ｍｍ、７９．９０ｍｍ和６５．２７ｍｍ。闡明了多脂鱗傘對不同性質(zhì)的氮源采用了不同的氮代謝途徑，表現(xiàn)出對不同類型的含氮物質(zhì)的利用速率和利用效率的差異，且具有氮源利用的多樣性特征。..關(guān)鍵詞：新疆；多脂鱗傘（Ｐｈｏｌｉｏｔａａｄｉｐｏｓａ）；

3、蛋白胨；硝酸銨；谷氨酰胺中圖分類號：Ｓ６４６文獻標識碼：Ａ：０４３９－８１１４（２０１５）０４－０８２７－０４ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．０４．０１５收稿日期：２０１４－０７－１０基金項目：新疆維吾爾自治區(qū)十二五重大專項（２０１１３０１０４－２－２）；國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目（２０１３１０７５８０２０）簡介：劉淼（１９８７－），女，遼寧岫巖人，碩士，主要從事食用菌研究，（）１８２９９１４４１５４（電子信箱）ｌｉｕｍｉａｏ１９８７４２６５２２＠１２６．ｃｏｍ；通信，林辰壹，女

4、，教授，主要從事蔬菜種質(zhì)資源評價與利用、食用菌種質(zhì)資源評價與利用研究，（電子信箱）ｌｉｎｃｈｅｎｙｉ６５＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。氮源是構(gòu)成菌體蛋白質(zhì)、核酸、酶類以及其他含氮化合物的主要成分，是野生菌生長所必需的物質(zhì)。氮源一般不提供能量，是食用菌重要的營養(yǎng)物質(zhì)之一［１］，野生食用菌可以利用銨鹽、硝酸鹽在內(nèi)的無機氮和各種有機氮，并將其中的氮轉(zhuǎn)變?yōu)榈?，維持其快速生長。氮源也是野生食用菌形成人體所需要的維生素、氨基酸等活性物質(zhì)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)［２，３］，尤其與增強機體的免疫能力、抗腫瘤、降血壓、抗衰老等物質(zhì)的合成密切相關(guān)［４］。新疆的多脂鱗傘

5、主要分布于新疆天山、阿勒泰山脈的河谷闊葉林中，當?shù)厝朔Q之為木黃菇、肥鱗耳、黃絲菌或柳樹菌［５］。多脂鱗傘是球蓋菇科（Ｓｔｒｏｐｈａｒｉａｃｅａｅ）鱗傘屬（Ｐｈｏｌｉｏｔａ）的一種具有堅果味道的食藥用菌［６，７］。無機氮源中的硝酸鹽和銨鹽，有機氮源中的氨基酸、酰胺和胺等是重要的氮源，研究證明，０．１％～０．３％蛋白胨是多脂鱗傘最佳氮源［８，９］。新疆特殊自然條件下許多生物表現(xiàn)出遺傳多樣性特征，本研究以新疆阿瓦提縣野生食、藥用真菌多脂鱗傘［Ｐｈｏｎｌｉｏｔａａｄｉｐｏｓａ（Ｆｒ．）Ｑｕéｌ．］為對象，開展了多脂鱗傘對不同性質(zhì)氮源的選擇

6、性利用能力研究。通過探討新疆阿瓦提縣野生的多脂鱗傘對不同性質(zhì)氮源物質(zhì)的利用是否存在多樣性特點，為多脂鱗傘突變菌株篩選、雜交育種以及生理生化研究奠定理論基礎(chǔ)。１材料與方法１．１野生多脂鱗傘的獲得與菌絲體活化野生多脂鱗傘采自新疆阿瓦提縣（３９°３１′Ｎ、７９°４５′Ｅ、１０２８ｍＡｌｔ）拜什艾日克鎮(zhèn)農(nóng)田防護林柳樹的枯洞中。經(jīng)多代分離獲得穩(wěn)定多脂鱗傘ＬＬ－０１，試驗菌株由新疆農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供。以ＰＤＡ加富培養(yǎng)基為活化培養(yǎng)基，滅菌后趁熱倒平板，取大小為５ｍｍ×５ｍｍ菌種塊接種，２５℃黑暗條件下菌絲體活化培養(yǎng)。１．２多脂鱗傘菌株

7、ＬＬ－０１對不同種類氮源的選擇性利用研究無氮培養(yǎng)基的基本配方（ＣＫ）由２０ｇ葡萄糖、２ｇ磷酸二氫鉀、１ｇ硫酸鎂、０．０５ｇ維生素Ｂ１、２０ｇ瓊脂組成，定容至１０００ｍＬ［１０，１１］。分別加入２ｇ的大豆、大豆芽、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素、硝酸銨、硝酸鉀、硫酸銨、氯化銨、草酸銨、谷氨酰胺、天門冬氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸，調(diào)ｐＨ至７，其他步驟和方法同“１．１”所述，恒溫培養(yǎng)７ｄ。１．３指標測定與數(shù)據(jù)處理菌絲長勢：＋＋＋表示長勢濃密，＋＋表示長勢一般，＋表示長勢差且稀疏，－－表示萎縮，－表示不生長。菌落形態(tài)特征：○表示邊緣整齊完整，□

8、表示老化斑點，◎表示菌絲干縮，¤表示菌絲松散，☆表示菌絲有爬壁，同時觀測菌絲生長圈數(shù)量以及菌絲是否吐水、菌落形狀、中央隆起或倒伏、轉(zhuǎn)色、氣味、是否有雜菌抑制線。顯微特征觀察：在１０×４０倍ＭｏｔｉｃＳＦＣ－２８顯微鏡下觀測菌絲粗細、分支、形狀以及每