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《游離脂肪酸對大鼠胰島細胞體外分泌功能的影響論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、游離脂肪酸對大鼠胰島細胞體外分泌功能的影響論文惠曉麗，王惠芳，劉驚濤，劉靖芳，徐利【關(guān)鍵詞】游離脂肪酸摘要：目的探討飽和脂肪酸軟脂酸和單不飽和脂肪酸油酸對大鼠胰島細胞體外分泌胰島素功能的影響。方法體外分離大鼠胰島細胞，分為：①濃度梯度組，將0.125、0.25、0.5mmol/L軟脂酸(PA)和油酸(OA)分別與胰島細胞共培養(yǎng)48h；②時間梯度組，將0.25mmol/L軟脂酸、油酸及二者的混合物與胰島細胞共培養(yǎng)24、48、72h.freelmol/L)，高糖刺激下OA組胰島素分泌高于PA組；②時間梯度組，PA、OA及混合組，葡
2、萄糖刺激后胰島素分泌水平均明顯減少，隨時間延長，胰島素分泌逐漸減低；相同時間段，各組胰島素分泌無差異(P0.05)。結(jié)論PA和OA對大鼠胰島細胞分泌功能均有一定的抑制作用，呈劑量依賴性，PA抑制程度呈時間依賴性；高濃度時PA抑制程度大于OA；OA對PA誘導(dǎo)的胰島細胞分泌功能損傷無保護及協(xié)同效應(yīng)。關(guān)鍵詞：游離脂肪酸；軟脂酸；油酸；胰島細胞；葡萄糖刺激的胰島素分泌ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectsofsaturatedfreefattyacidspalmiticacid(PA)andmonoun
3、saturatedfreefattyacidsoleicacid(OA)ontheinsulinsecretingfunctionofratpancreaticislets.MethodsIsolatingandculturingtheratpancreaticisletsinvitro,①theconcentrationgroupexposedtheisletstoPA,OAatdifferentconcentrations(0.125,0.25,0.5mmol/L)for48h;②thetimegroupexposedth
4、eisletsto0.25mmol/LPA,OAandakindofmixtureofthem(bothconcentrationsare0.25mmol/L)for24h,48h,72h,thenmadeaglucosestimulatedinsulinsecretiontestrespectively,examinedinsulinlevelineverygroupbyradioimmunoassayafterstimulatedbylo.Results①Theconcentrationgroupinsulinleveli
5、neverygroupofPAorOAafterstimulatedbylomol/L),insulinlevelofOAgroupafterstimulatedbyhighglucoseishigherthanthatofPAgroup;②ThetimegroupinsulinlevelineverygroupofPA,.freelixturegroupafterstimulatedbyloeduration.ConclusionBothPAandOAexertinhibitionontheinsulinsecretionf
6、unctionofratpancreaticislets,andthedegreeofimpactindicatsaconcentrationdependantfashion.TheeffectmadebyPAindicatsatimedependantfashion.OAcanntprotectisletsfromPAinducedtoxicityandtheydonthavesynergisticeffectsonimpairingthesecretingfunctionofislets.KEYI1640購自Gibco公司
7、，胰島素放免檢測試劑盒購自中國原子能科學(xué)院。成年SD大鼠，8-10周齡，體重250-300g，購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。1.2胰島的分離純化成年SD大鼠,腹腔麻醉，剖腹，絲線接扎膽總管入十二指腸處，破心放血處死。膽總管內(nèi)插管，逆行灌注0.5g/L膠原酶Ⅴ10mL，分離已膨脹胰腺，38℃水浴振蕩10min取出，冰浴中撕碎，繼續(xù)38℃水浴振蕩10min后，DHanks液終止消化，未消化組織加入膠原酶Ⅴ繼續(xù)消化，重復(fù)1-2次，直到組織完全消化。收集所有消化液，500μm篩網(wǎng)過濾，DHanks液離心洗滌3遍，沉淀物制成懸液。
8、離心管中，依次加入250、200、110g/LFicoll分離液和胰島懸液，3000r/min離心20min，分層，吸出各界面細胞，DHanks液離心洗滌3遍，置入RPMI1640培養(yǎng)液(含150mL/L小牛血清)中，37℃、50mL/LCO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。1.3游離脂肪酸對大
