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1、玻璃化冷凍對(duì)豬卵母細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響第24堂顰.2期上海交通大學(xué)(農(nóng)業(yè)科學(xué)版)Vo1.24No.22006年4月JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYfAGRICULTURALSCIENCE)Apr.2006文章編號(hào):1671-9964(2006)02.0121.06玻璃化冷凍對(duì)豬卵母細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響朱淑文,張菁,華修國(guó),朱秀萍,唐峰,徐動(dòng)(上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院.上海201101)摘要:豬體外成熟培養(yǎng)的卵母細(xì)胞用平皿.微滴法玻璃化冷凍,冷凍解凍后對(duì)其超微結(jié)構(gòu)損傷和正常的體外成熟培養(yǎng)的卵母細(xì)胞進(jìn)行了電鏡觀察比
2、較.結(jié)果表明,玻璃化冷凍的卵母細(xì)胞解凍后有不同程度的結(jié)構(gòu)損傷.包括:透明帶破裂;微絨毛幾乎消失;有的部位質(zhì)膜模糊甚至破裂;質(zhì)膜下皮質(zhì)顆粒減少;線粒體膨脹,電子致密度下降,嵴消失;大量囊泡在質(zhì)膜周圍變形融合;細(xì)胞基質(zhì)出現(xiàn)空白區(qū).玻璃化冷凍引起卵母細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷是導(dǎo)致卵母細(xì)胞解凍后存活力下降和受精率降低的主要原因.關(guān)鍵詞:卵母細(xì)胞;平皿-微滴法玻璃化冷凍;超微結(jié)構(gòu);豬中圖分類號(hào):$828.34文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碣:AUltrastructuralChangesinPorcineOocytesCryopreservedbyVitrificationZHUShu—w
3、en,ZHANG.矗HUAXiu-guo,ZHUXiu-ping,TANG忍晦XUDong(SchoolofAgriculttlreandBiology,ShanghaiJiaotongUniv.,Shanghai201101,China)Abstract:Followinginvitromaturation.porcineoocyteswet℃cryopreservedbydish-micmdmpme~odvitrification.Theporcineoocyteswerevitrified,themorphol0calynormalrate
4、WBB39.94%,thecleavagerate(21.67%)andblastoeystrate(7.69%)wassignificantlylowerthancontrolgroupCP<O.05).Theuhrastructureofvitrifiedoocyteswasassessedbytransmissionelectron血一cmscopy(TEM)andcomparedwiththatofuntreatedcontroloocytesinordertodeterminethevariouskindsofultrastruc
5、tmaldam-ageduetovitrification.Vitrificationinducedsomeultrastructuralchanges.suchaszonapellucidacrack;thedisappearanceofal-mostallthemicmvilli;invagination,indistinctionandevenraptureoftheoolemma;fewercorticalgranulesintheooplasm;theswellingofmitochondriatogetherwithreducedma
6、trixdensityanddisappearanceofcristae;thevesiclesmigratedperipherallyintheooplasm.becameCOl1nuent;disorganizationofthematrix.Keywords:ooeyte;dish-rnicmdropme山od;vitrification:ultrastmcture;pomine隨著動(dòng)物胚胎工程技術(shù)的迅速發(fā)展.卵母細(xì)胞的需求量急劇增加.卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)可充分利用各種動(dòng)物卵母細(xì)胞資源,為細(xì)胞核移植,轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等提供豐富而方便的材料來源,使
7、這些高新技術(shù)不受時(shí)問,地域限制,隨時(shí)隨地進(jìn)行,從而為其走向?qū)嵱没?商業(yè)化發(fā)展開辟道路.玻璃化冷凍是一種不需要昂貴的儀器設(shè)備.簡(jiǎn)便快速的冷凍方法.成為低溫生物學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一.高濃度的玻璃化冷凍液對(duì)卵母細(xì)胞的化學(xué)毒害作用較大.冷凍解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力明顯受損.因此,冷凍液含量的多少對(duì)解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育至關(guān)重要.王果等,】利用平皿玻璃化冷凍小鼠卵母細(xì)胞獲得成功.由于豬卵母細(xì)胞與其他家畜相比對(duì)低溫的耐受性差,這給豬卵母細(xì)胞的冷凍造成了很大的困難閉.關(guān)于豬卵母細(xì)胞冷凍保存研究尚處于探索階段,特別是玻璃化冷凍對(duì)豬卵母細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的影響等方面收稿
8、日期#2005.08.05基金項(xiàng)目:上海市科委國(guó)際交流項(xiàng)目(015407005)作者簡(jiǎn)介:朱淑3C(1960.).女,山東龍口市人,副教
