snt 1141-2002 鱗球莖莖線蟲(chóng)檢疫鑒定方法

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1、鱗球莖莖線蟲(chóng)檢疫鑒定方法MethodsforquarantineandidentificationofDitylenchusdipsaci(Kühn)FilipjevSN/T1141—2002前言本標(biāo)準(zhǔn)的附錄B和附錄C為規(guī)范性附錄,附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫局、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:宋紹祚、戚龍君、林茂松。本標(biāo)準(zhǔn)系首次發(fā)布的檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了對(duì)鱗球莖莖線蟲(chóng)檢疫和鑒定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于

2、花卉和蔬菜的塊莖、鱗莖、球莖等根莖部分和其他寄主植物種子、花、莖、葉及殘?bào)w中鱗球莖莖線蟲(chóng)的檢疫和鑒定。2原理鱗球莖莖線蟲(chóng)Stemandbulbnematode,學(xué)名:Ditylenchusdipsaci(Kühn,1857)FiIipjeV,屬于線蟲(chóng)門(mén)(Nemata)、側(cè)尾腺綱(Secernentea)、墊刃目(Tylenchida)、粒線蟲(chóng)科(Anguinldae)、莖線蟲(chóng)屬(Dityenchus)。是一種遷移性內(nèi)寄生線蟲(chóng),被侵染的球莖發(fā)生腐爛,切成片時(shí)有褐色環(huán)紋。受侵染的植株常矮化、腫脹、畸形

3、,甚至最終死亡。在植物的種子、花、花序、芽、莖、匍匐莖、根狀莖及土內(nèi)可發(fā)現(xiàn)此蟲(chóng)。該線蟲(chóng)是一種危害450多種植物(參見(jiàn)附錄A)的寄生性線蟲(chóng),又稱(chēng)作起絨草莖線蟲(chóng),它的地理分布、寄主范圍、傳播途徑、生物學(xué)和形態(tài)學(xué)特征是該檢疫鑒定方法的依據(jù)。3儀器、用具3.1生物顯微鏡(100倍一1000倍,具有目鏡測(cè)微尺或者繪圖儀、監(jiān)視器等)。3.2體視顯徽鏡(10倍~90倍,具透射光源)。3.3冰箱。3.4加熱板(80℃以下)。3.5打孔器。3.6載玻片。3.7蓋玻片。3.8分樣篩(100目、500目)。3.9燒杯(

4、500mL、1000mL)。3.10漏斗。3.11漏斗架。3.12乳膠管。3.13止水夾。3.14凹玻片。3.15指形管。3.16剪刀。3.17挑針。3.18淺盤(pán)(上盤(pán)、下盤(pán))。3.19線蟲(chóng)濾紙。3.20酒精燈。3.21培養(yǎng)皿。3.22試管。3.23紗布。3.24干燥器。3.25記號(hào)筆。3.26玻璃纖維絲(3mm~5mm)。4藥品4.1指甲油。4.2TAF固定液(40%甲醛7mL、三乙醇胺2mL和蒸餾水91mL混合而成)。4.3乳酚油(苯酚20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸餾水20mL混合而

5、成)。4.4石蠟。5現(xiàn)場(chǎng)檢疫5.1抽樣5.1.1抽樣方法棋盤(pán)式、五點(diǎn)式或隨機(jī)抽樣。5.1.2抽樣數(shù)量5.1.2.1塊莖、鱗莖、球莖按總件數(shù)的5%~20%抽樣,最低抽檢10件且不少于l000粒,取樣的數(shù)量為:500粒以下取一份;501?!?000粒取二份;2001粒~5000粒取三份;5001粒~10000粒取四份;10001粒以上每增加10000粒增取一份樣品,不足10000粒的余量計(jì)取一份樣品。每份樣品為20粒。5.1.2.2整株植物或者插枝按總件數(shù)的5%~20%抽樣,最低抽檢10件且不少于50

6、0株。取樣的數(shù)量為:50株以下抽取五株;51株~200株抽取10株;201株~1000株抽取15株;1001株~5000株抽取20株;5001株以上每增加5000株增取五株,不足5000株的余量計(jì)取五株樣品。5.1.2.3種子按總件數(shù)的5%~20%抽樣,最低抽檢10件,小包裝(指最小單位包裝不大于0.5kg的),只扦取室內(nèi)檢驗(yàn)樣品。取樣數(shù)量為:10kg以下取一份;11kg~100kg取二份;101kg~500kg取三份;501kg~1000kg取四份;1001kg~2000kg取五份;2001kg

7、~5000kg取六份;5001kg~10000kg取七份;lO001kg~100000kg,每增加5000kg增取一份樣品,不足5000kg的余量,計(jì)取一份樣品;100001kg以上每增加50000kg增取一份樣品,不足50000kg的余量,計(jì)取一份樣品。每份樣品的重量為1kg~2kg。5.2外觀癥狀的檢查對(duì)花卉和蔬菜的塊莖、鱗莖、球莖等根莖部分和其他寄主植物種子及花、莖、葉進(jìn)行檢查,注意檢查有無(wú)矮化、腫脹、畸形和腐爛等癥狀,收集上述可疑植物材料及所夾帶的土壤等,一并帶回實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。6實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)對(duì)

8、于抽取的樣品,可用淺盤(pán)分離法或漏斗法分離線蟲(chóng)(見(jiàn)附錄B)。分離獲得的水樣在體視顯微鏡下檢查,然后挑取線蟲(chóng)若干條制成臨時(shí)玻片(制作方法見(jiàn)附錄C)在顯微鏡下鏡檢,觀察線蟲(chóng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。7形態(tài)鑒定特征7.1莖線蟲(chóng)屬形態(tài)鑒定特征標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費(fèi)下載雌蟲(chóng)一般不肥大,不彎成螺旋形,長(zhǎng)0.6mm~1.5mm,有的可達(dá)2mm;表皮有很細(xì)的環(huán)紋,側(cè)區(qū)有四條至六條刻線;口針細(xì)小,多數(shù)長(zhǎng)度為7μm~11μm;中食道球有或無(wú)瓣,偶爾無(wú)明顯的中食道球,峽部與后食道腺之間無(wú)縊縮,后食道腺

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