各種液相色譜檢測(cè)器介紹

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1、各種液相色譜檢測(cè)器介紹各種液相色譜檢測(cè)器介紹液色迷人http://hplc2.blog.163.com/紫外吸收檢測(cè)器ultravioletabsorptiondetector紫外吸收檢測(cè)器ultravioletabsorptiondetector簡(jiǎn)稱紫外檢測(cè)器（UV），是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計(jì)的檢測(cè)器。因?yàn)榇蟛糠殖Ｒ?jiàn)有機(jī)物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)物質(zhì)都具有紫外吸收性質(zhì)，所以該檢測(cè)器是液相色譜中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)器，幾乎所有液相色譜儀都配置了這種檢測(cè)器。它不僅有較好的選擇性和較高的靈敏度，而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太敏感，因此既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。其檢

2、測(cè)靈敏度在mg/L至mg/L范圍?？梢?jiàn)光檢測(cè)器visiblelightdetector可見(jiàn)光檢測(cè)器visiblelightdetector又稱分光光度檢測(cè)器，是基于溶質(zhì)分子吸收可見(jiàn)光的原理設(shè)計(jì)的檢測(cè)器。能夠直接采用可見(jiàn)光檢測(cè)的溶質(zhì)不是很多，而且多數(shù)靈敏度也不高，但采用具有高摩爾吸光系數(shù)的有機(jī)試劑（配位體和螯合劑）作為衍生化試劑進(jìn)行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度檢測(cè)法是相當(dāng)有用的，特別是在金屬離子配合物液相色譜中的應(yīng)用是相當(dāng)成功的。低壓梯度low-pressuregradient低壓梯度low-pressuregradient又稱外梯度，是在低壓狀態(tài)下完成流動(dòng)相強(qiáng)度調(diào)整的梯度裝置

3、。只需一個(gè)高壓泵，與等度洗脫輸液系統(tǒng)相比，就是在泵前安裝了一個(gè)比例閥，混合就在比例閥中完成。因?yàn)楸壤y是在泵之前，所以是在常壓（低壓）下混合之后再增壓輸送到色譜柱的。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器克服常見(jiàn)的HPLC檢測(cè)難題雖然陣法光散射檢測(cè)器(EvaportivelightScattering,ELSD)已經(jīng)開(kāi)發(fā)生產(chǎn)15年，但是對(duì)于許多色譜工作者來(lái)說(shuō)，它仍是一個(gè)新產(chǎn)品。第一臺(tái)ELSD是由澳大利亞的UnionCarbide研究實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)家研制開(kāi)發(fā)的，并在八十年代初轉(zhuǎn)化為商品，八十年代以激光為光源的第二代ELSD面世。此后，通過(guò)不斷設(shè)計(jì)提高了ELSD的操作性能?，F(xiàn)在ELSD越來(lái)越多的作為通用型

4、檢測(cè)器]用于高效液相色譜，超臨界色譜（SFC）和逆流色譜中。ELSD最大的優(yōu)越性在于能檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物，如：碳水化合物、脂類(lèi)、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物，并在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測(cè)未知化合物。ELSD的通用檢測(cè)方法消除了常見(jiàn)于傳統(tǒng)HPLC檢測(cè)方法中的難點(diǎn)，不同于紫外和熒光檢測(cè)器，ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性，任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè)，不受其官能團(tuán)的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比，因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物。示差檢測(cè)器（RI）也可以說(shuō)是一種通用型檢測(cè)器，打它靈敏度低，并與梯度脫洗不相容。質(zhì)譜是

5、另一種通用型檢測(cè)器，但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。ELSD的獨(dú)特檢測(cè)方法，對(duì)于它的多種用途和高性能至為關(guān)鍵。ELSD檢測(cè)只要分為三個(gè)步驟：（1）用惰性氣體霧化脫洗液（2）流動(dòng)相在加熱管（漂移管）中蒸發(fā)（3）樣品顆粒散射光后得到檢測(cè)。討論:UV檢測(cè)的主要缺點(diǎn)在于紫外不吸收的化合物靈敏度很低。ELSD可以檢測(cè)任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品。ELSD的通用性響應(yīng)值使得ELSD響應(yīng)值比UV響應(yīng)值更能代表樣品的質(zhì)量不同于紫外檢測(cè)只能使用不吸收紫外的流動(dòng)相，ELSD能與任何的揮發(fā)性流動(dòng)相相容，不論其光學(xué)特性。您可根據(jù)樣品的溶解度或分離特性選擇流動(dòng)相，例如選擇氯仿和丙酮用于脂類(lèi)的分離

6、以提高樣品的溶解性。用紫外檢測(cè)器定量未知物是困難的，因?yàn)闃悠返淖贤馕罩低痛順悠返馁|(zhì)量的色譜峰的大小無(wú)關(guān)。ELSD對(duì)幾乎所有的樣品給出一致的響應(yīng)因子。因此可以通過(guò)和內(nèi)標(biāo)比較定量未知化合物，此特性對(duì)于使用組合化合技術(shù)而合成的系列化合物的定量尤其有用。用組合合成技術(shù)合成的化合物通常是用HPLC聯(lián)合低波長(zhǎng)紫外或質(zhì)譜檢測(cè)進(jìn)行分析，但是，在缺乏已表面活性劑非常靈敏，并在梯度脫洗下維知結(jié)構(gòu)參數(shù)已知的參照標(biāo)準(zhǔn)品情況下，兩種方法都不能準(zhǔn)確的定量分析此種系列化合物。熒光檢測(cè)熒光檢測(cè)的主要缺點(diǎn)在于只有少數(shù)化合物產(chǎn)生熒光。大多數(shù)的分子不發(fā)熒光，但含有可衍生的官能團(tuán)用于合成能發(fā)熒光的衍生物，例如

7、，鄰苯二甲醛是一種常用熒光基團(tuán)用于柱后衍生氨基酸。雖然熒光檢測(cè)很靈敏，但對(duì)于常見(jiàn)的樣品分析來(lái)說(shuō)不需要如此高的靈敏度。因?yàn)镋LSD的響應(yīng)不依賴于熒光基團(tuán)，所以不需要衍生，因此大大降低了樣品預(yù)處理和分析時(shí)間。示差檢測(cè)：雖然示差檢測(cè)在原理上是通用型檢測(cè)器，但是它的靈敏度低，和梯度脫洗不相容，因此它對(duì)于HPLC來(lái)說(shuō)不是理想的檢測(cè)器。室溫的變化會(huì)影響基線的穩(wěn)定性，大的溶劑前沿峰可能會(huì)掩蓋前期脫洗的色譜峰。因?yàn)镋LSD在檢測(cè)前將流動(dòng)相蒸發(fā)，所以基線的噪聲和漂移都很小，因此基線穩(wěn)定和樣品檢測(cè)的靈敏度高。流