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1、豬場仔豬大腸桿菌病原藥敏試驗畜牧與飼料科學AnimalHusbandryandFeedScience豬場仔豬大腸桿菌病原藥敏試驗岑吉先(貴州省望謨縣農(nóng)業(yè)林業(yè)和扶貧開發(fā)局,貴州望謨552300)摘要:試驗通過對大腸桿菌病原進行分離,提純鑒定和藥敏實驗,找出敏感藥物,并針對性地選擇有效藥物,以期減少因臨床盲目投藥而引起藥物的超量殘留,耐藥菌株的增多或交叉耐藥,從而有效避免人為導致食品安全,環(huán)境污染的問題.關鍵詞:仔豬大腸桿菌:病原:藥敏試驗中圖分類號:$858.285.12文獻標識碼:A1研究意義大腸桿菌是人和畜禽腸道常棲菌,其中某些特殊血清型
2、對人和動物有致病性.成為制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要疾病.為此,筆者進行了豬場仔豬大腸桿菌病原藥敏試驗.2技術路線①豬場采集病料;②實驗室分離提純;③生化鑒定;④藥敏試驗;⑤確定治療方法.3研究方法通過病原微生物的分離,提純,鑒定及藥敏試驗,找出敏感藥物,并進一步篩選和確定其方劑進行治療試驗,以達到控制和治療仔豬大腸桿菌病的目的.4材料設備4.1器材滅菌鍋,培養(yǎng)皿,試管,杜氏管,滅菌棉簽,酒精燈,接種棒,濾紙,離心機,鑷子,恒溫箱,烘干箱,試管架,電爐,燒瓶,牛津杯,無菌工作臺,冰箱,電子秤,標記筆,試管刷,吸耳球.4.2藥敏紙片pH值試紙,先鋒V
3、,壯觀霉素,環(huán)丙沙星,慶大霉素,頭孢他啶,氟哌酸,氯霉素,復達欣,四環(huán)素,呋哺妥因,鏈霉素,丁胺卡那,痢特靈,左氟沙星,均由杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn).4.3鑒定藥品及培養(yǎng)基麥康凱瓊脂(上海醫(yī)學化驗所試劑廠生產(chǎn),批號為9030401),其他培養(yǎng)基均按《獸醫(yī)微生物實驗指導》(姚火春主編,第2版,中國農(nóng)業(yè)出版社)配制.5試驗方法5.1病原分離取豬場臨床診斷有嚴重腹瀉及水腫的死亡小豬淋巴結,肝,脾,在無菌條件下用無菌棉球蘸取內(nèi)容物接種于營養(yǎng)肉湯中,37℃培養(yǎng)18h,將有細菌生長的樣品試管劃線接種于SS瓊脂培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24h.選擇具有均勻
4、典型的紅色菌落接種于肉湯培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)6~12h后置于冰箱中備用.5.2生化鑒定試驗5.2.1細菌分離情況:在SS瓊脂培養(yǎng)基上菌落大小約為1~2mm,呈均勻紅色,表面光滑,濕潤;在肉湯培養(yǎng)基中呈…致渾濁,管底有灰白色沉淀,染色鏡檢分離菌均為革蘭氏陰性,中等大小,兩端鈍圓的球桿菌,呈單個或多個排列.5.2.2生化反應:分離到的3株菌均能分解葡萄糖,乳糖,產(chǎn)酸,產(chǎn)氣,不產(chǎn)生硫化氫,甲基紅試驗呈陽性.VP試驗呈陰性,吲哚試驗呈陰性,枸櫞酸鹽試驗陰性,即可確認為大收稿日期:2011-08—08作者簡介:岑吉先(1977一),男,助理獸醫(yī)師,主
5、要從事畜牧獸醫(yī)技術推廣工作.文章順序編號:1672—5190(2011)08一O110—0l腸桿菌.5.3藥敏試驗將生化鑒定后確認為大腸桿菌的菌種用滅菌棉球蘸取并均勻涂于瓊脂培養(yǎng)基中,同時貼上相應的藥敏紙片,37℃下培養(yǎng),分別于16h和24h觀察并記錄結果.5.3.1試驗結果:見表1表1大腸桿菌對14種抗菌藥物的藥敏試驗結果5.3.2討論分析:試驗結果表明.大腸桿菌對四環(huán)素耐藥率達到71%,這可能與近些年來獸醫(yī)臨床上廣泛使用該類藥物有關.由于四環(huán)素類抗菌藥物具有價格低廉,抗菌譜廣等特點,養(yǎng)殖場為了提高飼料報酬,防治畜禽疾病使用較多,因此,低
6、劑量長期使用該類藥物易使動物產(chǎn)生耐藥性.硝基呋喃類藥物呋喃妥因和痢特靈的敏感性很高,分別為85.7%和76%.為了保證動物源性食品的安全,維護人民健康,我國已經(jīng)禁止痢特靈在所有動物食品上使用.對諾氟沙星耐藥菌株達57.1%,比趙靜等報道的結果(45.0%)高,耐藥菌株有所增加;對環(huán)丙沙星的敏感性比諾氟沙星的高,這與試驗結果相一致.對卡那霉素可產(chǎn)生耐藥性.但產(chǎn)生速度較慢.與慶大霉素有單相的交叉耐藥性,兩者的耐藥性分別為47.2%和40.9%.6科學管理與綜合防控6.1飼料營養(yǎng)仔豬斷奶1~2周內(nèi)飼糧粗蛋白質(zhì)水平宜控制在17%~19%,并保證有充
7、足的常量和微量元素及多種維生素(特別是硒與VE).有條件可以在飼料中添加0.5%-1%的谷氨酰胺和益生素(按廠家說明用量添加).6.2生產(chǎn)管理仔豬出生7d開始誘食,斷奶時要少食多畜牧與飼料科學AnimalHusbandryandFeedScience犬瘟熱綜合診斷技術陶艷華.侯樂樂(1.江蘇省吳江市震澤動物防疫站,江蘇吳江215231;2.山東省青島市畜牧獸醫(yī)研究所,山東青島266000)摘要:概述了犬瘟熱的臨床癥狀,剖檢變化,細胞生物學與分子生物學診斷方法.在細胞生物學方面,對犬瘟熱的診斷主要依靠病毒分離鑒定,電鏡檢查,包涵體檢查,中和試
8、驗等.隨著分子生物學的發(fā)展,對犬瘟熱的診斷從細胞水平發(fā)展到分子水平.國內(nèi)外相繼建立起CDV核酸雜交和RT—PCR診斷技術,與傳統(tǒng)方法相比其特異性和敏感性更高.關鍵詞:犬瘟熱;診斷