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1、瘰疬清膠囊藥效學(xué)研究論文羅宇慧彭蘊(yùn)茹葉其正王志剛石磊沈明勤【摘要】目的觀察瘰疬清膠囊對(duì)動(dòng)物的止咳、抗炎及提高機(jī)體免疫力的作用。方法①小鼠灌胃瘰疬清膠囊16.0，8.0和4.0g生藥/kg后，采用濃氨水噴霧法進(jìn)行止咳實(shí)驗(yàn)，觀察動(dòng)物咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)。②大鼠灌胃瘰疬清膠囊8.0，4.0和2.0g生藥/kg的后，采用大鼠慢性炎癥瓊脂肉芽腫法，觀察肉芽腫濕重及抑制率的變化，采用角叉菜膠致大鼠足腫脹法.freelg，批號(hào)020118-2，蘇州醫(yī)藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)。濃氨水：分析純，批號(hào)981125，益林化工廠生產(chǎn)。乙酰水楊酸腸溶片(阿司匹林)：25mg/片，批號(hào)20020404，南京第二制藥廠生產(chǎn)，
2、使用時(shí)以蒸餾水配成濃度為10mg/ml的藥液供灌胃給藥。瓊脂：批號(hào)980424，中國(guó)藥品生物制品檢定所。角叉菜膠(TypeⅠ)：批號(hào)232-524-2，美國(guó)SIGMA公司生產(chǎn)。環(huán)磷酰胺粉針(CY)：200mg/瓶，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2003041521。鹽酸左旋咪唑片：25mg/片，南京第二制藥廠,批號(hào)20010104。5%雞紅細(xì)胞懸液的制備：由市售肉雞采血約10ml，以肝素生理鹽水抗凝，再按1∶1加入注射用0.9%NaCl液(NS)，充分混勻洗滌后，3000r/min離心15min，棄去上清液，余下的紅細(xì)胞再洗滌2～3次。取洗凈離心后的紅細(xì)胞4ml，用NS液配制成5%濃度
3、，現(xiàn)配現(xiàn)用。1.3儀器S-888型超聲波霧化器，中外合資道芬電子有限公司生產(chǎn)；PB303-N千分之一電子天平上海產(chǎn)；隔水式電熱水浴箱；BH-2OLYMPUS顯微鏡：日本進(jìn)口。2方法2.1小鼠止咳實(shí)驗(yàn)［1～4］取小鼠50只，稱重，隨機(jī)分為5組，每組10只，♀♂各半，分別為模型對(duì)照組（蒸餾水20ml/kg）、陽性藥咳必清對(duì)照組(0.05g/kg)和瘰疬清膠囊大、中、小劑量組(16.0，8.0和4.0g生藥/kg)。各組動(dòng)物灌胃(ig)給藥，給藥量均為20ml/kg，給藥1h后各動(dòng)物分別置于噴霧箱內(nèi)，用超聲波霧化器以相同強(qiáng)度將濃氨水霧化后噴入活動(dòng)箱內(nèi)，噴霧15s后，立即觀察動(dòng)物咳嗽潛伏期（在吸入
4、氨水氣霧后至發(fā)生咳嗽所需時(shí)間為潛伏期），并記錄2min內(nèi)的咳嗽次數(shù)，各給藥組與模型對(duì)照組進(jìn)行組間t－檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。2.2大鼠肉芽腫實(shí)驗(yàn)［1～4］肉芽腫模型：大鼠背部中線處取2.0cm×2.0cm面積脫毛，消毒，皮下注射2%瓊脂(56℃水浴保溫)2ml，注射后立即凸起球狀包塊即成。隔日取50只肉芽腫模型大鼠，全♂，隨機(jī)分5組，每組10只，分別為模型對(duì)照組(蒸餾水10ml/kg)、陽性藥阿司匹林組(0.1g/kg)、瘰疬清膠囊大、中、小3個(gè)劑量組(8.0，4.0和2.0g生藥/kg)。各組動(dòng)物ig給藥，給藥量均為10ml/kg。ig1次/d，連續(xù)給藥7d，每日觀察肉芽腫變化，末次藥后1h脫椎
5、處死大鼠，剪開肉芽部位皮膚，剝離肉芽腫瓊脂塊，稱取濕重，各給藥組與模型對(duì)照組進(jìn)行組間t－檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)處理。肉芽腫抑制率(%)按下列公式計(jì)算：抑制率（%）=模型對(duì)照組均值-給藥組均值模型對(duì)照組均值×100%2.3大鼠足腫脹實(shí)驗(yàn)［1～4］取大鼠50只，稱重，隨機(jī)分為5組，每組10只,全♂，分別為模型對(duì)照組（蒸餾水10ml/kg）、阿司匹林組（0.1g/kg）、瘰疬清膠囊大、中、小3個(gè)劑量組(8.0，4.0和2.0g生藥/kg)。給藥量均為10ml/kg。用足跖測(cè)定器測(cè)量每只大鼠左后肢正常足跖容積（10ml注射器，上口刻有標(biāo)記，內(nèi)含中性洗滌劑的水溶液，通過硬塑料管連接另一5ml注射器），用記號(hào)筆在大
6、鼠左后肢踝關(guān)節(jié)周圍做一標(biāo)記，將大鼠左后肢浸入容器，使注射器上口標(biāo)記與大鼠后肢關(guān)節(jié)標(biāo)記和液面重疊，多余液體則抽入5ml注射器內(nèi)，抽入注射器內(nèi)的液體量即為足跖容積。測(cè)量完給藥前的正常足跖容積后，各組動(dòng)物ig給藥，30min后,于左后肢足跖皮下注入1%角叉菜膠0.1ml，注射0.5h后（給藥后1h）按上述方法測(cè)量0.5，1，2，4，6，8h的足跖容積,記錄結(jié)果，并分別按下式計(jì)算腫脹率（%）和抑制率（%）。各給藥組與模型對(duì)照組進(jìn)行t－檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)處理。腫脹率（%）=致炎后足跖容積－致炎前足跖容積致炎前足跖容積×100%抑制率（%）=對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度對(duì)照組平均腫脹度×100%2.4小鼠
7、免疫實(shí)驗(yàn)2.4.1小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)取小鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只,♀♂各半。分別為正常組和環(huán)磷酰胺（CY）模型組(蒸餾水20ml/kg)、陽性藥左旋咪唑組(25mg/kg)、瘰疬清膠囊大、中、小劑量組(16.0，8.0和4.0g生藥/kg)。各組動(dòng)物灌胃(ig)給藥，給藥量均為20ml/kg，ig1次/d，連續(xù)給藥7d，第5天除正常對(duì)照組外，每組動(dòng)物腹腔注射CY40mg/kg(0.1ml/10g)，第6天
