wst 342-2011 紅細胞比容測定參考方法

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1、ICs11.020C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Ws/T342-ˉ2011紅細胞比容測定參考方法ReferenceⅡnethodforhematocrit2011-09-3o發(fā)布2012-o4-o1嗲色=力中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布Ws/T342一ˉ2011亠剛曰本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—zO09給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會提出。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:衛(wèi)生部臨床檢驗中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:彭明婷、谷小林、李臣賓、施麗飛、陸紅、申子瑜。Ws/T342-2011紅細胞比容測定參考方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了紅細胞比容測定參考方法的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于建立并運行紅細胞比容測定參考方

2、法的實驗室。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。2.1紅細胞比容hematocrit,HCT一定體積的全血中紅細胞所占容積的相對比例。2.2參考方法referencemethod一種可清楚和準(zhǔn)確描述的用于特定檢測的技術(shù),該技術(shù)要有依據(jù),可提供足夠準(zhǔn)確和精密的實驗數(shù)據(jù)以評價其他實驗方法檢測結(jié)果的有效性。若有決定性方法,參考方法的準(zhǔn)確性應(yīng)與決定性方法進行比較,并且須標(biāo)示不準(zhǔn)確度和不精密度。2.3微Ι比容法www.bzfxw.commicrohematocritmethod應(yīng)用少量全血、毛細管和高速離心機來測定紅細胞比容的方法。2.4相對離心力relativeceⅡtrifugaⅡⅡeld,RC

3、F在離心力場中,作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù),用重力加速度“g”表示。3總則為了保證參考方法測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,建立參考方法的實驗室應(yīng)與其他參考實驗室進行結(jié)果比對。4一般技術(shù)要求4.1設(shè)備與器具4.1.1微童比容測定離心機應(yīng)使用專用的微量比容測定離心機,半徑大于8cm;能在30s內(nèi)達到最大速度;離心機轉(zhuǎn)子邊緣RCF能維持10000g~15000g,離心時間至少為5min;配有一個經(jīng)校準(zhǔn)的自動定時器,最大刻度應(yīng)不小于5min,且每隔30s都標(biāo)有刻度。4.1.2紅細胞比容測定參考方法專用毛細管規(guī)格4.1.2.1材質(zhì):鈉鈣硅酸鹽玻璃;Ws/T342-ˉ20114.1,2.2長度:75mm±0

4、,5mm;4,1.2.3內(nèi)徑:1,155mm±0。085mm;4.1.2,4管壁厚度:0.18mm~0.23mm,推薦為0.⒛mm;4.1,2.5毛細管要直,管孔的內(nèi)徑的變化不能超過內(nèi)徑的2%。4.1.3顯微鏡選用一臺帶有臺式游標(biāo)卡尺的光學(xué)顯微鏡,要求配有4×或10×物鏡以及帶十字標(biāo)示的目鏡。此種測量儀器可獲得準(zhǔn)確的測量值(準(zhǔn)確到0.1mm)。4.1.4密封劑推薦使用黏土樣的密封劑。不得使用加熱方法為毛細管封口。4,1.5毛細管固定架用一塊標(biāo)準(zhǔn)的載玻片(25mm×75mm)固定于另一塊大的載玻片(50mm×75mm)上,制成毛細管固定架。4.2血液標(biāo)本的采集應(yīng)使用帶有抗凝劑的真空管采集血液標(biāo)本

5、。推薦抗凝劑為EDTA·K2(終濃度為1.4mg/mL~2.Omg/mL),也可用EDTA·K3(終濃度為1.6mg/mL~2.4mg/mL),摩爾濃度均為3,7umoVmL~5.4umol/mL。血液加人抗凝管后,管內(nèi)剩余空間至少占試管體積的⒛%。標(biāo)本置于22℃±4℃條件下,如使用EDTA·K3,應(yīng)在3h內(nèi)完成測定,使用EDTA·K2可在6h內(nèi)完成測定,避免紅細胞體積隨時間延長而膨脹www.bzfxw.com產(chǎn)生的誤差。標(biāo)本采集應(yīng)避免紅細胞溶血。5測定步驟5.1將標(biāo)本顛倒8次,使其充分混勻。5.2取兩根長75mm的毛細管,各充人血液至管長的2/3~3/4處,每根毛細管大約需要50uL血。用柔

6、軟且有吸水性的材料擦凈管外壁,水平傾斜毛細管,使吸人血柱的下端與毛細管口的距離至少為omm。5.3將毛細管垂直插人專用的密封劑里,輕輕旋轉(zhuǎn)毛細管,從密封劑中取出。插人毛細管中封口劑的長度不少于4mm,仔細觀察封口,確保封口平整,且與毛細管長軸垂直。5.4將封口的毛細管放入離心機,封口端朝向離心機轉(zhuǎn)子的邊緣。在毛細管對面,放置另一根毛細管,記錄位置編號。擰緊轉(zhuǎn)頭的蓋子。5.5在RCF10ooog~15000g條仵下離心5min。5.6在離心機自動停止后,從離心機中取出毛細管,讀數(shù)前垂直放置,應(yīng)在60min內(nèi)讀取結(jié)果。5.7于顯微鏡下觀察每根毛細管,確定界面位置用于計算紅細胞比容結(jié)果。5.7.1先

7、將毛細管固定在固定架上,再將毛細管固定架置于載物臺上。在視野里,確保架子和毛細管呈水平擺放,通過水平移動載物臺進行觀察。5.7.2在低倍鏡下觀察每一支毛細管,用游標(biāo)卡尺標(biāo)注下列界面讀數(shù):a)紅細胞/黏土;b)紅細胞/白細胞;c)血漿/空氣。5.8通過5,7.2中的界面讀數(shù)來計算紅細胞比容HCT,見式(1)。2Ws/T342-ˉ2011昭T=臀?¨?¨?¨¨¨¨(1)蠡贊瑟甾蠡饔駑恣歲5.8.1確定