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《實(shí)驗(yàn)8 植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定(蒽酮比色法)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、實(shí)驗(yàn)方案一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)實(shí)驗(yàn)，掌握測(cè)定蘿卜品質(zhì)的方法（一）蘿卜外部形態(tài)的測(cè)定1、實(shí)驗(yàn)材料取鮮樣3個(gè)∕小區(qū)直尺、蒸餾水、筆、記錄本、吸水紙2、實(shí)驗(yàn)方法．用自來(lái)水將各組蘿卜洗凈后，再用蒸餾水洗滌，擦干表面水分．每個(gè)小區(qū)取3個(gè)重復(fù)，用電子天平稱量每株的鮮重，用直尺測(cè)量植株的莖長(zhǎng)、莖粗、葉長(zhǎng)，取平均值作為指標(biāo)值實(shí)驗(yàn)(二)植物體內(nèi)可溶性糖含量的測(cè)定（蒽酮法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私廨焱y(cè)定可溶性糖含量的原理；掌握分光光度計(jì)的使用二、實(shí)驗(yàn)原理糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。不同載培條件，不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中糖類的含量。因此對(duì)
2、水果、蔬菜中可溶性糖的測(cè)定，可以了解和鑒定水果、蔬菜品質(zhì)的高低。蒽酮比色定糖法是一個(gè)快速而方便的定糖方法，在強(qiáng)酸性條件下，蒽酮可以與游離的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（還原性和非還原性）作用生成藍(lán)綠色的糖醛衍生物，其顏色的深淺與糖的含量在一定范圍內(nèi)成正比。蒽酮也可以和其他一些糖類發(fā)生反應(yīng)，但顯現(xiàn)的顏色不同。當(dāng)存在含有較多色氨酸的蛋白質(zhì)時(shí)，反應(yīng)不穩(wěn)定，呈現(xiàn)紅色。上述特定的糖類物質(zhì)，反應(yīng)較穩(wěn)定。該法特點(diǎn)：靈敏度高，測(cè)定量少，快速方便。三、材料、儀器及試劑81.材料：植物種子、白菜葉、柑桔2.儀器：分光光度計(jì)；恒溫水箱；?20ml具塞刻度試管（3支）漏斗；10
3、0ml容量瓶；刻度試管；試管架；剪刀；研缽3.試劑（1）200μg/ml標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖：AR級(jí)葡萄糖100mg，蒸餾水溶解，定容至500ml。（2）蒽酮試劑：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光處貯藏；（3）濃硫酸四、實(shí)驗(yàn)方法1.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取6支20ml具寒試管，編號(hào)，按下表數(shù)據(jù)配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。在每管中均加入0.5ml蒽酮試劑，再緩慢地加入5ml濃H2SO4，搖勻后，打開試管塞，置沸水浴中煮沸10分鐘，取出冷卻至室溫，在620nm波長(zhǎng)下比色，測(cè)各管溶液的光密度值（OD），以標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，光密度值為縱坐標(biāo)，作出
4、標(biāo)準(zhǔn)曲線。?管?號(hào)123456標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖原液(ml)(200μg/ml)00.20.40.60.81.0蒸餾水2.01.81.61.41.21.0葡萄糖含量（μg）040801201602002.樣品中可溶性糖的提取稱取1克白菜葉，剪碎，置于研缽中，加入少量蒸餾水，研磨成勻漿，然后轉(zhuǎn)入20ml刻度試管中，用10ml蒸餾水分次洗滌研缽，洗液一并轉(zhuǎn)入刻度試管中。置沸水浴中加蓋煮沸10分鐘，冷卻后過(guò)濾，濾液收集于100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。3.糖含量測(cè)定用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度試管中，加1ml水和0.5ml蒽酮試劑。再緩慢加入
5、5ml濃H2SO4（注意：濃硫酸遇水會(huì)產(chǎn)生大量的熱?。?，蓋上試管塞后，輕輕搖勻，再置沸水浴中10分鐘（比色空白用2ml蒸餾水與0.5ml蒽酮試劑混合，并一同于沸水浴保溫10分鐘）。冷卻至室溫后，在波長(zhǎng)620nm下比色，記錄光密度值。查標(biāo)準(zhǔn)曲線上得知對(duì)應(yīng)的葡萄糖含量（μg）。五、結(jié)果計(jì)算樣品含糖量（g/100g鮮重）=查表所得糖含量（μg）×稀釋倍數(shù)×100/樣品重（g）×106六、注意事項(xiàng)8（1）加濃H2SO4時(shí)應(yīng)緩慢加入，以免產(chǎn)生大量熱量而爆沸，灼傷皮膚，如出現(xiàn)上述情況，應(yīng)迅速用自來(lái)水沖洗。（2）水浴加熱時(shí)應(yīng)打開試管塞。實(shí)驗(yàn)（三）維生素C的定量測(cè)定（2,6-
6、二氯酚靛酚滴定法）?一、目的要求:（1）學(xué)習(xí)并掌握定量測(cè)定維生素C的原理和方法。（2）了解蔬菜、水果中維生素C含量情況。二、實(shí)驗(yàn)原理:維生素C是人類營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一，缺少它時(shí)會(huì)產(chǎn)生壞血病，因此又稱為抗壞血酸（ascorbicacid）。它對(duì)物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用。近年來(lái)，發(fā)現(xiàn)它還有增強(qiáng)機(jī)體對(duì)腫瘤的抵抗力，并具有化學(xué)致癌物的阻斷作用。維生素C是具有L系糖型的不飽和多羥基物，屬于水溶性維生素。它分布很廣，植物的綠色部分及許多水果（如橘子、蘋果、草莓、山楂等）、蔬菜（黃瓜、洋白菜、西紅柿等）中的含量更為豐富。維生素c具有很強(qiáng)的還原性。它可分為還原性和脫
7、氫型。金屬銅和酶（抗壞血酸氧化酶）可以催化維生素C氧化為脫氫型。根據(jù)它具有還原性質(zhì)可測(cè)定其金屬含量。還原型抗壞血酸能還原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈紅色，還原后變?yōu)闊o(wú)色。因此，當(dāng)用此染料滴定含有維生素C的酸性溶液時(shí)，維生素C尚未全部被氧化前，則滴下的染料立即被還原成無(wú)色。一旦溶液中的維生素C已全部被氧化時(shí)，則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以，當(dāng)溶液從無(wú)色變成微紅色時(shí)即表示溶液中的維生素C剛剛?cè)勘谎趸?，此時(shí)即為滴定終點(diǎn)。如無(wú)其它雜質(zhì)干擾，樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量
8、成正比。本法用于測(cè)定還原型抗壞血酸，總
