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《實驗大鼠相關(guān)操作技術(shù)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、一、保定技術(shù)保定的定義，是指使用手或以器械對動物個體之活動作部分或完全之限制，以便進行檢查、采樣、投藥、治療或進行實驗操作等之手段而言。保定無疑是進行所有動物實驗前的基本步驟，但在進行實驗的過程中也需避免使動物產(chǎn)生不必要的傷害，以下為進行實驗動物保定時之重要須知：(一)?不可將保定裝置視為正常之飼養(yǎng)方式。(二)?不可僅僅為處理或控制上圖方便，而恣意使用保定裝置。(三)?在可完成實驗?zāi)康臑榍疤嵯?，需盡量縮短保定之時間。(四)?在進行保定之前，應(yīng)訓(xùn)練動物去適應(yīng)保定設(shè)備與進行保定的人員，保定人員也應(yīng)預(yù)先熟練保定
2、相關(guān)之技術(shù)。(五)?保定期間若動物有受傷或不適之情形時，則應(yīng)將動物暫時性或永久性移離保定裝置，并進行必要之治療。二、大鼠的保定體型較小、未達120?g的大鼠，可以采用類似保定小鼠的方式。體型較大的大鼠，則應(yīng)雙手保定，由一人執(zhí)行保定，一人雙手采樣或投藥。也可以采用保定架保定。抓取大鼠時穿戴橡膠手套，可以避免因直接接觸大鼠所引起的過敏。盡量避免從大鼠的前方來接觸他們，可避免受大鼠咬傷。1.抓取大鼠時可以握住大鼠尾根部，以此對大鼠進行簡單的搬運或移動。不可抓取大鼠尾巴末端，抓取末端可能會造成大鼠尾巴的脫落。如將
3、大鼠尾巴提起后大鼠劇烈搖晃反抗，不可突然將抓著尾巴的手放開，大鼠可能會因此而摔傷。2.由大鼠后方慢慢接近，單手輕握住其胸部，再將其提起，另一手可再抓住其尾根部、兩只后腳或下腹部。抓起后如大鼠劇烈掙扎，可輕微搖晃，大鼠的掙扎會稍微和緩。抓取時避免將手指至于大鼠嘴巴可及之處，可避免被大鼠咬傷。3.大鼠保定架三、大鼠的采血采血對非專職實驗動物從業(yè)人員而言，是一門難度頗高的技術(shù)。采血的技術(shù)只能靠熟能生巧與細心的摸索正確的手感來精進。采血會造成實驗動物較嚴(yán)重的緊迫，因此建議給予適當(dāng)?shù)穆樽砘蜴?zhèn)靜，可以有助于采血過程的
4、順暢。成年大鼠的總血量是20至40?ml，單次采血的建議量為2至3?ml，放血可得之總血量是8至12?ml。少量采血時可以使用眼角采血、隱靜脈采血、頸靜脈采血及尾巴采血，大量采血則采用心臟采血與斬首采血。心臟采血之困難度較高，且需犧牲動物。除非將動物犧牲，否則所有的采血法皆需確認(rèn)動物的傷口以完全止血不在出血后，才可將動物放回PC籠內(nèi)。(一)尾部采血：動物如不麻醉則需以保定器保定。將尾巴置于40℃溫水中或以加熱燈照射5至10分鐘，使尾巴血管擴張。以23或21G的針頭由尾巴左右兩側(cè)之尾靜脈或腹側(cè)的尾動脈抽血，
5、或僅以21G的蝴蝶針頭插入尾動脈中，確認(rèn)有血液流出后再以離心管承接。(二)隱靜脈（Saphenous?vein）采血:將動物徒手保定或者將動物塞進適當(dāng)直徑與長度的透明塑料管，藉由固定且緊繃大鼠大腿與尾巴之間的皮膚來伸直其大腿，剔除大腿外側(cè)之皮毛，即可在踝關(guān)節(jié)的上下端見到隱靜脈，將剃毛部位以酒精消毒，以23?G的針頭刺開隱靜脈，以毛細管收集流出之血液，采得足夠之血量后將動物的后腳彎曲以減少開創(chuàng)部位的血流量，再將毛細管內(nèi)的血液送入微量離心管，最后再以滅菌棉花直接加壓開創(chuàng)部位止血。經(jīng)過24小時候相同部位可以繼續(xù)
6、采血。(三)頸靜脈（Jugular?vein）采血：熟練的操作者可以在大鼠清醒時由頸靜脈簡單的采得血液，動物所受到的緊迫相較于眼角采血或尾靜脈采血，會比較低，但建議初學(xué)者先將動物鎮(zhèn)靜或麻醉后再進行采血。將大鼠保定后保持腹部朝上、頭部朝向采血者，將大鼠的頭部保持筆直并將右側(cè)頸部的毛發(fā)剔除，沿著下顎平行于正中線以21?G的針頭以極低角度下針，以脖子與肩膀形成的夾角為下針點緩慢推進，待有血液流入針筒后，再緩慢回抽。抽血完成后通常不會造成出血或血腫。(四)眼角采血可麻醉或徒手保定。采血時以巴士德吸管由眼窩前端邊旋
7、轉(zhuǎn)邊向、向后插入眼窩內(nèi)靜脈叢，待巴士德吸管可見出血時，傾斜巴士德吸管，使血液流入巴士德吸管中。采血時間盡量縮短以避免凝血，采血后需注意止血。采血過程不可過于粗暴而傷及眼球或哈氏腺。(六)心臟采血：動物需經(jīng)安樂死或麻醉后才可進行心臟采血，采血結(jié)束也需將動物安樂死。將動物仰臥置于臺面，下針的位置位于劍狀軟骨突下方，約與腹部呈15至30度角向胸腔緩緩?fù)迫?，一發(fā)現(xiàn)有血液流入針筒，即固定針頭開始緩慢抽血。或直接由胸腔下針，由胸腔后端1/3處，自胸骨左側(cè)緣垂直經(jīng)刺入肋骨間而達心臟。(五)斬首采血法：此法取得之血液因可
8、能會受動物的其它體液污染。將大鼠搖晃或麻醉使其無法動彈，再以強力的剪刀或斷頭器將動物斬首后迅速以容器裝盛。四、胃管灌注胃管灌注能使藥劑經(jīng)胃管直接投入胃中，進行胃管灌注時不可使用一般的針頭，需使用經(jīng)處理過的球型針頭，可避免對動物造成傷害。插入之前需先測量動物由口腔至胃的距離選用適當(dāng)長度的胃管，以避免插入胃管時插入過深造成動物胃的傷害，或是插入過淺使灌注物無法達到胃部。以注射針筒吸取藥物，再保定動物，將胃管球型頭置入動物口腔中，經(jīng)
