平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基

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1、PCA平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基即PCA，是在08GB中用于菌落總數(shù)測(cè)定的配方：1、成分??胰蛋白胨????5.0g??酵母浸粉????2.5g??葡萄糖????1.0g??瓊脂??????15.0g??蒸餾水????1000mlpH7.0士0.22、制法：??將上述成分加于蒸餾水中，煮沸溶解，調(diào)節(jié)pH。分裝試管或錐形瓶，121℃高壓滅菌15min。????LST月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯簡(jiǎn)稱LST，在08GB中是用于大腸菌群的檢測(cè)，大腸桿菌的計(jì)數(shù)，金黃色葡萄球菌的檢測(cè)。配方：1、成分：??胰蛋白胨或胰酪胨??20.0g??氯化鈉?

2、???????5.0g??乳糖??????????5.0g??磷酸氫二鉀??????2.75g??磷酸二氫鉀??????2.75g??月桂基磺酸鈉????0.1g??蒸餾水????????1000mlpH6.8士0.22、制法：??將上述成分溶解于蒸餾水中，調(diào)節(jié)pH，分裝到有玻璃小導(dǎo)管的試管中，每管10ml。121℃高壓滅菌15min。??煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB煌綠乳糖膽鹽肉湯簡(jiǎn)稱BGLB，在08國(guó)標(biāo)中是用于大腸菌群的檢測(cè)配方：1、成分：??蛋白胨??????10.0g??乳糖????????10.0g??牛膽粉溶液????200.0ml??0.1%煌綠水溶液?

3、?13.3ml??蒸餾水??????1000mlpH7.2士0.12、制法：??將蛋白胨、乳糖溶解于500ml蒸餾水中，加入牛膽粉溶液200.0ml（將20.0g脫水牛膽粉溶于200ml的蒸餾水中，pH7.0-7.5）用蒸餾水稀釋到975ml，調(diào)節(jié)pH至7.4，再加入0.1%煌綠水溶液13.3ml，用蒸餾水補(bǔ)足到1000ml，用棉花過(guò)濾后，分裝到有玻璃小導(dǎo)管的試管中，每管10ml。121℃高壓滅菌15min。??V-P試劑??Voges-Proskauer試劑V-P試劑是Voges-Proskauer試劑的簡(jiǎn)稱，用于副溶血性弧菌的V-P試驗(yàn)。配方：1、成分??甲液

4、????α-萘酚??5.0g????無(wú)水乙醇100.0ml??乙液????氫氧化鉀??40.0g????用蒸餾水加至1000ml2、試驗(yàn)方法??將3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂生長(zhǎng)物接種3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基，36℃士1℃培養(yǎng)48h。取1ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)放到一個(gè)試管內(nèi)，加0.6ml甲液，搖動(dòng)。加0.2ml乙液，搖動(dòng)。隨意加一點(diǎn)肌酸結(jié)晶，4h后觀察結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果是呈伊紅的粉紅色。??尿素培養(yǎng)基尿素培養(yǎng)基是尿素酶瓊脂培養(yǎng)基中去掉瓊脂的培養(yǎng)基，是用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)。配方：1、成分??尿素??????20.0g??酵母浸粉????0.1g??磷酸二氫鉀??0.091

5、g??磷酸氫二鈉??0.095g??酚紅??????0.01g??蒸餾水????1000ml2、制法??將上述成分于蒸餾水中溶解，校正pH6.8士0.2.不需要加熱，過(guò)濾除菌，無(wú)菌分裝于滅菌小試管中，每管為3ml。3、試驗(yàn)方法??挑取瓊脂培養(yǎng)基接種于尿素培養(yǎng)基，26士1℃培養(yǎng)24h。尿素酶陽(yáng)性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變成紅色。改良CCD瓊脂??mCCDmCCD是改良CCD瓊脂的簡(jiǎn)寫，在08GB中是用于空腸彎曲菌檢驗(yàn)的。配方：1、????基礎(chǔ)培養(yǎng)基：成分：????肉浸液??????10.0g????動(dòng)物組織酶解物10.0g????氯化鈉??????5.0g????木炭?

6、???????4.0g????酪蛋白酶解物??3.0g????去氧膽酸鈉????1.0g????硫酸亞鐵????0.25g????丙酮酸鈉????0.25g????瓊脂????????8.0g-18.0g????水????????1000ml制法：用水溶解基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分，煮沸。分裝至合適的三角瓶?jī)?nèi)，121℃高壓滅菌15min。2、????抗生素溶液成分頭孢哌酮????????0.032g兩性霉素????????0.01g利福平????????0.01g乙醇/滅菌水（50/50，體積比）5ml制法：將上述成分溶解于乙醇/滅菌水混合溶液中。3、????完全培養(yǎng)基：成分

7、：????基礎(chǔ)培養(yǎng)基??????1000ml????抗生素溶液??????5ml制法：當(dāng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的溫度約為45℃左右時(shí)，加入抗生素溶液，混勻。待完全培養(yǎng)基的pH值調(diào)至7.2士0.2（25℃）。傾注約15ml于無(wú)菌平皿中，靜置至培養(yǎng)基凝固。使用前需預(yù)先干燥平板?？蓪⑵矫笊w打開(kāi)，使培養(yǎng)基面朝下，置于干燥箱中約30min，直到瓊脂表面干燥。預(yù)先準(zhǔn)備的平板未干燥時(shí)在室溫放置不得超過(guò)4h，或在4℃左右冷藏不得超過(guò)7.4.Bulton肉湯在08國(guó)標(biāo)中，Bulton肉湯是用于空腸彎曲菌檢驗(yàn)的。配方：1、????基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分：動(dòng)物組織酶解物????10.0g乳白蛋白水解物??

8、??5.0