NYT564-2002豬巴氏桿菌病診斷技術(shù).pdf

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1、ICS11220B41中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T564-2002豬巴氏桿菌病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforswinepasteurellosis2002一08一27發(fā)布2002門2一01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布5laNY/T564-2002前言豬巴氏桿菌病.又稱豬肺疫氣足危害我1A1養(yǎng)豬業(yè)的工要疫病之一，我囚將之定為一類動物疫病.世界動物iJ.生rll織[WorldOrgat、月nationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE口以無本

2、病的珍斷標(biāo)準(zhǔn)，但對牛和禽的巴氏桿菌病的診斷有技術(shù)規(guī)定各國多年研究和實踐經(jīng)驗表明，由多殺性巴氏桿菌U'u.}[rurrllunurl(nrida)引起的多種動物疫病其實驗室診斷技術(shù)從本I是一致的本標(biāo)準(zhǔn)是參照OIE有關(guān)多殺性巴氏桿菌引起的疫病之診斷技術(shù)規(guī)定和國內(nèi)外通川力法，依據(jù)我國的實踐經(jīng)驗制定的本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A,附錄瑪、附錄C是規(guī)范性附錄。本trt}準(zhǔn)山農(nóng)業(yè)部畜牧lr"P局提出。本標(biāo)ffl山個{><]動物檢佼標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸日。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:‘}，國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所本標(biāo)準(zhǔn)上要起r.5人:關(guān)孚時、毛開榮、錢心元、魏財文、夏業(yè)才。NY/'r564-

3、2002豬巴氏桿菌病診斷技術(shù)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬巴氏桿菌病診斷的技術(shù)要求本標(biāo)雕所規(guī)定的臨床診斷、病理剖檢和病原分離鑒定，適用十豬巴氏桿菌病的診斷，間接血凝試驗技術(shù)和瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗技術(shù)適用于病原血清學(xué)分群和定型鑒定2臨床診斷豬巴氏桿菌病分流行性和散發(fā)性兩類2.1流行性特點是病程很短，發(fā)病快，體溫可高達(dá)4Ic'以卜。分最急性型和急性型兩種最急性N4:多發(fā)生在流行初期，呼吸困難心跳加快，于數(shù)小時內(nèi)死亡急性型:病狀主要分兩種，一種表現(xiàn)為咽炎癥狀，咽喉部皮膚發(fā)紅、熱痛腫脹、堅硬.延伸可達(dá)到耳根及頸部。常呈犬坐式伸長頭頸呼吸。腹側(cè)、耳根和四肢內(nèi)側(cè)可發(fā)現(xiàn)紅

4、色斑點?？凇⒀鄣瓤梢曊衬こ拾导t色。一經(jīng)出現(xiàn)呼吸癥狀，病情即迅速惡化，口、鼻流出泡沫狀分泌物死亡率達(dá)到100%。另一種為急性胸膜炎病狀，表現(xiàn)為呼吸困難，痙攣性于咳，觸診胸部有疼痛感，鼻流稠粘液初便秘后腹瀉，病后期皮膚有紫斑或血點。病程約4d一6d,2.2散發(fā)性常年都有發(fā)生，病程初期體溫升高到41C左右呈現(xiàn)呼吸困難，偶爾表現(xiàn)急促腹式呼吸。間有咳嗽n、鼻和肛門粘膜及四肢皮膚呈暗紫色，頸部無紅腫病狀，由于病程長，諸多病例逐漸消瘦死亡。3病理剖檢.子J衛(wèi).最急性型病理變化不明顯，常見皮膚、皮下、漿膜、豁膜有大量出血點3.2急性型卞要表現(xiàn)咽喉部的結(jié)締組織

5、呈出血性漿液性炎。口腔和鼻孔流出紅色泡沫狀液體。皮下組織有大量出血點，全身淋巴結(jié)出血.斷面呈紅色，頸部淋巴結(jié)腫大有滲出液，全身各臟器漿膜和茹膜及皮膚旱現(xiàn)點狀出血，脾不腫大。3.3散發(fā)性頸部不腫脹，喉頭充血、出血，氣管有大量泡沫，肺臟呈現(xiàn)水腫、氣腫、充血、出血，纖維素性胸膜肺炎病變局部出現(xiàn)紅色和灰色肝變，肺葉切面呈大理石狀。胸膜常有纖維素狀附著物.胸腔及心包時有積液4病原分離鑒定4.1材料4.1門改良馬丁氏瓊脂。4.1.2'i7氏肉湯4.1.3糖發(fā)酵培養(yǎng)基NY/T564--20024.1.41%蛋白陳水4.1.5叫垛試驗試劑(靛基質(zhì)試驗試劑)(

6、Ehehch-Bochm。二氏試劑)4門.6氧化酶試驗用試劑(1%鹽酸四甲基對苯二胺溶液)4.1.7運動性試驗用培養(yǎng)基(半固體培養(yǎng)基)。4門，8麥康凱瓊脂培養(yǎng)基。以上各種培養(yǎng)基配制方法見附錄Ao4.2病原分離將瀕死前或死后數(shù)小時內(nèi)以無菌手術(shù)采取病死豬的心血、肝臟組織。接種于改良馬丁氏瓊脂(見第A.4章)斜面，麥康凱瓊脂(見第A.11章)平皿，含10%綿羊全血的改良馬丁一瓊脂平皿，含有。.1%裂解健康動物紅細(xì)胞的全血、40a健康動物血清的改良馬丁氏瓊脂平皿及馬丁氏肉湯(見第A.5章)小管培養(yǎng)基，置36C-37C'培養(yǎng)。4.3病原鑒定4.3門病原

7、形態(tài)病原為多殺性巴氏桿菌，用肝臟組織或心血抹片可見革蘭氏染色陰性，瑞氏染色呈兩極濃染的球4#F.M3.2培養(yǎng)特性培養(yǎng)18h-24h后，改良馬丁瓊脂斜面生長純粹的培養(yǎng)物，呈微藍(lán)色菌苔或菌落。馬丁肉湯培養(yǎng)物生長為均勻混濁，不產(chǎn)生菌膜。麥康凱瓊脂平皿上不生長。10%的血瓊脂平皿h生長的菌落不出現(xiàn)溶血。在含有0.1%裂解血球全血、4%健康動物血清的改良馬丁氏瓊脂平皿L的單個菌落，肉眼觀察光滑圓整，直徑2mm--3mm，半透明，呈微藍(lán)色。在低倍顯微鏡45。折光F觀察，應(yīng)有虹彩，為藍(lán)綠色熒光(Fg菌落型)，或桔紅色熒光(Fo菌落型)。4.3.3生化特性4

8、.3.3門糖發(fā)酵試驗:用1%蛋白陳水(見第A.7章)，將改良馬丁氏瓊脂18h-24h的培養(yǎng)物洗下，接種糖發(fā)酵管(見第A.6章)，置36'C--37C培養(yǎng)7d-10d