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1、卵磷脂的提取及鑒定作者:未知來源:鄭州輕工業(yè)學(xué)院時間:2006-9-23一、實驗?zāi)康?.加深了解磷脂類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。2.掌握卵磷脂的提取鑒定的原理和方法。二、實驗原理磷脂是生物體組織細(xì)胞的重要成分,主要存在于大豆等植物組織以及動物的肝、腦、脾、心等組織中,尤其在蛋黃中含量較多(10%左右)。卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開;此外,卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶,利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離。新提取的卵磷脂為白色,當(dāng)與空氣接觸后,其所含不飽和脂肪酸會被氧化而使卵磷脂呈黃褐色。卵磷脂被
2、堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽。甘油與硫酸氫鉀共熱,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸鹽在酸性條件下與鉬酸銨作用,生成黃色的磷鉬酸沉淀;膽堿在堿的進(jìn)一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺。這樣通過對分解產(chǎn)物的檢驗可以對卵磷脂進(jìn)行鑒定。三、儀器和試劑儀器小燒杯、試管。試劑1.雞蛋黃2.紅色石蕊試紙3.95%乙醇4.10%氫氧化鈉溶液5.鉬酸銨試劑將6g鉬酸銨溶于15mL蒸餾水中,加入5mL濃氨水,另外將24mL濃硝酸溶于46mL的蒸餾水中,兩者混合靜置一天后再用。6.丙酮7.乙醚8.3%溴的四氯化碳溶液9.硫酸
3、氫鉀四、操作步驟(一)卵磷脂的提取稱取約10g蛋黃于小燒杯中,加入溫?zé)岬?5%乙醇30mL,邊加邊攪拌均勻,冷卻后過濾。如濾液仍然混濁,可重新過濾直至完全透明。將濾液置于蒸發(fā)皿內(nèi),水浴鍋中蒸干,所得干物即為卵磷脂。(二)卵磷脂的溶解性取干燥試管,加入少許卵磷脂,再加入5mL乙醚,用玻棒攪動使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3~5mL,觀察實驗現(xiàn)象。(三)卵磷脂的鑒定1.三甲胺的檢驗取干燥試管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL氫氧化鈉溶液,放入水浴中加熱15min,在管口放一片紅色石蕊試紙,觀察顏色有無變化,并嗅其氣味。將加熱過的
4、溶液過濾,濾液供下面檢驗。2.不飽和性檢驗取干凈試管一支,加入10滴上述濾液,再加入1~2滴3%溴的四氯化碳溶液,振搖試管,觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生。3.磷酸的檢驗取干凈試管一支,加入10滴上述濾液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴鉬酸銨試劑,觀察現(xiàn)象;最后將試管放入熱水浴中加熱5~10min,觀察有何變化。4.甘油的檢驗取干凈試管一支,加入少許卵磷脂和0.2g硫酸氫鉀,用試管夾夾住并先在小火上略微加熱,使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔,然后再集中加熱,待有水蒸氣放出時,嗅有何氣味產(chǎn)生。卵磷脂 名稱卵磷脂(lecithin)
5、 卵磷脂被譽為與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營養(yǎng)素”,然而,真正了解卵磷脂的人卻很少。1844年法國人Gohley從蛋黃中發(fā)現(xiàn)卵磷脂(蛋黃素),并以希臘文命名為Lecithos(卵磷脂),英文名為Lecithin,也自此揭開了其神秘的面紗。卵磷脂是生命的基礎(chǔ)物質(zhì),人類生命自始至終都離不開它的滋養(yǎng)和保護(hù)。卵磷脂存在于每個細(xì)胞之中,更多的是集中在腦及神經(jīng)系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及肝、心、腎等重要器官?! ×字且活惡辛自氐闹净衔?,通常是卵磷脂(磷脂酰膽堿,簡稱PC)、腦磷脂(磷脂酰乙醇胺,簡稱PE)、肌醇磷脂(磷脂酰
6、肌醇,簡稱PI)、磷脂酸(簡稱PA)、絲氨酸磷脂(簡稱PS)等的混合物,其中最典型的是前三種。磷脂是一種成分復(fù)雜的甘油脂,水解后可以的到甘油、脂肪酸、磷酸、膽堿、膽胺、肌醇等化合物。一般大豆磷脂分子中的脂肪酸為軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和花生烯酸。 目前我們食用磷脂的主要來源是大豆磷脂和蛋黃磷脂,而這兩種磷脂在本質(zhì)上有什么區(qū)別呢?下面我們將會談到。除此之外,牛奶、動物的腦、骨髓、心臟、肺臟、肝臟、腎臟以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在蛋黃、大豆、魚頭、芝麻、蘑菇、山藥和黑木耳、谷類、小魚、動物肝臟、鰻魚、赤腹蛇、眼鏡蛇
7、、紅花籽油、玉米油、向日葵等食物中都有一定的含量,但營養(yǎng)及含量較完整的還是大豆、蛋黃和動物肝臟。卵磷脂在體內(nèi)多與蛋白質(zhì)結(jié)合,以脂肪蛋白質(zhì)(脂蛋白)的形態(tài)存在著,所以卵磷脂是以豐富的姿態(tài)存在于自然界當(dāng)中,如果能攝取足夠種類的食物,就不必?fù)?dān)心會有缺乏的問題,同時也不需要額外補充卵磷脂的營養(yǎng)品。 通常所說的磷脂泛指大豆磷脂,以大豆磷脂物為主體,并含有中性油和其他非磷脂成分,如色素、糖分、半乳糖苷、腦苷脂類。磷脂是一類脂的統(tǒng)稱,含有多種含磷成分,大豆磷脂或稱大豆卵磷脂含有卵磷脂、腦磷脂、心磷脂、磷脂酸(PA)、磷脂酰甘油(PG)、縮
8、醛磷脂、溶血磷脂等。其多種營養(yǎng)成分對人體均有很大的裨益,加上其成本價格的低廉。所以市場上銷售的多為大豆卵磷脂?! ≌f起蛋黃磷脂還有一段淵源。磷脂“Lecithin”一詞源于希臘語的蛋黃“Lekithos”,1846年Gobley從蛋黃中分離出含磷脂肪物質(zhì),并命名為磷脂。蛋黃磷