標準曲線的繪制-吸光度標準曲線繪制

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1、標準曲線的繪制-吸光度標準曲線繪制染料吸光度濃度標準工作曲線的繪制實驗一n染料吸光度—濃度標準工作曲線的繪制（選做）一、實驗?zāi)康膎掌握分光光度計的使用方法，學(xué)會染料吸收光譜曲線的測定和未知染液濃度的測定，加深對染色澤和吸收光譜關(guān)系的認識。二、實驗原理nnn測定染料在溶液中或纖維上的含量的方法有多種，本實驗介紹用分光光度計法測定染料在溶液中的濃度。采用分光光度法測定染料濃度的基本理論是基于朗白—比耳定理。該定理指出，有色溶液對一束平行單色光的吸光度與溶液的濃度和液層厚度之積成正比。其數(shù)學(xué)表達式為：A＝KbCC１/A１=C2/A2或C2=C１/A１×A2三、主要實驗材料、化學(xué)品和儀器nn化學(xué)品：活

2、性紅X-3B10g/l、Na2CO3、Na2SO4儀器：722型分光光度計四、實驗步驟nn吸收光譜曲線的測定（用活性紅X-3B）①標準溶液的配制②吸收光譜曲線的測定混合染料濃度的測定①繪制標準曲線②測定未知濃渡的染液繪制標準曲線。在測定同一染料的未知濃度時以其λmax處測得的吸光度，在標準曲線上查得對應(yīng)的染液濃度。五、注意事項nn實驗時使用蒸餾水作溶劑，空白溶液也用蒸餾水實驗時一律使用B=1CM的比色皿，此時A=KC六、實驗結(jié)果與討論n根據(jù)所做圖線分析染料濃度與吸光度之間呈什么關(guān)系。若染料相對應(yīng)濃度發(fā)生變化，是否影響它們兩者之間的關(guān)系。氯濃度標準曲線繪制氯濃度標準曲線繪制溶液的配制：磷酸鹽緩沖

3、液：無水磷酸氫二鈉：24.0064g無水磷酸氫二鉀：45.9988g乙二胺四乙酸二鈉：0.8022g碘酸鉀儲備液：1.0055g碘酸鉀標準溶液：碘酸鉀儲備液：10ml碘化鉀：1.0g氫氧化鈉：80.0004g硫酸溶液：54.00ml98%的濃硫酸N,N-二乙基-1,4-苯二胺硫酸鹽（DPD）：98%濃硫酸2.0ml無水DPD硫酸鹽：1.0998gEDTA二鈉：0.2007g所有溶液都配制成1000ml的溶液待測液的配制序號碘酸鉀標準溶液/ml硫酸溶液/ml氫氧化鈉溶液/ml磷酸鹽緩沖液/mlDPD試劑/ml氯含量/ug101155020.5115553111551043115530551155

4、5061011551007151155150氯濃度標準曲線鐵標準曲線的繪制鐵標準曲線的繪制方法1.方法原理亞鐵在pH3~9之間的溶液中，可與鄰菲啰啉生成很穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物。高鐵離子可以通過還原劑還原成亞鐵進行測定。測量波長在510nm處，用鄰菲啰啉分光光度法可測量Fe2+、Fe3+及總鐵含量。2.方法適用范圍此方法適用于一般環(huán)境水和廢水中鐵的監(jiān)測，最低檢出濃度為0.03mg/L，測定上限為5.00mg/L。對鐵離子大于5.00mg/L的水樣，可適當稀釋后再按照本方法進行測定。3.儀器及試劑3.1使用儀器分光光度計，10mm比色皿3.2試劑3.2.1鐵標準貯備溶液稱取0.7020g硫酸亞鐵銨，

5、溶于(1+1)硫酸50mL中，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液含鐵濃度為100μg/mL。3.2.2鐵標準使用液準確移取標準貯備溶液25.00mL置于100mL容量瓶中，加水至標線，搖勻。此溶液含鐵濃度為25.0μg/mL。3.2.3鹽酸(ρ1.19g/mL)，(1+3)鹽酸溶液3.2.4鹽酸羥胺溶液鹽酸羥胺溶液[ρ(NH2OH·HCl)=100g/L]：稱取10g鹽酸羥胺溶于水中，稀釋至100mL。3.2.5緩沖溶液：40g乙酸銨加50mL冰乙酸用水稀釋至100mL。3.2.6鄰菲啰啉溶液：鄰菲啰啉溶液：稱取0.5g鄰菲啰啉溶于水中，加數(shù)滴鹽酸幫助溶解，稀釋至100m

6、L。3.2.7飽和乙酸鈉溶液4.鐵標準曲線的繪制方法4.1標準曲線的繪制將25.0μg/mL的鐵標準溶液稀釋5倍，變成5mg/L的鐵標準溶液。再依次移取鐵標準液0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL置于50mL比色管中，加(1+3)鹽酸1mL，100g/L鹽酸羥胺溶液2~3mL，再加適量蒸餾水，在水浴中加熱。然后冷卻至室溫，加一小片剛果紅試紙，滴加飽和乙酸鈉溶液至剛果紅試紙剛剛變紅，加入5mL緩沖溶液和鄰菲啰啉溶液2mL，加水至標線，搖勻。顯色15min后，用10mm比色皿，以空白調(diào)零，在510nm處測量吸光度。由經(jīng)過空白校正的吸光度對鐵的含量作圖。4.2總鐵的測定采樣后立

7、即將樣品用鹽酸酸化至pH為1，分析時取一定量混勻水樣至50mL比色管中，加(1+3)鹽酸1mL，100g/L鹽酸羥胺溶液2~3mL，再加適量蒸餾水，在水浴中加熱，以保證全部鐵的溶解和還原。若仍有沉淀應(yīng)過濾除去。4.3Fe2+的測定采樣時將2mL鹽酸放在一個100mL具塞的水樣瓶內(nèi)，直接將水樣注滿樣品瓶，蓋緊瓶塞以防氧化，一直保存到進行測量和顯色。分析時只需取適量水樣，直接加入緩沖溶液和鄰菲啰啉溶液