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《誘變育種是用物理或化學(xué)的誘變劑使誘變對象內(nèi)的遺傳物質(zhì)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、誘變育種：是用物理或化學(xué)的誘變劑使誘變對象內(nèi)的遺傳物質(zhì)（DNA）的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，引起性狀變異并通過篩選獲得符合要求的變異菌株的一種育種方法。誘變育種具有極其重要的實踐意義。當(dāng)前發(fā)酵工業(yè)和其他微生物生產(chǎn)部門所使用的高產(chǎn)菌株，幾乎毫無例外地都是通過誘變育種而明顯提高其生產(chǎn)性能的。（七）誘變育種誘變育種的步驟：原始菌種純化斜面/肉湯培養(yǎng)單孢子/單細(xì)胞懸液誘變劑處理平板分離移至斜面小試中試初篩復(fù)篩計算存活率觀察形態(tài)變異，挑單菌落良種保藏原菌種特性鑒定誘變育種的基本過程：選擇選擇合適的出發(fā)菌株↓制備待處理的菌懸液↓誘變處理↓篩選↓
2、保藏和擴(kuò)大試驗1.出發(fā)菌株的選擇： 出發(fā)菌株———用來育種處理的起始菌株◆出發(fā)菌株應(yīng)具備：①對誘變劑的敏感性高；②具有特定生產(chǎn)性狀的能力或潛力；◆出發(fā)菌株的來源；①自然界直接分離到的野生型菌株：②歷經(jīng)生產(chǎn)考驗的菌株：③已經(jīng)歷多次育種處理的菌株：2.制備細(xì)胞懸液要求：①菌體處于對數(shù)生長期，并使細(xì)胞處于同步生長；②細(xì)胞分散且為單細(xì)胞，以避免表型遲延現(xiàn)象（phenotypiclag）;方法：①玻璃珠打散10-15min; ②加０.3%吐溫80（表面活性劑）③用無菌脫脂棉過濾。制備：物理誘變劑——生理鹽水（0.85%NaCl)化學(xué)誘
3、變劑——緩沖液濃度：細(xì)菌、放線菌108個/ml霉菌、酵母菌106個/ml表型遲延現(xiàn)象:指某一突變在DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂后，才在表型上顯示出來，造成不純的菌落。產(chǎn)生原因：①分離性遲延現(xiàn)象②生理性遲延現(xiàn)象3.誘變處理：誘變劑的作用：①提高突變的頻率②擴(kuò)大產(chǎn)量變異的幅度③使產(chǎn)量變異朝著正突變或負(fù)突變移動劑量的表示法：不同種類和不同生長階段的微生物對誘變劑的敏感程度不同，所以在誘變處理前，一般應(yīng)預(yù)先作誘變劑用量對菌體死亡數(shù)量的致死曲線，選擇合適的處理劑量。—致死率是最好的誘變劑相對劑量的表示方法。最適劑量的選擇：產(chǎn)量性狀的育種中多傾
4、向于低劑量（致死率在70~80%）選擇誘變劑的種類：在選用理化因子作誘變劑時，在同樣效果下，應(yīng)選用最方便的因素；而在同樣方便的情況下，則應(yīng)選擇最高效的因素。在物理誘變劑中，尤以紫外線為最方便，而在化學(xué)誘變劑中，一般可選用誘變效果最為顯著的“超誘變劑”，如NTG。簡便有效的誘變方法：紫外線的照射最為方便?；瘜W(xué)誘變劑的種類、濃度和處理方法尤其是中止反映的方法很多，實際工作時可參看有關(guān)書籍。一種較有效的簡易處理方法的大致操作步驟是：先在平板上涂上出發(fā)菌株細(xì)胞，然后在平板上均勻地放上幾顆很小的誘變劑顆粒（也可放吸有誘變劑溶液的濾紙片
5、），經(jīng)培養(yǎng)后，在制菌圈的邊緣挑取若干突變菌落，分別制成懸浮液，然后將其涂在一般平板表面使長出許多單菌落，最后可用影印培養(yǎng)法或逐個檢出法選出突變種。誘變處理方式：單一因子處理：復(fù)合因子處理：兩種以上因素先后使用同時使用單一因子重復(fù)使用常用誘變劑的使用方法4.菌種篩選4.1篩選方案：實際工作中，為了提高篩選效率，往往將篩選工作分為初篩和復(fù)篩兩步進(jìn)行。初篩的目的：刪去明確不符合要求的大部分菌株，把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來，使優(yōu)良性狀的菌株不至于漏網(wǎng)；——因此，初篩工作以量為主，測定的精確性還在其次；初篩手段應(yīng)盡可能快速、簡單
6、。復(fù)篩的目的：確認(rèn)符合要求的菌株；——復(fù)篩以質(zhì)為主，應(yīng)精確測定每個菌株的生產(chǎn)指標(biāo)。篩選是最為艱難的也是最為重要的步驟.可見，設(shè)計和采用效率高的篩選方案和方法極其重要。以選育高產(chǎn)突變株為例，誘變育種的基本環(huán)節(jié)概括如下：第一輪：一個出發(fā)菌株→→→選出200個菌株→→→選出50株→→→選出5株誘變處理初篩（每瓶一株）復(fù)篩（每瓶四株）第二輪：5個出發(fā)菌株→→→→→→選出50株→→→選出5株40株40株40株40株40株誘變處理初篩復(fù)篩（每瓶一株）（每瓶四株）4.2變異菌的一般篩選方法4.2.1平皿快速檢測法變色圈法透明圈法生長圈法抑
7、菌圈法梯度平板法4.2.2搖瓶培養(yǎng)法
