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《10化本儀器分析實(shí)驗(yàn)內(nèi)容》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、鄰二氮菲分光光度法測(cè)定試樣中的微量鐵一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵的方法原理2.熟悉繪制吸收曲線的方法,正確選擇測(cè)定波長(zhǎng)3.學(xué)會(huì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法4.通過(guò)鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵,掌握721型分光光度計(jì)的正確使用方法,并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、實(shí)驗(yàn)原理鄰二氮菲(phen)和Fe2+在pH3~9的溶液中,生成一種穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物Fe(phen),其lgK=21.3,κ508=1.1×104L·mol-1·cm-1,鐵含量在0.1~6μg·mL-1范圍內(nèi)遵守比爾定律。顯色前需用鹽酸羥胺或抗壞血酸將Fe3+全部還原為
2、Fe2+,然后再加入鄰二氮菲,并調(diào)節(jié)溶液酸度至適宜的顯色酸度范圍。有關(guān)反應(yīng)如下:====↑+2H2O+4H++2Cl-用分光光度法測(cè)定物質(zhì)的含量,一般采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,即配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在實(shí)驗(yàn)條件下依次測(cè)量各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度A,以溶液的濃度C為橫坐標(biāo),相應(yīng)的吸光度A為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在同樣實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度Ax,根據(jù)測(cè)得吸光度值A(chǔ)x從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度值Cx,即可計(jì)算試樣中被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量濃度。三、儀器和試劑1.儀器721型分光光度計(jì),1cm比色皿。2.試劑(1)100μg·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,10μ
3、g·mL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液。(2)100g·L-1鹽酸羥胺水溶液。用時(shí)現(xiàn)配。(3)0.1%鄰二氮菲水溶液。避光保存,溶液顏色變暗時(shí)即不能使用。(4)1.0mol·L-1乙酸鈉溶液。四、實(shí)驗(yàn)步驟1.顯色標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制在序號(hào)為1~6的6只50mL容量瓶中,用吸量管分別加入0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液(含鐵10μg·mL-1),分別加入1.00mL100g·L-1鹽酸羥胺溶液,搖勻后放置2min,再各加入5.0mL1.0mol·L-1乙酸鈉溶液,3.00mL0.1%鄰二氮菲溶液,以水稀釋至刻度,搖勻。2.吸收曲線
4、的繪制在分光光度計(jì)上,用1cm吸收池,以試劑空白溶液(1號(hào))為參比,在460~560nm之間進(jìn)行掃描,測(cè)定待測(cè)溶液(5號(hào))的吸光度A,得到以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)的吸收曲線,從而選擇測(cè)定鐵的最大吸收波長(zhǎng)λmax。3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)繪以步驟1中試劑空白溶液(1號(hào))為參比,用1cm吸收池,在選定波長(zhǎng)下測(cè)定2~6號(hào)各顯色標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。以鐵的濃度(μg.mL-1)為橫坐標(biāo),相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4.鐵含量的測(cè)定移取試樣溶液(7號(hào))5.0mL,按步驟1顯色后,在相同條件下測(cè)量其吸光度Ax,由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的Cx,再進(jìn)一步
5、計(jì)算試樣中微量鐵的質(zhì)量濃度CFe。五、數(shù)據(jù)記錄與處理1.以吸光度為縱坐標(biāo),波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)繪制吸收曲線,找出最大吸收波長(zhǎng)λmax,并計(jì)算其εmax。2.以吸光度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后,根據(jù)試樣吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相對(duì)應(yīng)的濃度值,計(jì)算出試樣中鐵的含量(μg·mL-1)。六、思考題1.用鄰二氮菲測(cè)定鐵時(shí),為什么要加入鹽酸羥胺?2.吸收曲線與標(biāo)準(zhǔn)曲線有何區(qū)別?在實(shí)際應(yīng)用中有何意義?3.測(cè)繪標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定試液時(shí),為什么要以試劑空白溶液為參比?紫外分光光度法測(cè)定水中總酚的含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握紫外分光光度法測(cè)定酚的原理
6、和方法。2.掌握應(yīng)用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析的方法和基本操作。二、實(shí)驗(yàn)原理苯酚是工業(yè)廢水中的一種有害物質(zhì),如果流入江河,會(huì)使水質(zhì)受到污染,因此在檢測(cè)飲用水的衛(wèi)生質(zhì)量時(shí),需對(duì)水中酚含量進(jìn)行測(cè)定。苯具有環(huán)狀共軛體系,由π→π*躍遷在紫外吸收光區(qū)產(chǎn)生三個(gè)特征吸收帶:強(qiáng)度較高的E1帶,出現(xiàn)在180nm左右;中等強(qiáng)度的E2帶,出現(xiàn)在204nm左右;強(qiáng)度較弱的B帶,出現(xiàn)在255nm。有機(jī)溶劑、苯環(huán)上的取代基及其取代位置都可能對(duì)最大吸收峰的波長(zhǎng)、強(qiáng)度和形狀產(chǎn)生影響。具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的化合物在紫外光區(qū)均有較強(qiáng)的特征吸收峰,在苯環(huán)上的部分取代基(助色團(tuán))使
7、吸收增強(qiáng),而苯酚在270nm處有特征吸收峰,在一定范圍內(nèi)其吸收強(qiáng)度與苯酚的含量成正比,符合Lambert-Beer定律,因此,可用紫外分光光度法直接測(cè)定水中總酚的含量。三、儀器與試劑UV2300型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),石英比色皿(1cm)2個(gè),50mL容量瓶,移液管等。苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液250mg·L-1:準(zhǔn)確稱(chēng)取0.0250g苯酚于250mL燒杯,加20mL去離子水溶解,移入100mL容量瓶,用去離子水定容至刻度,搖勻。四、實(shí)驗(yàn)步驟1.標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制取5只50mL容量瓶,分別加入2.00,4.00,6.00,8.00,10.00mL濃度為
8、250mg·L-1的苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液,用去離子水稀釋至刻度,搖勻。計(jì)算其濃度(mg·L-1)。2.吸收曲線的測(cè)定取上述標(biāo)準(zhǔn)系列中的任一溶液,用1cm石英比色皿,以溶劑空白(去離子水)作參比,在220~350nm