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《布魯氏菌病多種檢測方法的對比》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、布魯氏桿菌病多種檢測方法的對比賈澤穎劉鄧郭安娜孫玉芳王金秀（北京三元集團(tuán)畜牧獸醫(yī)總站北京市德勝門外清河南鎮(zhèn)100192）布魯氏桿菌病是由布魯氏桿菌引起的一種人畜共患傳染病，屬于我國的二類傳染病。奶牛是布魯氏桿菌最易感的動(dòng)物，一旦在牛群中發(fā)生，將導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失和嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。近年來隨著奶牛業(yè)在全國各地的迅猛發(fā)展以及奶牛流通的增加，原在牧區(qū)流行的布魯氏桿菌病在內(nèi)地也悄然上升。為了有效遏制布魯氏菌病對奶牛業(yè)的影響，確保公共衛(wèi)生安全，加強(qiáng)對奶牛布魯氏菌病的綜合防治和凈化的工作就顯得極為重要。定期檢疫是奶牛場進(jìn)行布魯氏桿菌病的防治和凈化的重要措施。而布魯氏菌
2、病的檢測方法是影響布魯氏菌病檢疫效果的重要因素。目前國內(nèi)普遍采用的方法是：虎紅平板凝集試驗(yàn)初次篩選，然后利用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行最終定性，而國際上采用的初次篩選的方法主要有：間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（I-ELISA）和熒光偏振試驗(yàn)，為了對比這四種方法在布魯氏桿菌病的檢疫結(jié)果方面的差異性，進(jìn)行了本次試驗(yàn)。1材料和方法1.1試驗(yàn)血樣收集88份奶牛血清樣本，分別進(jìn)行4種檢測方法的對比試驗(yàn)。1.2試驗(yàn)試劑布魯氏桿菌虎紅平板凝集抗原中國獸藥監(jiān)察所提供；布魯氏桿菌試管凝集抗原中國獸藥監(jiān)察所提供；布魯氏桿菌熒光偏振測定法抗體檢測試劑盒由哈爾濱平和生物技術(shù)有限公司提供；布魯氏桿菌病
3、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（I-ELISA）抗體檢測試劑盒由哈爾濱平和生物技術(shù)有限公司提供。1.3試驗(yàn)方法按照國家以及國際上通用的標(biāo)準(zhǔn)，用虎紅平板凝集試驗(yàn)、熒光偏振測定法、I-ELISA及試管凝集試驗(yàn)四種方法分別對血清樣品進(jìn)行檢測。2結(jié)果2.1琥紅平板凝集試驗(yàn)結(jié)果：其中陽性33份，陰性55份，陽性率為37.5%；2.2熒光偏振試驗(yàn)結(jié)果：其中陽性26份（包含在虎紅平板凝集試驗(yàn)33份陽性樣品中，具體結(jié)果見表1），陰性60份，可疑2份，陽性率為29.5%；2.3I-ELISA試驗(yàn)結(jié)果：其中陽性31份（包含在虎紅平板凝集試驗(yàn)33份陽性樣品中，具體結(jié)果見表1），陰性57份，
4、陽性率為35%；2.4試管凝集試驗(yàn)結(jié)果：其中陽性25份（包含在虎紅平板凝集試驗(yàn)33份陽性樣品中，具體結(jié)果見表1），陰性58份，可疑5份，陽性率為28%。表1虎紅平板凝集試驗(yàn)33份陽性結(jié)果同另外三種方法的對比試驗(yàn)數(shù)據(jù)編號636173736280522850496061547273885184平板陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性試管可疑強(qiáng)陽陰性強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽陰性強(qiáng)陽強(qiáng)陽熒光偏振可疑陽性陰性陽性陽性陽性陰性陽性陽性I-ELISA陽性陽性陰性陽性陽性陽性陽性陽性陽性編號538171485392598462542072496473615981平板陽性陽性陽性陽性陽性
5、陽性陽性陽性陽性試管強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽可疑強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽陽性陽性熒光偏振陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陰性I-ELISA陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性編號521759155303637062667613623450355034平板陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性試管強(qiáng)陽可疑強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽熒光偏振陽性陰性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性I-ELISA陽性陰性陽性陽性陽性陽性陽性陽性陽性編號596148815746738474515994 平板陽性陽性陽性陽性陽性陽性 試管陰性可疑可疑強(qiáng)陽強(qiáng)陽強(qiáng)陽 熒光偏振陰性可疑陽性陽性陽性陽性
6、I-ELISA陽性陽性陽性陽性陽性陽性 3分析與討論目前國內(nèi)外主要采取的布魯氏菌病血清學(xué)檢測方法有虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）和熒光偏振等方法。我國國標(biāo)采用虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩，試管凝集試驗(yàn)定性的檢測方法。布魯氏桿菌誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生最多的抗體是IgG1，其次為IgM抗體，虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)檢測的主要是IgM抗體，容易受到動(dòng)物體內(nèi)其它IgM抗體的干擾?；⒓t平板凝集試驗(yàn)特異性不高，受試驗(yàn)溫度、凝集時(shí)間相對較短和人為主觀因素的影響，不易準(zhǔn)確判定結(jié)果，只能作為初篩；而試管凝集試驗(yàn)是我國布魯氏菌病的法定檢測判定方法，但是該
7、方法操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，不適于現(xiàn)場采用，也受人為主觀因素的影響。OIE標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定采用ELISA和熒光偏振作為布氏桿菌病的國際貿(mào)易初步診斷方法。ELISA和熒光偏振方法檢測監(jiān)測的敏感性和特異性好，反應(yīng)時(shí)間短，避免了人為因素的干擾，易標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制，但這兩種方法也只能用于初篩。本試驗(yàn)通過四種不同的方法對同一批樣品進(jìn)行布魯氏桿菌病的檢疫，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)可知本次試驗(yàn)檢測的88份樣品中：I-ELISA試驗(yàn)與虎紅平板凝集試驗(yàn)有87份相符合，不符合的1份樣品I-ELISA試驗(yàn)陰性而虎紅平板凝集試驗(yàn)陽性，在另外兩種檢測方法中同樣為陰性，因此可以從側(cè)面反映出I-ELISA試驗(yàn)與虎紅平板
8、凝集試驗(yàn)相比具有較好的敏感性和特異性好，反應(yīng)時(shí)間短，
