肉湯發(fā)酵液中糖類、醇類和二元醇類的測定

《肉湯發(fā)酵液中糖類、醇類和二元醇類的測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、肉湯發(fā)酵液中糖類、醇類和二元醇類的測定摘要：本文建立了一種采用離子色譜法，安培檢測器測定肉湯發(fā)酵液中的糖類、糖醇、醇類和二元醇類的方法。選擇的色譜條件為：CarboPacMA1和CarboPacTMPA1糖陰離子交換柱，高濃度的氫氧化鈉溶液等度淋洗和梯度淋洗，安培檢測器檢測。該方法檢測限（S/N=3）為0.2-7000ng，線形相關(guān)系數(shù)R2大于0.998，線性范圍為4個數(shù)量級，峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2-7%，保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2-0.4%，可以用于具體定量。關(guān)鍵詞：離子色譜CarboPacMA1CarboPacTMPA1肉湯發(fā)酵液肉湯發(fā)酵液是養(yǎng)料、副產(chǎn)物、細(xì)胞、細(xì)胞碎片和目標(biāo)產(chǎn)物的

2、復(fù)雜混合物。這些成分中的很大一部分不能通過吸收法來檢測。高效陰離子交換色譜技術(shù)能夠分離碳水化合物的復(fù)雜混合物，如肉湯發(fā)酵液等。高效陰離子交換色譜的高分辨能力和脈沖安培法的選擇性使得碳水化合物、二元醇、醛醇和其他醇類（如甲醇和乙醇）的同時測定成為可能，而且其他發(fā)酵成分干擾很少[1-3]。此套裝置具有很強(qiáng)的分析能力，可以通過一套儀器和色譜方法同時檢測大批量的不同化合物，無需衍生。本文描述了兩種不同的陰離子交換分析柱和安培檢測器聯(lián)用分析酵母和發(fā)酵液中簡單的糖類、醛醇、醇類和二元醇類的方法。體系中有包含的的無機(jī)和有機(jī)陰離子，可以被IonPacAS11和AS11-HC陰離子交換柱分離而后通過抑制電導(dǎo)法

3、檢測[4]。本文比較了CarboPacTMPA1和CarboPacMA1兩種柱子分析糖類、糖醇、醇類和二元醇類的選擇性。本文報道了DX-500BioLC系統(tǒng)與脈沖安培檢測聯(lián)用（CarboPacMA1柱分離）方法的檢測限、線性范圍、選擇性和精密度。www.sepu.net1實驗部分1.1儀器與試劑DionexDX-500BioLC色譜裝置，包括：GP40梯度泵，帶真空脫氣裝置；LC30或LC25柱溫箱；ED40電化學(xué)檢測器；AS3500自動進(jìn)樣器；PeakNet色譜工作站氫氧化鈉，50%w/w，F(xiàn)isher和JTBaker；去離子水，電阻大于等于18MΩ-cm；D-阿拉伯糖，無水；L-阿拉伯醇

4、；2，3－丁二醇；D-纖維二糖；2-脫氧－D－葡萄糖；赤蘚醇；乙醇；D－果糖，參考級；海藻糖，參考級；半乳糖醇，參考級；D-半乳糖，參考級；半乳糖胺，參考級；D-葡萄糖胺，參考級；β－D－葡萄糖，參考級；丙三醇；α－乳糖，單水合物；麥芽糖，單水合物，參考級；麥芽糖醇；麥芽三糖水合物；甘露醇，ACS級；甲醇；棉子糖，五水合物，參考級；L-鼠李糖，單水合物；D-核糖，參考級；核糖醇，參考級；山梨醇；蔗糖；α－α－海藻糖，二水合物，參考級；D-木糖，無水合物。1.2色譜條件CarboPacMA1方法：柱子：CarboPacMA1分析柱（P/N44066）；CarboPacMA1保護(hù)柱（P/N440

5、67）淋洗液：A：480mMNaOH；流速：0.4ml/min程序：等度淋洗（0-70.min，100%A）CarboPacPA1方法：柱子：CarboPacPA1分析柱（P/N35391）；CarboPacPA1保護(hù)柱（P/N43096）淋洗液：A:水；B:100mMNaOH；C:250mMNaOH，流速：1.0ml/min程序：兩種方法通用的條件：進(jìn)樣體積：10uL；溫度：30℃；檢測器（ED40）：積分安培，金工作電極波形選擇：時間（s）電位（V）積分圖1～2表明，CarboPacMA1柱和CarboPacPA1柱具有不同的選擇性，因此，在測定發(fā)酵液中的醇類和糖類化合物時具有不同的強(qiáng)度

6、。柱的選擇與分析物的種類、濃度和期望的分析時間有關(guān)。圖1CarboPacMA1柱分離和積分安培檢測發(fā)酵肉湯中常見的糖類、醛醇、醇類和二元醇圖2CarboPacPA1柱分離發(fā)酵肉湯中常見的糖類、醛醇、醇類和二元醇2結(jié)論:上述結(jié)果表明高效陰離子交換色譜和脈沖安培檢測法能分析酵母和細(xì)菌發(fā)酵液中的糖類化合物。CarboPacMA1和CarboPacPA1這兩種柱子均適于分析發(fā)酵液中的糖類、乙醇、醛醇和二元醇。MA1柱能更好的分離早淋洗出的化合物如乙醇、二元醇、醛醇和單糖類，對于較復(fù)雜的糖類化合物如三糖等淋洗時間較長。PA1柱能快速有效的分離雙糖和三糖。糖類化合物和醛醇的復(fù)雜混合物能被同時檢測，為優(yōu)化

7、發(fā)酵過程提供信息。參考文獻(xiàn)[1]RobinettRSR,HerberWK.J.Chromatogr.A,1994,671,315-322.[2]HerberWK,RobinettRSR.J.Chromatogr.A,1994,676,287-295.[3]Marko-VargaG,ButtlerT,GortonL,OlssonL,DurandG,BarceloD.J.Chromatogr.A,1994,665