尿液紅細(xì)胞及形態(tài)

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1、尿液紅細(xì)胞及形態(tài)學(xué)檢查血尿的概念鏡下血尿：以傳統(tǒng)的尿離心沉渣玻片涂片，在高倍鏡下檢查10個視野后，如每高倍視野中見到紅細(xì)胞超過3～5個，則定為鏡下血尿。肉眼血尿：重癥者尿呈洗肉水樣或血色，稱為肉眼血尿。尿紅細(xì)胞檢測方法干化學(xué)分析法顯微鏡檢查法（鏡檢）自動化尿沉渣分析儀法單克隆抗體免疫法干化學(xué)法原理：利用尿液中紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白或其破壞釋放出的血紅蛋白均具有過氧化物酶活性，可使過氧氫茴香素或過氧化氫烯鈷釋放出新生態(tài)氧，后者可氧化有關(guān)色原(如鄰甲苯胺)顯色。因此，它既可檢測紅細(xì)胞，也可檢測游離血紅蛋白，還可作為紅細(xì)胞鏡檢的篩選法。不足：吩噻嗪類或吩嗪類藥

2、物、肌紅蛋白、對熱不穩(wěn)定酶、氧化劑或細(xì)菌過氧化物酶、尿pH值偏高等均可使隱血出現(xiàn)假陽性。尿液中存在大量維生素C時，可由于競爭性抑制反應(yīng)而使干化學(xué)隱血出現(xiàn)假陰性。顯微鏡檢查法（鏡檢）尿沉渣鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)是：①醫(yī)生要求鏡檢或病人的主訴、體征可能在尿沉渣中出現(xiàn)除紅、白細(xì)胞以外的有形成分如結(jié)晶、異常細(xì)胞等；②泌尿系統(tǒng)疾病或可引發(fā)腎臟并發(fā)癥的疾??；③尿液顏色、濁度、蛋白、亞硝酸鹽、紅細(xì)胞、白細(xì)胞有任何一項異常者。對于干化學(xué)篩選后的鏡檢問題，國內(nèi)學(xué)者有爭議，有學(xué)者認(rèn)為鏡檢是尿沉渣分析的參考標(biāo)準(zhǔn)，其重要意義是任何方法無可替代的，只要有條件，最好每份標(biāo)本都鏡檢。尿紅細(xì)

3、胞鏡檢是尿液紅細(xì)胞檢測的參考標(biāo)準(zhǔn)。其不足是：①有些紅細(xì)胞在腎臟長時間滯留，受機(jī)械作用破碎或在血管內(nèi)發(fā)生溶血，形成Hb尿，不能檢出；②規(guī)范化尿沉渣鏡檢操作較為繁瑣（標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟：新鮮尿液10ml，1500r/min離心5min后留0.2ml尿沉渣，將尿沉渣充盈到標(biāo)準(zhǔn)尿沉渣計數(shù)板內(nèi)，計算出紅細(xì)胞數(shù)/μl）；③獲得準(zhǔn)確的試驗結(jié)果，除需訓(xùn)練有素、工作認(rèn)真負(fù)責(zé)的技術(shù)人員外，還需對所用試驗器材（標(biāo)本收集器皿、離心機(jī)及計數(shù)板）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。自動尿沉渣分析儀UF-100尿沉渣分析儀對尿液中有形成分直接作熒光染色，利用流式細(xì)胞儀原理，通過前向散射光強(qiáng)度(Fsc)、前

4、向散射光脈沖寬度(Fscw)、熒光強(qiáng)度(Fls)、熒光脈沖寬度(Flw)以及細(xì)胞電阻抗等參數(shù)來檢測尿中有形成分的大小、長度、染色情況，從而區(qū)分尿中的各種有形成分，具有操作簡單、結(jié)果重復(fù)性好等特點(diǎn)。在紅細(xì)胞檢測方面，UF-100的特點(diǎn)之一是同時提供尿紅細(xì)胞均一型和非均一型指標(biāo)，對鑒別尿中紅細(xì)胞的來源有較大參考價值。結(jié)晶、菌尿（草酸鈣結(jié)晶和霉菌）導(dǎo)致假陽性，紅細(xì)胞碎片及影紅細(xì)胞相對于普通紅細(xì)胞而言其熒光染色敏感度下降，熒光強(qiáng)度弱而造成儀器漏檢。單克隆抗體免疫法可將尿液中的紅細(xì)胞或Hb與試劑中單克隆抗體結(jié)合并顯色。其優(yōu)點(diǎn)是敏感度高、特異性好。按每個紅細(xì)胞

5、Hb含量為30pg計，尿液中含有2個紅細(xì)胞/μl（相當(dāng)于0.5/HFP）即可檢出。其特異性體現(xiàn)在僅與人Hb起反應(yīng)，假陽性率很低。由于其過于敏感，在正常人尿內(nèi)含紅細(xì)胞（0～3/HFP）時，即可發(fā)生反應(yīng)。因此，不適合常規(guī)尿紅細(xì)胞檢查。但當(dāng)常規(guī)鏡檢與干化學(xué)法結(jié)果不能解釋時，如尿中紅細(xì)胞溶解和受某些物質(zhì)干擾干化學(xué)檢查陽性，而鏡檢未找到紅細(xì)胞，應(yīng)用單克隆抗體免疫法可為尿中紅細(xì)胞的性質(zhì)提供鑒別診斷依據(jù)。綜合評價尿紅細(xì)胞鏡檢是尿液紅細(xì)胞檢測的參考標(biāo)準(zhǔn)，但對尿中溶解的紅細(xì)胞不能檢出。干化學(xué)法可檢測Hb，既有助于溶血性疾病的診斷，也可彌補(bǔ)鏡檢不能檢出破壞的紅細(xì)胞之不

6、足，還可作為尿紅細(xì)胞鏡檢的篩選方法。但必須注重尿液分析儀及試劑帶的質(zhì)量及在工作中可能出現(xiàn)的干擾因素。綜合評價單克隆抗體免疫法檢查尿液紅細(xì)胞具有很好的敏感性和特異性，但由于其過于敏感，不能用于常規(guī)檢測；在鏡檢和干化學(xué)法檢測結(jié)果不可解釋時，其有重要的鑒別診斷價值。尿流式細(xì)胞儀檢查不僅對尿紅細(xì)胞定量分析有意義，而且還能對尿紅細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分析，以確定血尿來源。但分析過程易受某些因素的干擾，如酵母菌、精子等，當(dāng)儀器出現(xiàn)報警時，必須用鏡檢確認(rèn)。尿紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查主要用于鑒別腎性血尿和非腎性血尿。主要方法有：普通光鏡、相差顯微鏡、掃描電鏡、血液分析儀、尿液有形成

7、分分析儀等。普通光鏡檢查通常，在高倍鏡下(400倍)識別非染色細(xì)胞形態(tài)，此法由于缺乏色澤對比和立體感，常要求觀察者有豐富熟練的尿形態(tài)學(xué)經(jīng)驗。改用染色法(甲基綠染色，結(jié)晶紫-沙黃染色，或瑞氏染色)可增加形態(tài)鑒別特征。相差顯微鏡檢查1968年，Kark研究小組開始應(yīng)用相差顯微鏡觀察尿細(xì)胞等形態(tài)，1979年澳大利亞的腎病學(xué)家Birch和Fairly應(yīng)用于臨床。相差顯微鏡反映紅細(xì)胞立體感強(qiáng)，是目前檢查尿紅細(xì)胞形態(tài)最常用的方法。掃描電鏡1983年，F(xiàn)asseff用掃描電鏡觀察尿紅細(xì)胞。由于立體感強(qiáng)，可敏感地觀察到紅細(xì)胞表面的細(xì)微變化。但因價格昂貴而難以普及于

8、臨床。尿液有形成分分析儀1995年，日本推出流式細(xì)胞技術(shù)為原理的尿液分析儀SysmexUF-100，可將尿中成分作熒光染色