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1、5羥色胺在大鼠海馬CA1、CA2、CA3腦區(qū)的分布與表達(dá)作者:易傳安馬曉凱岳曉玲王濱【摘要】目的通過觀察5羥色胺(5HT)在海馬神經(jīng)環(huán)路的分布和表達(dá),為研究5HT參與學(xué)習(xí)記憶的作用機(jī)制提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。方法采用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀測抗5HT的抗體陽性神經(jīng)元在海馬CA1、CA2和CA3區(qū)的分布特征。結(jié)果①抗5HT的抗體在海馬CA1、CA2和CA3的細(xì)胞中廣泛分布。②海馬中分子層陽性細(xì)胞數(shù)較少,排列不規(guī)則。錐體層細(xì)胞從內(nèi)到外排列整齊,密集成帶,染色強(qiáng)烈。多形層細(xì)胞染色細(xì)胞散在分布。③空白對照切片未見抗5HT抗體的陽性神經(jīng)元胞體
2、。結(jié)論5HT在大鼠海馬分布廣泛,可能參與了海馬學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的過程?!娟P(guān)鍵詞】5HT;海馬;CA1、CA2和CA3;表達(dá) 【Abstract】ObjectiveToobservethedistributionandexpressionofthe5HTinthehippocampus,andprovidethemorphologicalevidencefordefiningthemechanismof5HTwhichparticipatesthelearningandmemory.MethodsThedistributiona
3、ndcharacteristicsoftheanti5HTpositiveneuronsintheCA1,CA2andCA3ofthehippocampuswereobservedby10immunohistochemicaltechnology.Results①Anti5HTantibodieswerewidelydistributedintheCA1,CA2andCA3ofthehippocampuscell.②Thepositivecellsofmolecularlayerwererelativelylittle,ir
4、regularlyarranged,thecellofpyramidallayerregularlyarranged,denseband,stainedstronglyinhippocampus.Thestainingcellsinthepolymorphiclayerwerescattered.③Controlsectionswerenegativefortheexpressionofanti5HTantibody.Conclusions5HTiswidelydistributedandexpressedinthehippo
5、campus,andinvolvedintheprocessoflearningandmemory. 【Keywords】5HT;Hippocampus;CA1,CA2andCA3;Expression 海馬(hippocampus)屬于大腦的邊緣系統(tǒng),包括CA1、CA2、CA3和CA4區(qū)。CA4區(qū)鄰接齒狀回,CA1區(qū)與副下托相連,在結(jié)構(gòu)上無明顯分界標(biāo)志,功能上可視為一個(gè)整體。有實(shí)驗(yàn)研究表明,海馬是學(xué)習(xí)、記憶的關(guān)鍵或中心〔1〕。但學(xué)習(xí)和記憶功能的實(shí)現(xiàn)需要多個(gè)腦區(qū)綜合作用,并不局限于大腦的某個(gè)特定區(qū)域〔2〕。外界信息通過眼、耳等
6、感覺器官接受傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)化,然后通過海馬整合處理、存儲,最后經(jīng)穹窿傳出。5羥色胺(5HT)是一種在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布的神經(jīng)遞質(zhì),主要參與情感、睡眠、疼痛、學(xué)習(xí)記憶等復(fù)雜生理功能的調(diào)節(jié)。510HT胞體位于腦干的中縫核團(tuán),它發(fā)出的投射纖維廣泛分布在腦的各部。舒斯云等〔3,4〕發(fā)現(xiàn)紋狀體邊緣處(Marginaldivision,Mrd)有5HT免疫陽性纖維及終末分布,揭示了紋狀體邊緣處是學(xué)習(xí)記憶另一個(gè)新區(qū)。但5HT在海馬內(nèi)CA1、CA2、CA3和CA4區(qū)的表達(dá)和對學(xué)習(xí)記憶的作用少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)觀察大鼠海馬CA1、CA2和CA3
7、每個(gè)區(qū)域陽性神經(jīng)元的數(shù)目、形狀和密度,為進(jìn)一步研究5HT在海馬學(xué)習(xí)、記憶的作用機(jī)制提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。 1材料與方法 1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年雄性SD大鼠8只,體質(zhì)量200~250g(由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。 1.2主要試劑和儀器山羊超敏二步法免疫組化檢測試劑和二氨基聯(lián)苯胺(DAB)(購自北京中杉金橋)。恒冷箱切片機(jī):德國徠卡公司。Olympus萬能顯微鏡:日本Olympus公司?! ?.3灌注固定在麻醉缸先取乙醚把大鼠基礎(chǔ)麻醉,然后經(jīng)10%水合氯醛(1ml/100g)腹腔麻醉后,仰臥固定,用剪刀打開胸腔,將穿刺針經(jīng)左心室插
8、入升主動(dòng)脈,剪開右心耳,先用150ml生理鹽水快速?zèng)_洗后,給予4%多聚甲醛磷酸緩沖液(PBS)300ml灌注,前100ml快灌,后200ml慢灌,持續(xù)灌注410h后斷頭開顱取腦,放入相同固定液中4℃過夜。振動(dòng)切片機(jī)或恒冷箱切片機(jī)連續(xù)冠