冷沉淀制備方法及質(zhì)量影響因素

《冷沉淀制備方法及質(zhì)量影響因素》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、冷沉淀制備方法及質(zhì)量影響因素【關(guān)鍵詞】冷沉淀;制備;質(zhì)量　　冷沉淀是用新鮮冰凍血漿為原料制備的一種成分血，主要用于血友病甲、血管性血友病、纖維蛋白原缺乏癥患者，也可用于手術(shù)后出血、嚴(yán)重外傷及DIC等[1]。因冷沉淀中的Ⅷ因子為不穩(wěn)定因子，受多種因素影響，所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同，現(xiàn)將本中心的冷沉淀制備方法及質(zhì)量因素影響分析匯報如下?！　?材料與方法　　1.1材料與儀器　　大容量低溫離心機(jī)(CrYOFUge6000),日本日立公司生產(chǎn)的速凍冰箱(SanYO),美國CYTOTHERM公司生產(chǎn)的CT-4T

2、.6C型自動搖擺式恒溫水浴溶化箱，日本產(chǎn)SYSMaX(CA-50)凝血因子分析儀，韓國產(chǎn)熱合機(jī)(SE250)?！　?.2冷沉淀原料漿制備　　采用費(fèi)森尤斯卡比(廣州)生產(chǎn)的密閉四聯(lián)袋，采集400ml全血6h內(nèi)離心分離制成血漿60袋(200±10ml)，將血漿迅速置-80℃5速凍機(jī)內(nèi)，凍結(jié)后置-30℃冰箱備用。　　1.3制備冷沉淀　　取60袋血漿置室溫中放置3min，待連接兩袋的塑料管變軟后分兩組(A、B)放入低溫水浴箱中(4℃~6℃)，A組30袋用水浴虹吸法制備冷沉淀，B組30袋用快速溶化離心法制備冷沉淀，計

3、時。A組新鮮冰凍血漿融化時固定于恒溫?fù)u擺式水浴箱的血袋夾中，垂直浸沒于恒溫的循環(huán)水浴中，水浴箱自動搖擺，血漿溶化，上清液虹吸流入空袋，袋中心剩余(25±5)ml未溶化的血漿及吸附在上面的冷沉淀。B組新鮮冰凍血漿融化時去掉固定夾，融化過程中人工給力捏碎血漿冰塊，血漿溶解到尚存少許冰碴后，用大容量低溫離心機(jī)離心，溫度4℃，相對離心力3200g,離心20min，分離血漿，袋內(nèi)存留(25±5)ml血漿冷沉淀，將A、B組冷沉淀快速置于速凍冰箱中凍結(jié)。A組平均用1.2h，B組平均用2.0h?！　?.4質(zhì)量檢測　　用血凝

4、儀對不同方法制備的冷沉淀進(jìn)行凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原的測定,t檢驗(yàn)分析?！　?結(jié)果5　　用相同的溶化設(shè)備，采用不同制備方法制備所得冷沉淀質(zhì)量有差異，見表1。結(jié)果顯示：快速溶化離心法每袋中凝血因子Ⅷ>80IU，纖維蛋白原>150mg，符合國家標(biāo)準(zhǔn)[1]，水浴虹吸法凝血因子Ⅷ≥80IU，符合國家標(biāo)準(zhǔn)，纖維蛋白原<150mg，不符合國家標(biāo)準(zhǔn)[1]。表1冷沉淀質(zhì)量檢測結(jié)果　　3影響冷沉淀質(zhì)量的關(guān)鍵因素　　冷沉淀制備經(jīng)歷了全血、新鮮冰凍血漿、冷沉淀三個階段，有些可控，有些不可控，任何一個環(huán)節(jié)的誤差都會

5、影響冷沉淀的質(zhì)量?！　?.1采集個體　　冷沉淀中凝血因子Ⅷ、纖維蛋白原的收集率與獻(xiàn)血者個體有關(guān)。正常個體中凝血因子Ⅷ水平相差在50%~200%之間;與血型有關(guān);O型含量最少，已知服用一些藥物如避孕藥可增加凝血因子Ⅷ水平，血管作用肽1-脫氨-8-D精氨酸血管加壓素(DDAVP)可增加血循環(huán)中凝血因子Ⅷ水平達(dá)300%[2]?！　?.2采集速度5　　血液采集過程中應(yīng)注意采集速度，要求200ml全血采集時間<3min，400ml全血采集時間<6min，如采血不暢，出現(xiàn)凝塊及溶血均會影響全血中冷沉淀凝血因

6、子Ⅷ的含量。　　3.3制備過程　　冷沉淀中的主要成分凝血因子Ⅷ是一種不穩(wěn)定的凝血因子，新鮮冰凍血漿的溶化溫度直接影響產(chǎn)品質(zhì)量，在4℃~6℃水浴中溶化回收率較高，在8℃以上產(chǎn)生自溶?？焖偃芑x心法制備冷沉淀的質(zhì)量優(yōu)于水浴虹吸法，分析原因，前者在于溶化新冰時人工捏碎血漿冰塊，加快溶化速度，再通過低溫重離心，使新鮮冰凍血漿中90%的冷沉淀沉淀在漿袋底部，流失少;而水浴虹吸法在虹吸過程中，一部分凝血因子及纖維蛋白原也隨血漿進(jìn)入空袋。　　4討論　　近幾年，由于成分輸血的大力推廣及凝血因子制品的缺乏，我市各醫(yī)院冷沉淀用

7、量明顯增多，不僅用于治療血友病A，在燒傷外科手術(shù)止血、產(chǎn)后大出血、外傷、DIC治療中起到關(guān)鍵作用。制備冷沉淀時，要控制各環(huán)節(jié)影響因素，在把握好水浴溫度和溶化速度這兩個關(guān)鍵點(diǎn)的同時，采用快速溶化離心法制備冷沉淀，臨床療效會更好?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】　15全血及成分血質(zhì)量要求，中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB18469-2001.中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局2001-10-22批準(zhǔn).　　2高鋒.臨床輸血與檢驗(yàn).北京：人民衛(wèi)生出版社，2008:139-140.5