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1、p57KIP2、cyclinD1和cyclinE在宮頸鱗癌中的表達(dá)及意義作者：周正平，肖慶邦，冉豐豐，王進(jìn)京，鄭洪【摘要】目的探討p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法用免疫組織化學(xué)SP法檢測100例宮頸鱗癌、60例宮頸上皮內(nèi)瘤變和30例正常宮頸鱗狀上皮組織中p57KIP2、cyclinD1和cyclinE蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果cyclinD1、cyclinE蛋白在宮頸SCC與NE、CIN與NE組織中陽性表達(dá)率之間比較、cyclinE蛋白在宮頸SCC與CIN組織中陽性表達(dá)率之間比較，差異均有顯著性(P<0
2、.01)；cyclinD1與cyclinE之間的表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.01)；三者表達(dá)均與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、患者年齡無關(guān)(P>0.05)。結(jié)論p57KIP2、cyclinD1及cyclinE蛋白共同參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。cyclinD1和cyclinE蛋白高表達(dá)可能是宮頸組織惡變的重要生物學(xué)標(biāo)志，cyclinE異常表達(dá)是宮頸癌發(fā)生的早期事件?！娟P(guān)鍵詞】宮頸癌；免疫組織化學(xué)；p57KIP2；cyclinD1；cyclinE1資料與方法81.1標(biāo)本來源收集遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科1999年1月～2004年1月的宮頸活檢或者手術(shù)確認(rèn)的宮頸S
3、CC標(biāo)本100例(I級27例、II級48例、III級25例)，CIN60例(I級20例、II級20例、III級20例)。病人術(shù)前均未行放、化等治療。檢出伴盆腔淋巴結(jié)腫大41例，其中伴盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例(每例平均檢出淋巴結(jié)4.33枚)；患者年齡20～75歲，中位年齡45歲。隨機(jī)選取30例正常宮頸鱗狀上皮(Normalcervicalsquamousepithelium,NE)（均選自因子宮肌瘤行子宮切除術(shù)的宮頸上皮組織）作為試驗對照組。1.2試劑兔抗人p57KIP2多克隆抗體、鼠抗人cyclinD1單克隆抗體(DCS/6)、鼠抗人cyclinE單克隆抗體
4、(13A3)，與SP試劑盒、DAB酶底物顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。3種抗體的工作濃度分別為1∶75、1∶100、1∶50。1.3方法將存檔的10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片，行HE染色和SP免疫組化染色。嚴(yán)格按照說明書操作步驟進(jìn)行，DAB顯色，蘇木精復(fù)染。用邁新生物技術(shù)有限公司提供的陽性切片作陽性對照，以PBS代替一抗作空白對照。組織抗原均采用高壓修復(fù)處理。1.4結(jié)果判斷p57KIP2、cyclinD1及cyclin8E蛋白陽性信號呈棕黃色或棕褐色，均主要定位于細(xì)胞核，見圖1～3。每張切片隨機(jī)選取有腫瘤組織的不同高倍
5、視野(×400)，計數(shù)2000個腫瘤細(xì)胞，根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)占所計數(shù)腫瘤細(xì)胞的百分率分為：(1)陰性(－)：陽性細(xì)胞數(shù)<5%；(2)弱陽性(+)：陽性細(xì)胞數(shù)為5%～24%；(3)陽性(++)：陽性細(xì)胞數(shù)為25%～49%；(4)強(qiáng)陽性(+++)：陽性細(xì)胞數(shù)≥50%。1.5統(tǒng)計學(xué)處理所得數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件，應(yīng)用χ2檢驗、Fisher確切概率法及配對四格表進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。2結(jié)果2.1p57KIP2、cyclinD1及cyclinE在宮頸SCC、CIN、NE中的表達(dá)cyclinD1、cyclinE蛋白在宮頸SCC與在NE中陽性表達(dá)率之間比較、在C
6、IN與在NE中陽性表達(dá)率之間比較、以及cyclinE蛋白在宮頸SCC與在CIN中陽性表達(dá)率之間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；p57KIP2蛋白在宮頸SCC與在CIN、NE中陽性表達(dá)率之間比較、以及在CIN、NE組織中陽性表達(dá)率之間比較、cyclinD1在宮頸SCC與在CIN中陽性率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。2.2p57KIP2、cyclinD1及cyclin8E蛋白在宮頸SCC中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系在宮頸SCC組織中，隨著組織學(xué)分級的增加，p57KIP2蛋白的陽性表達(dá)率逐漸降低，cyclinD1蛋白陽性
7、表達(dá)率在組織學(xué)Ⅰ級組高于組織學(xué)Ⅱ、Ⅲ級組，cyclinE蛋白的陽性表達(dá)率在組織學(xué)Ⅲ級組高于組織學(xué)Ⅰ、Ⅱ級組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；在盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組，p57KIP2蛋白的陽性表達(dá)率低于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組，cyclinD1、cyclinE蛋白陽性表達(dá)率均明顯高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；p57KIP2、cyclinD1、cyclinE蛋白的表達(dá)均與患者年齡無關(guān)(P>0.05)，見表2。2.3p57KIP2、cyclinD1和cyclinE蛋白在宮頸鱗癌組織中表達(dá)的相互關(guān)系根據(jù)配對四格表分析，
8、p57KIP2與cyclinD1之間、p57KIP2與cyclinE之間的陽性表
