中藥抗癌靈對肝癌smmc7721細胞增殖的影響

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1、中藥抗癌靈對肝癌SMMC7721細胞增殖的影響作者：韋鵬涯，浦洪琴，韋星，李朝敢，農(nóng)嵩【摘要】　　目的觀察中藥抗癌靈（Kangailing,Ka）對人肝癌SMMC7721細胞增殖的影響并探討其可能分子機制。方法提取、配制不同抗癌靈生藥濃度，作用于體外培養(yǎng)的人肝癌SMMC7721細胞，采用MTT法檢測細胞增殖抑制率，流式細胞儀法檢測凋亡率，二步法免疫組化檢測野生型P53、NFкBP65和Bcl2蛋白表達變化。結(jié)果與正常對照組比較，Ka各濃度組細胞抑制率顯著上升（P＜0.001），細胞凋亡率明顯升高（P＜0.01或P＜0.001），P53蛋白表達顯著上升（P＜0.001），NFк

2、B和Bcl2蛋白表達明顯下降（P＜0.001）。結(jié)論Ka通過誘導細胞凋亡而抑制肝癌SMMC7721細胞增殖，其分子機制可能與上調(diào)野生型P53蛋白表達，下調(diào)NFкBP65和Bcl2蛋白表達有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】中藥抗癌靈肝癌細胞增殖細胞凋亡基因表達　　【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsoftraditionalChinesemedicineKangailingonproliferationinhumanhepatomaSMMC7721celllinesinvitroandinvestigateitspossiblemolecularmechan

3、ism.MethodsTheproliferation9inhibitoryratewasevaluatedbyMTTassay.Apoptoticratewasdeterminedbyflowcytometry.TheexpressionofwildtypeP53,NFкBP65andBcl2proteinsweredetectedbytwostepimmunhistochemicalstaining.ResultsThecellinhibitoryrateandapoptoticrateandtheexpressionofP53ProteinofKatreatmentgroup

4、sincreasedobviouslythanthatofcontrolgroup(P＜0.001),whileNFкBP65andBcl2Proteinsweredecreasedmarkedly(P＜0.001).ConclusionKangailingcouldinhibittheproliferationofSMMC7721cellsinvitrobyinducingcancercellapoptosis,anditsmolecularmechanismmaybeassociatedwiththeupregulationoftheexpressionofwildtypeP

5、53proteinanddownregulationoftheexpressionofNFкBP65andBcl2proteins.　　【Keywords】traditionalChinesemedicine;Kangailing;livercancer;proliferation;apoptosis;geneexpression.9　　腫瘤不僅是細胞增殖和分化異常的疾病，也是細胞凋亡異常的疾病。越來越多證據(jù)表明，中藥抗癌的療效與中藥誘導腫瘤細胞凋亡有關(guān)。許多天然藥物可以通過干擾腫瘤細胞生長、代謝和增殖等過程，最終誘導觸發(fā)腫瘤細胞發(fā)生凋亡，從而達到抑制腫瘤細胞增殖的作用［1，2］。

6、復方中藥抗癌靈(Kangailing，Ka)由白英、白花蛇舌草、半枝蓮和半邊蓮等中草藥組成，具有清熱解毒、活血化瘀等功效。臨床上該復方廣泛應用于各種癌癥的治療，尤其對肝癌、肺癌、胃癌及鼻咽癌等有較好的療效。本研究通過觀察中藥Ka對人肝癌SMMC7721細胞增殖作用的影響，旨在探討其分子作用機制，為該復方中藥應用于肝癌的臨床治療提供理論依據(jù)?！　〔牧虾头椒ā　?.材料　　人肝癌SMMC7721細胞株由中科院上海細胞生物研究所細胞庫提供，胎牛血清(FBS)、RPMI1640培養(yǎng)基為GIBCO公司產(chǎn)品，四甲基偶氮唑藍（MTT）為上海普飛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，碘化丙啶(propidiumio

7、dide,PI)為Sigma公司產(chǎn)品，鼠抗人NFкBP65、野生型P53和Bcl2單克隆抗體為Santacruz公司產(chǎn)品，PowerVisionTM免疫組化檢測試劑盒為北京中杉金橋生物技術(shù)公司產(chǎn)品。KHBLabsystemsK3酶標儀（芬蘭雷勃公司），BX51型顯微鏡（OLYMPUS，日本），流式細胞儀(BectonDickinson,USA)?！　?.方法9　　（1）藥物提取取復方中藥抗癌靈(購買于百色市中醫(yī)院中藥房)干品1