食品微生物之檢驗(yàn)方法-阪崎腸桿菌之檢驗(yàn)

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1、附件食品微生物之檢驗(yàn)方法－阪崎腸桿菌之檢驗(yàn)1適用範(fàn)圍：本方法適用於一般食品及奶粉中阪崎腸桿菌之檢驗(yàn)。2檢驗(yàn)方法：2.1工作環(huán)境：工作平臺(tái)須寬敞、潔淨(jìng)、光線良好，操作平臺(tái)光度為100呎燭光以上，密閉室內(nèi)換氣良好，儘可能沒(méi)有灰塵及流動(dòng)空氣。每15分鐘落菌數(shù)不得超過(guò)15CFU／培養(yǎng)皿。2.2器具及材料：2.2.1乾熱滅菌器。2.2.2高壓滅菌釜。2.2.3攪拌均質(zhì)器（Blender）或鐵胃（Stomacher）：適用於無(wú)菌操作者。2.2.4天平：可稱(chēng)量到2000g者，靈敏度為0.1g；可稱(chēng)量到120g者，靈敏度為1mg。2.2

2、.5冰箱：能維持5±3℃者。2.2.6吸管或吸管尖：已滅菌，1mL吸管應(yīng)有0.01mL之刻度；5mL及10mL吸管應(yīng)有0.1mL之刻度。2.2.7吸管輔助器（Pipetteaid）或微量分注器。2.2.8稀釋瓶：160mL，玻璃、聚乙烯（polyethylene）、鐵弗龍（Teflon）或其他能耐121℃濕熱滅菌20分鐘以上之塑膠材質(zhì)，附螺旋蓋。2.2.9培養(yǎng)皿：已滅菌，內(nèi)徑約9cm，深度約15mm，底皿之內(nèi)外面應(yīng)平坦，無(wú)氣泡、刮傷或其他缺點(diǎn)。2.2.10增菌用容器：附螺旋蓋之125mL、250mL、2L三角錐瓶或廣口瓶

3、；玻璃、聚乙烯、鐵弗龍或其他能耐121℃濕熱滅菌20分鐘以上之塑膠材質(zhì)。2.2.11pH測(cè)定儀。2.2.12培養(yǎng)箱：能維持內(nèi)部溫度在±1℃以內(nèi)者。2.2.13溫度計(jì)：量測(cè)溫度範(fàn)圍1～55℃，最小刻度0.1℃。2.2.14水?。杭由w，具水流循環(huán)系統(tǒng)，能維持水溫溫差在±0.2℃以內(nèi)者。2.2.15接種針及接種環(huán)（直徑約3mm）：鎳鉻合金、鉑銥或鉻線材質(zhì)，或可拋棄式者。2.2.16曲玻棒：可滅菌者，直徑3～4mm，塗抹區(qū)域45～55mm。2.2.17試管：10×100mm，13×100mm，13×120mm，15×150mm，

4、16×150mm試管，或其他適用者。2.2.18旋渦混合器（Vortexmixer）。2.2.19顯微鏡：能放大至1000倍以上之一般光學(xué)顯微鏡。2.2.20載玻片及蓋玻片：適用於染色及鏡檢用。2.2.21研缽、杵。2.2.22藥勺、剪刀、小刀、鑷子：可滅菌。2.2.23濾紙及褐色試藥瓶。2.2.24無(wú)菌濾膜：孔徑0.45μm或以下之親水性醋酸纖維膜。2.2.25杜蘭發(fā)酵管（Durhamfermentationtube）：外徑9×22mm或其他適用者。2.2.26試藥：氯化鈉、硫酸月桂酸鈉（sodiumlaurylsul

5、fate）、膽鹽No.3（bilesaltsNo.3）、中性紅（neutralred）、結(jié)晶紫（crystalviolet）、檸檬酸鐵銨（ferricammoniumcitrate）、去氧膽酸鈉（sodiumdesoxycholate）、硫代硫酸鈉（sodiumthiosulfate）、草酸銨（ammoniumoxalate）、碘化鉀、碘、沙黃O（safraninO）、對(duì)-二甲胺基苯甲醛（p-dimethylaminobenzaldehyde）、四甲基對(duì)位苯二胺鹽酸鹽（N,N,N',N'-tetramethyl-ρ-ph

6、enylenediamine?2HCl）、磷酸二氫鈉（NaH2PO4?H2O）、硝基苯哌喃半乳糖苷（o-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）、5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-哌喃葡萄糖苷（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-α-D-glucopyranoside）、亮綠（brilliantgreen）、酚紅（phenolred）、溴甲酚紫（bromcresolpurple）、溴麝香草藍(lán)（bromthymolblue）、肌酸（creatine）、甲基紅（meth

7、ylred）、α-萘酚（α-naphthol）、氫氧化鉀、95%乙醇、無(wú)水乙醇、戊醇（amylalcohol）或異戊醇（isoamylalcohol）、乳糖、蔗糖、半乳糖醇（dulcitol）、核糖醇（adonitol）、棉子糖（raffinose）、山梨醇（sorbitol）、阿拉伯糖醇（D-arabitol）、氰化鉀、氫氧化鈉、L-離胺酸（L-lysine）、L-鳥(niǎo)胺酸（L-ornithine）、L-精胺酸（L-arginine）、礦物油或液態(tài)石蠟油（paraffinoil）及鹽酸等均採(cǎi)用化學(xué)試藥級(jí)。2.2.27試劑

8、：2.2.27.1無(wú)菌蒸餾水：　　　　　　蒸餾水900mL、90mL、9mL，分裝於增菌容器或試管中，以121℃滅菌15分鐘。2.2.27.20.85%生理食鹽水：　　　　　　取氯化鈉8.5g溶於1000mL蒸餾水中，分裝於試管內(nèi)，以121℃滅菌15分鐘。2.2.27.3柯瓦克氏試劑（Kovacs’reagent）：