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《牛血清白蛋白的分離提純工藝》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、課程設計說明書課程名稱：生物分離工程設計題目：牛血清白蛋白的分離提純工藝院系：環(huán)境與化學工程學院學生姓名：孫盼盼學號：41004020111專業(yè)班級：10級生物工程01班指導教師：王曉軍2013年6月20日目錄1.設計任務書………………........................……………………………………12.設計背景…………………....................…………………………….…………12.1牛血清白蛋白分離提純的簡介………....................…………12.2牛血清白蛋白分離提純的
2、意義.………...............……………13.設計原理……............………………………………........………………24.設計工藝流程及設計方案說明…....................…………………24.1對原材料的粗分級分離……..........……………………………34.2對粗分離成分進行細分級分離……..........……………………34.3蛋白的結(jié)晶與重結(jié)晶……..........………………......…………34.4對分離出的蛋白質(zhì)進行純度鑒定……..........………
3、…..……34.5牛血清白蛋白質(zhì)分離提純的整個工藝流程……............……35.操作過程……..........………………………………..……………45.1蛋白質(zhì)分離的準備階段……..........………………....…………45.2細分級分離設備的設計……..........……………………....……45.3蛋白質(zhì)的純度鑒定……..........…………………………............86.參考文獻……..........…………………...........…………...………87.課程設計心得……
4、..........……………………......................…91.設計任務書現(xiàn)有一混合物料液中含有酪蛋白（分子量：57000Da，pI4.5）、β-乳球蛋白（分子量：35000Da，pI5.1）、α-乳白蛋白（分子量：14000Da，pI4.2）和牛血清白蛋白（分子量：66200Da，pI4.7），設計一個分離純化工藝純化其中的牛血清白蛋白。2.設計背景2.1牛血清白蛋白分離提純的簡介蛋白質(zhì)是（protein）是生命的物質(zhì)基礎，沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。因此，它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯(lián)系在一起的
5、物質(zhì)。機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質(zhì)參與。蛋白質(zhì)占人體重量的16%~20%，即一個60kg重的成年人其體內(nèi)約有蛋白質(zhì)9.6~12kg。人體內(nèi)蛋白質(zhì)的種類很多，性質(zhì)、功能各異，但都是由20多種氨基酸按不同比例組合而成的，并在體內(nèi)不斷進行代謝與更新。蛋白質(zhì)具有很多生物化學共性，運用相關(guān)性質(zhì)進行蛋白質(zhì)的分離制備多種不同的單一蛋白質(zhì)，更好的為人們所有。蛋白質(zhì)的分離提純技術(shù)已經(jīng)很成熟，相關(guān)的工藝流程包含各種不同的分離提純設備，這些設備運用蛋白質(zhì)的不同原理對其進行分離純化，單一蛋白質(zhì)的分離提純在現(xiàn)實生活中具有重要意義！2
6、.2牛血清白蛋白分離提純的意義牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成817個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的
7、一種球蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66200Da，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，例如在westernblot中作為Blockingagent。3.設計原理采用等電點沉淀、凝膠過濾、親和層析等方法對蛋白質(zhì)進行分離提純，對相關(guān)分離提純所需條件可通過與電腦相連的方式進行精確控制，并在此基礎設計相關(guān)儀器分離提純蛋白質(zhì)，在分離提純過程中運用到的蛋白質(zhì)一些性質(zhì)：分子大小、溶解度、等電點、吸附特性等。根據(jù)生物分離原則：先純化，再脫鹽，最后成品加工。初步純化采用鹽析沉淀法，高度純化采用二維電泳。鹽析沉淀原理
8、：蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度是由蛋白質(zhì)周圍親水基團與水形成水化膜的程度，以及蛋白質(zhì)分子帶有電荷的情況決定的。當用中性鹽加入蛋白質(zhì)溶液，中性鹽對水分子的親和力大于蛋白質(zhì)，于是蛋白質(zhì)分子周圍的水化膜層減弱乃至消失。同時，中性鹽加入蛋白質(zhì)溶液后，由于離子強度發(fā)生改變，蛋白質(zhì)表面電荷大量被中和，更加
