rna的生物合成轉(zhuǎn)錄 課件

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資源描述:

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1、第十一章 RNA的生物合成 ——轉(zhuǎn)錄RNA的生物合成包括RNA轉(zhuǎn)錄—生物體以DNA為模板合成RNA的過程稱為轉(zhuǎn)錄或基因轉(zhuǎn)錄。RNA復(fù)制—某些RNA病毒傳遞遺傳信息的方式第一節(jié)RNA轉(zhuǎn)錄體系DNA模板四種NTPRNA聚合酶某些蛋白因子必要的無機離子一、DNA是RNA轉(zhuǎn)錄的模板(一)轉(zhuǎn)錄是不對稱的*不是細(xì)胞內(nèi)DNA全長都轉(zhuǎn)錄*轉(zhuǎn)錄時一條DNA鏈起轉(zhuǎn)錄生成,稱模板鏈(templatestrand),或稱有意義鏈與其互補的DNA鏈無轉(zhuǎn)錄活性稱編碼鏈(codingstrand),或稱反意義鏈。編碼鏈與RNA的序列完全相同,只

2、是T換成UDNA雙鏈中包含許多基因,而各基因的模板鏈不全在同一條鏈上,這種現(xiàn)象稱為不對稱轉(zhuǎn)錄。即:(1)DNA雙鏈中一條轉(zhuǎn)錄時,另一條鏈不被轉(zhuǎn)錄;(2)模板鏈并非永遠(yuǎn)在同一條鏈上。5’5’3’3’(二)可轉(zhuǎn)錄的DNA一個區(qū)段為一個轉(zhuǎn)錄單位5’3’轉(zhuǎn)錄單位調(diào)節(jié)組件結(jié)構(gòu)基因啟動子調(diào)節(jié)基因操縱基因可轉(zhuǎn)錄出RNA的區(qū)段啟動子(promotor):是轉(zhuǎn)錄起始點之前的一段核苷酸序列,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,又稱啟動基因。*原核生物啟動子:-35區(qū)-10區(qū)+1轉(zhuǎn)錄方向終止位點3’5’*真核生物啟動子:核心啟動子:TATA

3、盒、起始子(initiator)近側(cè)序列元件:GC盒、CAAT盒、OCT盒等RNA二、RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄的主要酶RNA聚合酶即DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶(DNAdirectedRNApolymerase,DDRP)模板:單鏈DNA原料:4種NTP產(chǎn)物:RNA(一)RNA轉(zhuǎn)錄的化學(xué)反應(yīng)NTP(NMP)n+ppiRNA聚合酶(二)RNA聚合酶具有多種功能*5’→3’聚合活性*解旋解鏈酶的活性使核苷酸通過磷酸二酯鍵依次聚合將模板DNA鏈解開一小段(≤20個堿基對)--缺乏3’?5’外切酶活性,無校讀功能全酶:五個亞基(?2

4、??’?)組成?2??’稱為核心酶參與RNA鏈的延長?亞基稱為起始因子辨認(rèn)啟動子,協(xié)助轉(zhuǎn)錄起始(三)原核生物的RNA聚合酶參與核心酶的組裝抗結(jié)核菌藥利福霉素可抑制原核生物轉(zhuǎn)錄:與?亞基非共價結(jié)合,阻止第一個NTP的進入結(jié)合底物并催化形成磷酸二酯鍵催化活性中心(hnRNA)、snRNARNA聚合酶I、II、III(四)真核生物的RNA聚合酶第二節(jié)RNA轉(zhuǎn)錄的基本過程三個階段:起始延長終止以原核生物為例:一、鏈的起始?因子辨認(rèn)啟動子并與核心酶結(jié)合為全酶識別轉(zhuǎn)錄起始點RNA聚合酶將DNA局部解鏈17bp,*起始點,RNA

5、聚合酶催化2個NTP按堿基配對原則以氫鍵結(jié)合于DNA模板,生成第1個磷酸二酯鍵*通常轉(zhuǎn)錄開始即5’端是pppA或pppG*RNA聚合酶全酶-DNA-pppGpN-OH-3’稱為轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物*轉(zhuǎn)錄起始不需要引物*轉(zhuǎn)錄開始后,?因子脫落并可反復(fù)利用由核心酶催化RNA鏈延長方向5′?3′二、鏈的延長核心酶三、鏈的終止原核生物轉(zhuǎn)錄終止方式:1、不依賴?因子的終止富含CG的發(fā)夾結(jié)構(gòu)(terminaor)終點的寡聚U*六聚體,50kD,有依賴RNA的ATP酶活性,是一種RNA-DNA解旋酶。*識別新生RNA鏈上的終止信號,使

6、RNA-DNA雙螺旋解開,釋放RNA,并和RNA聚合酶一起脫落。2、依賴?因子的終止?因子(終止因子,terminationfactor)第三節(jié)RNA轉(zhuǎn)錄后的加工過程真核:有核,斷裂基因,需加工,才成為有生物功能的RNA,即RNA的成熟過程。原核:無核,連續(xù)基因,很少加工轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在原核和真核生物的去路:一、信使RNA(mRNA)的加工真核細(xì)胞的mRNA是由其前體hnRNA加工而成1、剪接(splicing)*剪內(nèi)含子,接外顯子*選擇性剪接產(chǎn)物不同2、5’端加m7GTP“帽”3、3’端加polyA“尾”4、堿基的修飾

7、5、RNA的編輯與RNA沉默二、轉(zhuǎn)運RNA(tRNA)的加工1、切去5’端部分核苷酸2、切去3’端幾個核苷酸,加入CCA末端3、含多個tRNA前體的剪切4、堿基的修飾三、核蛋白體RNA(rRNA)的加工1、rRNA的剪切2、堿基的修飾第四節(jié)核酶——具有催化功能的RNA1982年,美,ThomasCech,四膜蟲的rRNA存在自我剪接*核酶:具有催化功能的RNA(ribozyme)。*核酶發(fā)現(xiàn)的意義:(自學(xué))十一章作業(yè)一、簡答1、簡述mRNA轉(zhuǎn)錄后加工的方式。2、簡述何為模板鏈和編碼鏈?二、論述從模板、原料、產(chǎn)物、堿

8、基配對、聚合酶等方面列表比較復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的異同點。復(fù)制轉(zhuǎn)錄原料dNTP(N=A.T.C.G)NTP(N=A.U.C.G)模板DNA雙鏈DNA的一條鏈產(chǎn)物DNA三種RNA方向5’端→3’端5’端→3’端方式半保留復(fù)制不對稱轉(zhuǎn)錄配對A-T;C-GA-U;T-A;C-G主要酶及因子DDDP,拓?fù)洚悩?gòu)酶,解鏈酶,引物酶,DNA連接酶,SSBDDRP,ρ因子等產(chǎn)物加工無

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