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1、鐵皮石斛組培與種植鐵皮石斛(DendrobiumcandidumWall.exLindl.)為蘭科多年生草本，屬附生蘭類。明代李時珍的《本草綱目》中記載：石斛除痹下氣、補內臟虛勞贏瘦，強陰益精。久服，厚腸胃，補內絕不足。來胃氣，長肌肉，益智除驚，輕身延年。道教醫(yī)學經典《道藏》中，鐵皮石斛名列中華..“九大仙草”之首。我國野生的鐵皮石斛資源主要分布在皖、浙、云、貴、川等地高山峻嶺的懸崖峭壁和巖石縫隙中。由于鐵皮石斛生長條件的特殊性和分布的局限性，又經長期采挖，自然資源瀕臨枯竭，國內市場供應緊缺，國
2、際市場每千克干品價已達10000美元以上。1987年國務院將鐵皮石斛列為重點保護的中藥材之一。而植培快繁技術是解決植物優(yōu)良無性系用苗的良好途徑，所以，對這一珍貴植物資源，我們決定用組織培養(yǎng)技術來進行快繁。繁殖材料(云南鐵皮石斛瓶栽苗，云南楓斗生物科技有限責任公司購得。)以鐵皮石斛(DemdrobiumcardidumWall.exLindl)無菌幼苗莖段為外植體,分別研究了不同基本培養(yǎng)基、天然附加物和植物生長調節(jié)劑對鐵皮石斛原球莖、不定芽誘導、增殖和生根的影響.結果表明,在不定芽誘導和增殖中,4
3、種基本培養(yǎng)基中以B5的效果最好.而芽增殖率則以B5基本培養(yǎng)基中添加011mg/L6-BA的效果最好;在3種天然附加物中,以添加椰子汁對芽的增殖效果最好;原球莖的增殖以110mg/L的NAA效果最佳,誘導生根則以110mg/L的NAA效果最明顯.（周俊輝,鐘雪鋒,蔡丁穩(wěn)，愷農業(yè)技術學院園藝園林系,廣東廣州510225）試劑處理：在基本培養(yǎng)基中分別添加NAA015mg/L、6-BA015mg/L、蔗糖20g/L,調pH至5.18.在超凈工作臺上,將鐵皮石斛試管苗切成1～2cm的莖段,在以上培養(yǎng)基上接
4、種進行芽誘導.每組各接種25瓶,隨機抽取其中20瓶進行生長性狀觀測.培養(yǎng)時間均為1個月,培養(yǎng)溫度(25±1)℃,光照強度1500～20001x,每天光照12h。在生產上,建議采用B5作基本培養(yǎng)基附加6-BA011mg/L、NAA015mg/L和椰子汁15010mg/L用于鐵皮石斛不定芽的誘導增殖,附加NAA110mg/L和椰子汁15010mg/L用于原球莖的增殖,附加BA011mg/L和NAA110mg/L用于誘導生根為最適宜。處數(shù)據(jù)有待詳查，感覺網上的資料不夠準確。將鐵皮石斛莖段誘導出的無菌苗
5、依苗的高度分切成2～3節(jié),2個假鱗莖為一節(jié),切除過長的根系,留約1cm長的根,從根莖處將根、莖分開,莖以下稱為根蔸,以上為莖段。上述切段外植體分為帶頂芽的莖段、莖段和根蔸。原球莖誘導培養(yǎng)基:①MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.2mg/L;②MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L;③MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.2mg/L;④MS＋6-BA4.0mg/L＋NAA0.2mg/L;⑤MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA1.0mg/L;⑥MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0
6、.5mg/L;⑦MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA1.0mg/L。生根培養(yǎng)基:①1/2MS＋NAA0.5mg/L;②1/2MS＋NAA1.0mg/L;③1/2MS＋NAA2.0mg/L;④1/2MS＋IBA0.5mg/L;⑤1/2MS＋IBA1.0mg/L;⑥1/2MS＋IBA2.0mg/L;⑦1/2MS＋NAA2.0mg/L＋香蕉50g/L。無菌苗移栽在適宜假植的季節(jié)(氣溫15～30℃)。將生根苗移到室外,作好遮陰,避免太陽直射,14d后打開瓶蓋煉苗,直至培養(yǎng)基表面有輕度污染,小心取出生根苗
7、,洗凈根部培養(yǎng)基,再用多菌靈或甲基托布津1000倍液浸泡根部10min,自然通風晾干至根系發(fā)白,移栽于已消毒的水苔或碎樹皮為基質的小缽中,50%～70%遮陰,保持80%的濕度,細心管理,成活率能達90%以上。鐵皮石斛的原球莖啟動相對較難,而原球莖的增殖和分化容易,少量添加植物激素,可獲得大量的分化苗,生產健壯的試管苗是移栽成活的關鍵。在充足的營養(yǎng)條件下,溫度對鐵皮石斛組培全過程至關重要,較高的溫度利于增殖,較低的溫度利于壯苗、生根。除培養(yǎng)基外,溫度的調控是能夠培養(yǎng)出優(yōu)質無菌苗的關鍵。鐵皮石斛的分
8、生能力極強,壯苗培養(yǎng)是整個組培過程的難點,也是人工栽培成功與否的關鍵所在,還需作進一步研究。苗長到6～9cm長，根系較發(fā)達之后，就可以進行移栽了，移栽前還要經過煉苗階段，因為組培室的環(huán)境是人為控制的，溫度、濕度、光照、供其生長的培養(yǎng)基成分都是設定好了的，如果直接移栽，由于生長環(huán)境突然的改變，會導致其不能適應外界環(huán)境，造成生長緩慢、成活率不高等后果，這就要求，在移栽前要進行煉苗，待其適應了外界的環(huán)境再進行移栽。將組培瓶苗放在溫室大棚內，自然光條件下一周左右，待苗的顏色轉為翠綠色后，即可移栽，移栽時
