全自動(dòng)生化儀參數(shù)設(shè)置

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1、自動(dòng)生化分析儀的分析參數(shù)設(shè)置自動(dòng)生化分析儀是一種把生化分析中的取樣、加試劑、去干擾物、混合、恒溫反應(yīng)、自動(dòng)監(jiān)測(cè)、數(shù)據(jù)處理以及實(shí)驗(yàn)后清洗等步驟進(jìn)行自動(dòng)化操作的儀器,它完全模仿并代替了手工操作,目前已經(jīng)成為醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行臨床診斷所必可不少的儀器之一。它的應(yīng)用大大提高了生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性、精密度和工作效率,適應(yīng)了臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展對(duì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的要求,然而這一切不僅需要生化分析儀的技術(shù)基礎(chǔ),也需要儀器內(nèi)每個(gè)項(xiàng)目都有一組最優(yōu)化的分析參數(shù)。并且目前大多數(shù)生化分析儀為開放式,封閉式的儀器一般也會(huì)另外留一些檢測(cè)項(xiàng)目的空白通

2、道由用戶自己設(shè)定分析參數(shù),因此我們有必要了解生化分析儀各個(gè)分析參數(shù)的基本含義以及設(shè)置方法。1.試驗(yàn)名稱常以項(xiàng)目的英文縮寫來設(shè)置,如總蛋白設(shè)置為TP,白蛋白設(shè)置為ALB等。2.方法類型生化分析儀常用的方法有終點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法、比濁法等,根據(jù)被檢物質(zhì)的檢測(cè)原理等選擇其中一種分析方法。2.1終點(diǎn)法又稱為平衡法,是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對(duì)光吸收強(qiáng)度的大小對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一類方法,有一點(diǎn)終點(diǎn)法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法兩類。一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)是使用一種或兩種試劑,當(dāng)待測(cè)物與試劑反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)時(shí),測(cè)

3、定混合溶液的吸光度來計(jì)算待測(cè)物的濃度,該法常用的有總蛋白雙縮脲法、白蛋白溴甲酚綠法、葡萄糖氧化酶法等,手工操作的大多數(shù)方法都是一點(diǎn)終點(diǎn)法。兩點(diǎn)終點(diǎn)法也稱固定時(shí)間法,如果是單試劑分析,當(dāng)測(cè)定波長同干擾物質(zhì)的吸收光譜有重疊時(shí),通過選用兩點(diǎn)終點(diǎn)法可消除樣品空白引起的干擾,其分析過程是在樣品與試劑混合后經(jīng)過一段延滯期讀取一個(gè)點(diǎn)A1,一定時(shí)間后再讀取A2,然后比較標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待測(cè)物的濃度。肌酐苦味酸法就是一個(gè)典型的單試劑兩點(diǎn)法的例子。如果是雙試劑分析,選用二點(diǎn)終點(diǎn)分析法除了

4、可消除樣品空白引起的干擾外,還可消除內(nèi)源性干擾物質(zhì)的干擾,其分析過程是加入試劑1后讀取A1locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame,加入試劑

5、2后讀取A2,A1相當(dāng)于讀出樣品空白值,A2才是實(shí)際呈色反應(yīng),然后比較標(biāo)準(zhǔn)和測(cè)定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待測(cè)物的濃度。為了提高終點(diǎn)法檢測(cè)的準(zhǔn)確性,選擇該法時(shí)應(yīng)設(shè)置終點(diǎn)法零點(diǎn)讀數(shù)、樣品空白等兩個(gè)分析參數(shù),前者是在反應(yīng)前即開始讀數(shù),可以扣除反應(yīng)前試劑和樣品混合液的空白讀數(shù);后者是樣品加空白試劑所得到的吸光度,反應(yīng)需要占用一個(gè)比色杯。2.2連續(xù)監(jiān)測(cè)法又稱動(dòng)態(tài)分析法、速率法等,基本原理是在酶促反應(yīng)的最適條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期(零級(jí)反應(yīng)期)內(nèi)連續(xù)觀察和記錄一定

6、反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化,以單位時(shí)間酶反應(yīng)初速度計(jì)算出酶活力的大小和代謝物的濃度。具體方法有兩點(diǎn)速率法和多點(diǎn)速率法:兩點(diǎn)速率法是通過觀察在零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度,用兩個(gè)點(diǎn)的吸光度的差值(ΔA)除以時(shí)間(分),計(jì)算出每分鐘的吸光度變化值;多點(diǎn)速率法是在零級(jí)反應(yīng)期內(nèi)每隔一定時(shí)間(2-30s)進(jìn)行一次監(jiān)測(cè),連續(xù)監(jiān)測(cè)多次,求出單位時(shí)間內(nèi)的反應(yīng)速度,這種方法又可分為最小二乘法、多點(diǎn)δ法、回歸法、帶速率時(shí)間法等。該法具有明顯的優(yōu)點(diǎn)就是大大提高了分析速度和準(zhǔn)確性,主要適用于酶活性及其代謝產(chǎn)物的測(cè)定

7、。在連續(xù)監(jiān)測(cè)法過程中,即使不加樣品,試劑中的底物也會(huì)自動(dòng)降解得到一個(gè)結(jié)果,因此應(yīng)設(shè)置試劑空白速率,不同批號(hào)試劑的試劑空白速率不一樣,其值為以水代樣品測(cè)得的項(xiàng)目結(jié)果,樣品測(cè)定結(jié)果應(yīng)扣除試劑空白速率的數(shù)值。2.3比濁法自動(dòng)生化分析儀一般只能做透射免疫比濁分析,當(dāng)光線通過一定體積的含免疫復(fù)合物的溶液時(shí),由于溶液中存在的抗原-locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang

8、,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame抗體復(fù)合物粒子對(duì)光線的反射和吸收,引起透射光的減少,測(cè)定的光通量和抗原抗體復(fù)合物的量成反比。它常用于終點(diǎn)法測(cè)定,目前主要用于血清特種蛋白的檢測(cè),如載脂蛋白、微量蛋白、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白以及某些藥物監(jiān)測(cè)等。但是如果樣品中待測(cè)抗原濃度過高,抗原與抗體形成的免疫復(fù)合物分子將會(huì)

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