標本采集和保存技術要求一覽表

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1、附件1標本采集和保存技術要求一覽表病人類型種類采集時間和頻次采集方法保存條件備注所有病例全血1、入院后立即采集；2、間隔3－5天采集一次；3、逝前采集一次。真空采血管無菌采集血清分裝2管血塊單獨保存低溫保存，-70℃最佳，-20℃亦可血塊用于細菌檢測抗凝血入院后立即采集真空抗凝采血管無菌采集最好在使用抗生素前采血同上傳染病所要求如5天內能送達實驗室，可0℃~10℃保存，如否，可低溫冷凍保存咽拭子入院后立即采集塑料桿拭子擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭分別浸入含3ml病毒或細菌采樣液的螺口塑料管中同上詳見表下注。漱

2、口液入院后立即采集10ml不含抗菌素的采樣液漱口，無菌螺口塑料管收集同上詳見表下注。尿標本1、入院后立即采集；2、臨床檢查采集標本時留樣無菌管采集中段尿標本10ml同上詳見表下注。便標本1、入院后立即采集；2、臨床檢查采集標本時留樣無菌管采集糞便標本同上詳見表下注。下呼吸道標本氣管插管時采集采集呼吸道抽取物或分泌物同上詳見表下注。痰液有痰液時采集同上詳見表下注。心臟穿刺組織死亡后未做尸檢時采集同上詳見表下注肺穿刺組織心包液胸腔積液尸檢標本2份同上，1份福爾馬林充分固定后，4℃保存應盡量多采集各器官組織標本，例如肺組

3、織、胸腔積液、心臟組織、心包液、肝、腎、脾組織，如果有神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)，還需采集腦組織以及其它可能受累的器官標本有明確腦膜腦炎或腦炎癥狀病例腦脊液急性期無菌采集同上有出疹癥狀病例皰疹液有皰疹時無菌采集同上注：1、以上標本分別用于開展病毒和細菌等病原體檢測2、采集咽拭子標本、下呼吸道標本、痰液、心臟穿刺組織、肺穿刺組織、心包液、胸腔積液使用的樣品保存液應不含抗生素或不用樣品保存液，現(xiàn)場無菌接種，并將接種后剩余的標本立即冷凍（-20℃以下）保存。漱口液、尿標本和糞便標本現(xiàn)場無菌接種，并將接種后剩余的標本立即冷凍（-20℃以

4、下）保存。附件2手足口病例標本送檢登記表患者姓名性別出生日期年月日（陰/陽歷）家長姓名家庭住址市鄉(xiāng)（鎮(zhèn)、街辦）村（居）號家庭電話發(fā)病日期年月日初診日期年月日；初診單位（省級/市級/縣級/鄉(xiāng)級/村級）初步診斷：_______________________________住院治療（是/否），如住院，則：入院日期年月日，入院診斷出院日期年月日，出院診斷病程天預后：痊愈/好轉/未愈/死亡/其他；后遺癥（有，；無）標本統(tǒng)一編號：標本類型采樣日期送檢日期是否冷藏標本量收樣日期檢測日期報告日期實驗結果RDHEp-2中和抗體滴度

5、咽拭子血清急性期恢復期糞便標本腦脊液皰疹液注：送檢標本編號為“標本統(tǒng)一編號+標本類型”，其中“T”為咽拭子代碼，“S1”為急性期血清代碼，“S2”為恢復期血清代碼，“F”為糞便標本代碼，“CSF”為腦脊液代碼，“H”為皰疹液代碼。采樣人：采樣單位：送樣人：附件3手足口病實驗室檢測方案（試行）為規(guī)范手足口病的標本采集、運送及實驗室檢測操作程序，提高檢測準確性，從而為手足口病的明確診斷和相關實驗研究提供可靠的依據(jù)，特制定本方案。手足口病的實驗室檢測原則和程序手足口病的診斷一般是通過采集適當?shù)呐R床標本后進行病毒分離和病毒

6、鑒定，如果沒有采到合適的臨床標本，或無法進行病毒分離，也可以通過血清學檢測（如中和實驗）來檢測血清中的中和抗體，或直接從臨床標本中檢測病毒的核酸來診斷（見下圖：手足口病的實驗室診斷流程圖）。一般是由省級病毒實驗室進行病毒的分離，爆發(fā)疫情范圍較大時，國家參比實驗室也可以提供技術支持。病毒分離成功后，送至國家參比實驗室進行鑒定或復核，同時對全國手足口病的病原進行病毒學監(jiān)測。國家參比實驗室接到標本后，在30日內將結果反饋給省級實驗室。很多血清型的腸道病毒能引起手足口病，不同細胞系對不同病毒的敏感性是有所不同的，而不同時期

7、腸道病毒的流行株也不同。通常用于腸道病毒分離的細胞系為RD細胞（對CA16和EV71敏感）、HEp-2細胞（對某些柯薩奇B組病毒敏感）等，聯(lián)合使用上述兩種或更多細胞（如Vero細胞）有助于分離到更多的腸道病毒。使用血清型特異性的中和抗血清進行的中和實驗是腸道病毒鑒定的基本方法，如果使用了適當?shù)目寡?，實驗結果是比較可靠的。因為腸道病毒包括若干個血清型，通常使用組合抗血清進行鑒定，有些組合抗血清已經(jīng)商品化。當無法進行病毒分離或得不到適用于病毒分離用的標本時，血清學檢測可以為腸道病毒的感染提供一個間接的證據(jù)。一般用急性

8、期血清與恢復期血清的檢測結果進行比較，抗體滴度呈四倍或以上增高證明有急性感染。但是，無癥狀的腸道病毒感染也是常見的，所以對檢測結果的解釋要慎重一些。為了提高檢測速度，也為了輔助中和實驗法進行毒株鑒定，最近很多實驗室都使用分子生物學方法。目前，用分子生物學方法對腸道病毒進行定型還沒有統(tǒng)一的標準，而且要根據(jù)檢測目的選擇使用適用的方法。檢測結果的評價如果從臨床標本