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《多重耐藥銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺類相關(guān)耐藥基因研究.doc》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、多重耐藥銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺類相關(guān)耐藥基因研究作者:李艷華 高恒強(qiáng) 李鵬 張延強(qiáng)【摘要】目的調(diào)查我院2005年臨床分離多重耐藥銅綠假單胞菌(PA)的耐藥性分析并探討其耐藥基因的存在狀況。方法對31株臨床分離的銅綠假單胞菌用紙片擴(kuò)散法檢測其藥敏表型,采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法檢測β-內(nèi)酰胺酶編碼基因和外膜通道蛋白OprD2基因,并與相關(guān)藥敏表型比較。結(jié)果31株銅綠假單胞菌對16種抗菌藥物的耐藥率為48.4%~100%;β-內(nèi)酰胺酶編碼基因PER、VIM、CARB、IMP、TEM、OXA-10的檢出率分別
2、為6.4%、3.2%、3.2%、3.2%、3.2%、3.2%,未檢出GES、SHV、VER基因,31株外膜通道蛋白OprD2基因缺失,檢出率為100%。結(jié)論本院多重耐藥銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺酶類抗生素的耐藥主要與外膜通道蛋白OprD2基因缺失有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】銅綠假單胞菌;多重耐藥;β-內(nèi)酰胺酶;聚合酶鏈反應(yīng);基因型 【Abstract】ObjectiveTosurveythedistributionofaminoglycoside-modifyingenzymegenesinmultidr
3、ug-resistantpseudomonasaeruginosaisolatedinourhospitalin2005.MethodsTheantibioticsusceptibilityof31differentantibioticsofP.aeruginosawastestedbyK-Bmethod,and31multi-drugresistantstrainswerescreened;β-lactamasegenesandtheoutermembraneproteinOprD2genewerede
4、tectedbypolymerasechainreaction(PCR).ResultsResistantratesof31strainsofP.aeruginasagainst16kindsofantibioticrangedfrom48.4%to100%;thedetectionrateofβ-lactamasegenePER,VIM,DHA,IMP,TEMandOXA-10was6.4%,3.2%,3.2%,3.2%,3.2%and3.2%respectively,andnoneofthe31str
5、ainspossessedgenesofGES,SHVandVER,31isolateofPAlosttheoutermembraneproteinOprD2gene.ConclusionResistancetoβ-lactamcompoundsinP.aeruginasofourhospitalisrelatedtolosttheoutermembraneprotein. 【Keywords】Pseudomonasaeruginosa;Multidrugresistance;β-Lactamases
6、;Polymerasechainreaction;Genes 銅綠假單胞菌(pseudomonasaeruginosa,PA)是一種重要的條件致病菌,常常引起呼吸道感染、菌血癥、肺炎、泌尿系統(tǒng)感染、燒傷感染和囊性纖維化繼發(fā)感染等多種疾病。2002年全國細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)調(diào)查顯示:PA的分離率為10.3%,僅次于大腸埃希菌而居第二位[1]。由于臨床上抗生素的大量使用,銅綠假單胞菌呈現(xiàn)出天然或獲得性多重耐藥性(multidrugresistance,MDR),給治療造成困難。近年來,銅綠假單胞菌對3、4代
7、頭孢和亞胺培南在內(nèi)的多種β4內(nèi)酰胺類抗生素及氨基糖苷類抗生素耐藥率一直處于一個比較高的水平,并呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1-3]。為了解臨床分離多重耐藥的PA中耐藥情況,收集了本院2005年1~12月臨床分離的31株P(guān)A,對其進(jìn)行耐藥性的檢測,并采用分子生物學(xué)技術(shù)檢測其耐藥相關(guān)基因,結(jié)果報告如下。 1材料 1.1菌株來源于本院2005年1~12月臨床分離的多重耐藥銅綠假單胞菌(MDRP)31株。所有標(biāo)本均采用法國生物梅里埃公司細(xì)菌鑒定儀鑒定菌種。 1.2質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單
8、胞菌ATCC27853均購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。 1.3MH培養(yǎng)基采用英國Oxoid公司產(chǎn)品。 1.4抗生素及藥敏紙片頭孢他啶(30μg/片,CAZ)、頭孢曲松(30μg/片,CRO)、亞胺培南(10μg/片,IMP)、克拉維酸(2mmol/L,CA)、氯唑西林(2mmol/L)、美羅培南(10μg/片,MER)、2-巰基丙酸紙片均購自英國Oxoid公司。 1.5微生物鑒定系統(tǒng)VITEK-32法國生物梅里埃公司產(chǎn)品