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1、葡萄籽蛋白提取工藝研究趙毅敏(孟州市質量技術監(jiān)督檢驗測試中心,河南焦作454750)摘要:采用堿溶酸沉法對葡萄籽蛋白提取工藝進行了研究.結果表明:葡萄籽粉碎粒度為40目,以pH值為9的堿液,按m(料):y(液)=1:10,在50℃條件下攪拌浸提45min時,蛋白質的提取最經濟.關鍵詞:葡萄籽;提取工藝;蛋白質;堿溶酸沉法中圖分類號:TQ937文獻標識碼:A葡萄籽不僅含有原花青素、葡萄籽油,還含有豐富的優(yōu)質蛋白質.葡萄籽榨油后的餅粕中含有13%。16%的蛋白質,采用脫殼工藝后餅粕蛋白含量高達30%IlI.葡萄
2、籽蛋白中含有18種氨基酸,人體必需氨基酸俱全,氨基酸總量較高,纈氨酸、精氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸均相當于大豆蛋白的含量,具有較高的開發(fā)利用價值121.目前,對于葡萄籽的開發(fā)利用主要集中于葡萄籽油13.41和花青素∞的提取,關于葡萄籽蛋白的研究目前還處于初級階段tTl,本文采用堿溶酸沉法對葡萄籽分離蛋白的提取工藝進行了研究,以期為開發(fā)這一新的優(yōu)質植物蛋白資源,發(fā)展可循環(huán)經濟貢獻自己的力量.1實驗部分1.1材料、主要儀器和試劑葡萄籽,購于民權葡萄酒廠,烘干備用.電熱恒溫水浴鍋(HH—S11-2型,北京長安科學儀器
3、廠),硫酸銅(天津市科密歐化學試劑有限公司),硫酸鉀(天津市科密歐化學試劑有限公司),氫氧化鈉(天津市科密歐化學試劑有限公司),濃鹽酸(吳華化學試劑有限公司),凱氏定氮儀.1.2實驗方法1.2.1葡萄籽中總蛋白含量的測定和得率計算公式1)葡萄籽中總蛋白含量的測定:準確稱量3g脫脂葡萄籽,分別加入O.1gCuSO。,3gK2sO。和30mL濃硫酸消化2.5h,冷卻后定容到100mL.取5mL采用微量凱氏定氮法用已標定為0.01049mol/L的鹽酸標準溶液定氮,做3次平行,每次平行滴定3次,計算總蛋白的質量分
4、數Co-VxNxCx6.25x20x100t,,,llr--%.(1)7U·\■/式中:co為葡萄籽中總蛋白質的質量分數,%:y為滴定所消耗標準鹽酸的體積,L;m為葡萄籽的質量,g;C為標準鹽酸的濃度,0.01049mol/L;N為氮的分子質量為14;6.25為凱氏定氮常數;20為稀釋倍數.2)相關公式Ct-—V×14×0.010—49x6.25×40×100%,(2)一?、厶,c2-魯×100%,(3)C#里L×100%.(4)式中:co為葡萄籽中總蛋白質的質量分數,%;C。為浸出蛋白的質量分數,%;c2
5、為蛋白浸出率,%;c3為產品得率,%;y為滴定所消耗標準鹽酸的體積,L;m-為產品質量,g;m為葡萄籽粕質量,g;40為稀釋倍數.收稿日期:2009-05—12作者簡介:趙毅敏(1976一),男,河南孟州人.萬方數據一1230一河南科學第27卷第10期1.2.2堿溶酸沉法提取葡萄籽蛋白質采用堿溶酸沉法從葡萄籽中提取分離蛋白,工藝流程為:葡萄籽_+曬干_+除雜_+破碎_過40目篩_堿液攪拌浸提葉過濾一濾液調酸一過濾_干燥-+成品.為優(yōu)化工藝,分別考察了浸提溫度、堿液濃度、浸提時間和料液比對蛋白質浸提量的影響.
6、1)浸提溫度對蛋白質提取率的影響:準確稱取6份粉碎后的葡萄籽各5g,分別加入6個250mL圓底燒瓶中,加入pH=9的堿液100mL,分別在35,40,45,50,55,60℃條件下攪拌浸提40min,抽濾,濾液用100mL容量瓶定容;取50mL加入0.19CuSO。,3gK2SO。和30mL濃硫酸消化,冷卻后定容到100mL:取5mL采用微量凱氏定氮法定氮,計算浸出蛋白質得率.2)浸提時間對提取率的影響:準確稱取6份粉碎后的葡萄籽各5g,分II:II入6個250mL圓底燒瓶中,加入pH=9的堿液100mL,
7、50oC條件下分別浸提30,35,40,45,50,55min,抽濾.定容到100mL;取50mL消化,冷卻后定容到100mL;取5mL采用微量凱氏定氮法定氮,計算浸出蛋白得率.3)料液比對提取率的影響:準確稱取6份粉碎后的葡萄籽各5g,加入6個250mL圓底燒瓶中,分別加入pH=9的堿液25,50,75,100,125,150mL,50℃條件下浸提45min,抽濾,定容到100mL;取50mL消化,冷卻后定容到100mL;取5mL采用微量凱氏定氮法定氮,計算浸出蛋白得率.4)堿液濃度對蛋白質提取率的影響:
8、準確稱取5g粉碎后的葡萄籽各5份,加入5個250mL圓底燒瓶中,分別加入pH為8,9,10,11,12的堿液75mL,50℃條件下浸提45min,抽濾,定容到100mL;取50mL消化,冷卻后定容到100mL;取5mL采用微量凱氏定氮法定氮,計算浸出蛋白得率.5)等電點的測定:取堿溶得到的葡萄籽蛋白質提取液100mL各12份,用3mol/L鹽酸調整pH值分別為3.50,3.60,3.70,3.80,3.90,4.