瑞拉菌素產(chǎn)生菌rl2的誘變育種

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1、微生物學(xué)通報(bào)AUG20,2009,36(8):1212~1216Microbiology?2009byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn研究報(bào)告瑞拉菌素產(chǎn)生菌RL-2的誘變育種*茍麗霞安德榮劉雙發(fā)李晶(西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室陜西楊凌712100)摘要:本研究以委內(nèi)瑞拉鏈霉菌秦嶺變種RL-2(Streptomycesvenezuelaevar.qinlingensisRL-2)為出發(fā)菌株,分別采用紫外線、氯化鋰及紫外線加氯化鋰的復(fù)合誘變方式對(duì)其孢子

2、懸液進(jìn)行誘變處理。在復(fù)合誘變的紫外線照射時(shí)間為45s和氯化鋰濃度為0.4%的情況下,獲得一株瑞拉菌素的高產(chǎn)突變菌株UVL-108且連續(xù)傳接6代其遺傳特性較穩(wěn)定。采用雙向培養(yǎng)及生長(zhǎng)速率法對(duì)其進(jìn)行初篩和復(fù)篩,結(jié)果表明:UVL-108的拮抗性能較出發(fā)菌株提高了77%,其發(fā)酵液對(duì)稻瘟病菌的抑菌毒力是出發(fā)菌株的3倍。關(guān)鍵詞:鏈霉菌,誘變,瑞拉菌素,拮抗性能MutationalScreeningofZuelacmycin-producingStrainRL-2*GOULi-XiaANDe-RongLIUShuang-FaLIJing(Colle

3、geofPlantProtectionandShaanxiKeyLaboratoryofMolecularBiologyforAgriculture,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China)Abstract:Inthisresearch,thezuelacmycin-producingstrainStreptomycesvenezuelaevar.qinlingensisRL-2wasusedasoriginalstrain,thesporesuspensionofwh

4、ichwasinducedbyUV,LiClandthecompoundtreatmeat(UV+LiCl)respectively.Thezuelacmycin-high-yieldstrainUVL-108wasobtainedbythetreat-mentthattheexposuretimeunderUVirraditionwas45sandtheconcentrationofLiClwas0.4%.Thehe-reditycharactersofmutantUVL-108werestableinsuccesivesixge

5、nerations.TheantibacterialactivityandthefermentationtiterofmutantUVL-108weredetermindedbybidirectionedcultureandmyceliallineargrowthrespectively.TheresultsdemonstratedtheantibaterialactivityofmutantUVL-108wasimprovedby77%,andtherelativetoxicityoffermentationtoPhyricula

6、riagriseawasimprovedbytwotimescomparedwiththeoriginalstrain.Keywords:Streptomyces,Mutagenesis,Zuelacmycin,Antibaterialactivity瑞拉菌素是西北農(nóng)林科技大學(xué)植物病理實(shí)驗(yàn)室菌的新變種。經(jīng)過(guò)二十多年的研究,已在瑞拉菌素和西安海浪生物研究所自主開(kāi)發(fā)的一種新型氨基糖的生物活性、理化性質(zhì)、菌株鑒定、抑菌譜、發(fā)酵苷類(lèi)農(nóng)用抗生素。其產(chǎn)生菌RL-2菌株是本實(shí)驗(yàn)室從工藝、分離純化、分子結(jié)構(gòu)等方面取得很大進(jìn)展。1988年起通過(guò)對(duì)秦嶺

7、山區(qū)原始森林土壤中放線菌資實(shí)驗(yàn)證明瑞拉菌素對(duì)稻瘟病菌、小麥赤霉病菌、黃[1-3]源進(jìn)行研究,從中篩選分離的對(duì)植物真菌病害有明瓜枯萎病菌和番茄枯萎病菌等有強(qiáng)拮抗作用。但顯抑制作用的一株放線菌,該菌株是委內(nèi)瑞拉鏈霉RL-2野生型菌株產(chǎn)素能力很低,不能直接作為生產(chǎn)基金項(xiàng)目:國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目(No.2007AA021503)*通訊作者::anderong323@163.com收稿日期:2008-11-26;接受日期:2009-02-10茍麗霞等:瑞拉菌素產(chǎn)生菌RL-2的誘變育種1213菌種,從而限制了對(duì)它的進(jìn)一步研究和利用。從工氯化鋰對(duì)孢

8、子液的處理結(jié)果,確定復(fù)合誘變中紫外業(yè)生產(chǎn)的角度來(lái)說(shuō),選育效價(jià)高、穩(wěn)定性好的優(yōu)良線和氯化鋰的誘變劑量,將紫外線照射后的孢子懸菌株是抗生素篩選過(guò)程中的基礎(chǔ)工作之一,而菌種液稀釋后涂于含氯化鋰的平板,28°C避光培養(yǎng)7d。的改良工作是提高產(chǎn)

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