云南野生蘭屬主要種間親緣關(guān)系的aflp分析

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)園藝學(xué)報(bào)2006,33(5):1141—1144Act8HortieulturaeSinica云南野生蘭屬主要種間親緣關(guān)系的AFLP分析張俊祥1李枝林2范成明1程少麗1趙明富1何月秋¨(1云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,云南昆明650201;2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院,云南昆明650201)摘要:采用AFLP技術(shù)對(duì)云南省蘭屬的14個(gè)種和3個(gè)變種中的38份樣本進(jìn)行了親緣關(guān)系分析。16對(duì)AFLP引物擴(kuò)增的條帶聚類(lèi)結(jié)果表明,云南省國(guó)蘭遺傳多樣性非常廣泛,相同品種間的不同個(gè)體擴(kuò)增出的條帶模式相差很大。依據(jù)AFLP數(shù)據(jù),在相似系數(shù)0.58的水平下

2、,38個(gè)蘭花樣品分成3組:蓮瓣蘭、春劍、惠蘭、寒蘭分為第1組,建蘭、豆瓣蘭、春蘭,墨蘭、虎頭蘭、西藏虎頭蘭、大雪蘭、碧玉蘭、文山紅柱蘭、長(zhǎng)葉蘭和兔耳蘭分為第2組,送春和蜜蜂蘭分為第3組。關(guān)鍵詞:蘭屬;AFLP;遺傳多樣性;親緣關(guān)系中圖分類(lèi)號(hào):S682.31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0513.353X(2006)05—1141-04PhylogeneticsAnalysisoftheChineseOrchidsinYunnanProvinceUsingAFLPTechniqueZhangJunxian91,LiZhilin2,F(xiàn)anCheng

3、min91,ChengShaolil,ZhaoMingful,andHeYueqiul’(1CollegeofPlantProtection,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming,Yunnan650201,China;2CollegeofGardeningandHorticulture,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming,Yunnan650201,China)Abstract:Thirty—eightcollectionsofChineseorchidsinYunn

4、anProvince,China,including14speciesand3varieties,wereanalyzedphylogeneticallyusingAFLPtechnique.PCRamplificationbandpatternwith16pairsofprimersindicatedthattheChineseorchidswereverydiverse,andindividualsofthesamespecieshaddifferentbandpatterns.SubgenusJensoaappearedasapar

5、aphyleticgroup.SubgenusCyperorchiswasnotamonophyleticgroupinsteadformedanoffshootofsubgenusJensoa.Atasimilaritycoefficientof0.58,theorchidscouldbeclusteredinto3groups:CybidiumtortisepalumWuetChen,C.tortisepalumvar.10ngi—bracteatum,C.faberiandC.kancanbelongedtoGroup1;C.e.,

6、ifolium,C.goeringiivar.serratum,C.goeringii,C.sinense,C.hookerianum,C.tracyanum,C.mastersii,C.10wianum,C.wenshanense,C.erythraeumandC.1ancifoliumtoGroup2;C.cyperifoliumvar.szechuanicumandC.pumilumtoGroup3.Keywords:Cybidium;AFLP;Geneticdiversity;Phylogeneticrelationship1目的

7、、材料與方法本研究以云南野生蘭花為材料進(jìn)行AFLP分析,旨在揭示其主要種間親緣關(guān)系,為其育種和系統(tǒng)發(fā)育研究提供理論依據(jù)。38個(gè)供試樣品包括14個(gè)種和3個(gè)變種(表2),引種栽培于云南農(nóng)業(yè)大學(xué)園林園藝學(xué)院溫室蘭花圃中。DNA的提取采用CTAB法。AFLP分析采用Vos等?建立的方法。利用MseI和EcoRI酶切組合進(jìn)行基因組限制性酶切。所用的接頭和引物見(jiàn)表1(上海生工)。針對(duì)MseI和EcoRI酶的接頭,共用16對(duì)引物進(jìn)行選擇性擴(kuò)增。擴(kuò)增后采用4%聚丙烯酰胺凝膠和Bio.Rad電泳設(shè)備,在80W下電泳1.5—2.0h,銀染后于燈光下計(jì)數(shù)擴(kuò)增的

8、條帶,并構(gòu)成0和1數(shù)據(jù)矩陣表。用UPGMA方法進(jìn)行聚類(lèi)分析,采用Percentdisagreement方法得到聚類(lèi)分析圖。收稿日期:2005—11—18;修回日期:2006—05—29基金項(xiàng)目

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