靈芝多糖體外抗氧化活性的研究

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1、億虧與生物Z程2011，Vo1．28No．3Chemistry&Bioengineeringdoi：10．3969／j．issn．1672—5425．2011．03．O18靈芝多糖體外抗氧化活性的研究張志軍，李淑芳，魏雪生，陳曉明(天津市林業(yè)果樹研究所，天津3001l2)摘要：采用鐵氰化鉀還原法測定靈芝多糖的還原能力，并對靈芝多糖清除羥自由基、超氧陰離子自由基的能力進行了研究。結(jié)果表明，靈芝多糖具有抗氧化的作用和清除自由基的能力，并且其清除能力與多糖的濃度存在一定的正相關(guān)量效關(guān)系。關(guān)鍵詞：靈芝多糖；還原能力；自由基；抗氧化中圖分

2、類號：0629．12文獻標識碼：A文章編號：1672—5425(2011)03—006303在生物體生命活動的氧化代謂過程中不斷產(chǎn)生各無相態(tài)變化、高效節(jié)能、無污染等特點，且整個分離過種自由基。自由基不僅是生物體多種生理功能的啟動程在密閉系統(tǒng)中進行，可避免和減輕熱和氧對物料營因素和生化反應(yīng)的介導者，同時也在免疫細胞因子網(wǎng)養(yǎng)成分的破壞，因此，被認為是21世紀最有前途的技絡(luò)中起調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導作用]?，F(xiàn)代生命科學、醫(yī)學研術(shù)。采用膜技術(shù)進行靈芝多糖的分離純化，不僅收率究表明，隨著年齡的增長，人類機體內(nèi)自由基的自穩(wěn)態(tài)高而且極少破壞靈芝多糖結(jié)

3、構(gòu)。平衡性下降，從而導致自身免疫功能下降，發(fā)生腫瘤、作者在此對靈芝多糖的還原能力及其對羥自由基動脈粥樣硬化、原發(fā)性高血壓、Alzheimer型早老性癡(·OH)和超氧陰離子自由基(·o)的清除活性進行呆等自由基疾病2．37。了研究探討，并對不同工藝制取的靈芝多糖的清除自靈芝(Ganodermalucidum)在我國自古就有“仙由基的能力進行了比較。草”的美譽，已有悠久的藥用和食用歷史，《神農(nóng)本草l實驗經(jīng)》、《本草綱目》中都有靈芝的藥效記載。多糖是靈芝中的主要活性組分之一。20世紀70年代以來，靈1．1材料、試劑與儀器芝多糖的研究

4、開發(fā)進人了一個嶄新的發(fā)展時期，經(jīng)過靈芝，天津市林業(yè)果樹研究所。近3O年的發(fā)展，人們對靈芝多糖這一重要生命物質(zhì)產(chǎn)鄰苯三酚、番紅花T、鐵氰化鉀、三氯乙酸、三氯化生了新的認識[5一。據(jù)報道，從雙孢蘑菇、靈芝、香菇、側(cè)鐵等，均為分析純。耳等6種真菌中提取出的活性成分，可以防止細胞內(nèi)恒溫水浴箱，752型分光光度計。DNA的氧化損傷。劉志峰等研究證明，蘑菇提取物對1．2靈芝多糖的提取脂質(zhì)過氧化的抑制率可達29。真菌提取物對自由(1)水提醇沉工藝基有一定的清除作用[。真菌是自由基清除劑的良好靈芝子實體一粉碎一粗濾一真空濃縮一醇沉一干載體。而多

5、糖是真菌中的主要活性成分。燥目前，國內(nèi)外基本上采用水浸法、堿浸法提取多(2)膜分離工藝糖，再經(jīng)有機溶劑沉淀提純。由于傳統(tǒng)工藝采用堿浸、靈芝子實體一粉碎一預(yù)煮一粗濾一微濾一超濾一有機溶劑分離提純等手段，易對靈芝多糖聚合體造成濃縮干燥破壞，也易造成某些活性基團變性失活，且粗多糖提取1．3性能測試效率極低。膜分離技術(shù)是近年來發(fā)展起來的在分子水1．3．1還原能力測定(鐵氰化鉀還原法)平上實現(xiàn)機械分離的高新技術(shù)，由于其具有常溫操作、在2．5mIpH值6．6的磷酸緩沖溶液中加入1收稿日期：201o一12—2O作者簡介：張志軍(1969一)，

6、男，河北陽原人，副研究員，研究方向：食用茵的研究與開發(fā)。E—mail：zzjtjnmg@yahoo．corn．cn。張志軍等：靈芝多糖體外抗氧化活性的研究／2011年一3期mL樣品、2．5mL1％鐵氰化鉀，混合物在5O℃恒溫條表l靈芝多糖的還原能力Tab．1ThereductionabilityofGanoderma件下加熱20rain，急速冷卻，加2．5mI10三氯乙lucidumpOIysaccharide酸，3000r·rain離心分離，取上層清液2．5mL，加靈芝多糖溶液濃度／mg·mI還原能力(AToo)2．5mI水，

7、再加0．5mL0．1FeC1。，混合均勻，靜置CK(0)10rain后在波長700nm下測吸光度A。。。A7。。值越0．10大，則樣品的還原能力越強。0．501．3．2對羥自由基(·OH)的清除作用1．00根據(jù)Fenton反應(yīng)原理，Ho2在Fe。存在時生成2．00·oH，反應(yīng)式如下：5．00Fe+H202——-Fe。+·OH+OH30“g·mL一Vc·OH可使番紅花T褪色，即在520nm處可測由表1可知，0．10mg·mL靈芝多糖溶液的出·OH的生成情況，進而檢測出加人樣品的抗氧化A值與水體系A(chǔ)值相當，說明該濃度(均指加入反活性

8、。反應(yīng)體系終體積4．5mL，其中含150mmoI·應(yīng)體系的樣品起始濃度，下同)下靈芝多糖沒有還原能L硫酸鈉鹽緩沖溶液(pH值7．4)、114／~mol·I力。隨著濃度的增大，A值也增大，多糖的還原能力番紅花T、1．927mmo]·LEDTA·Na。、1．0mmo