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1、天津商業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文螺旋藻對(duì)小鼠腸道菌群的影響研究姓名：李景申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：發(fā)酵工程指導(dǎo)教師：王素英20090501摘要螺旋藻被譽(yù)為“生命的營養(yǎng)庫’’，具有參與合成多種維生素、調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝、刺激體內(nèi)免疫系統(tǒng)、提高免疫力等功能，為了全面評(píng)價(jià)螺旋藻對(duì)小鼠腸道細(xì)菌菌群的影響，實(shí)驗(yàn)以腹瀉小鼠和正常小鼠為研究對(duì)象，采用灌胃和自然攝食的方式，研究高、中、低劑量螺旋藻對(duì)小鼠糞便、空回腸、盲腸和結(jié)腸等部位可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量和細(xì)菌菌群多樣性的影響，以闡述螺旋藻與腸道微生物之間的相互關(guān)系。以腹瀉小鼠糞便為研究對(duì)象的結(jié)果表明，生理鹽水在一定
2、程度上能夠使被擾亂的腸道菌群微生態(tài)平衡得以恢復(fù)，在灌胃處理8d后，糞便樣品中細(xì)菌種類的多樣性指數(shù)由1．2369逐漸增大到1．3812，與陽性對(duì)照小鼠腸道細(xì)菌菌群的相似性由26％升高到52％。但是，螺旋藻的這種腸道菌群調(diào)整作用更為明顯，當(dāng)用低劑量灌胃小鼠8d后，與灌胃生理鹽水小鼠相比，糞便中有益菌雙歧桿菌核乳桿菌數(shù)量明顯增高(P<0．01)，而有害菌產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量則明顯降低(P<0．01)，菌群多樣性指數(shù)由1．3214增大到1．5113，與陽性對(duì)照小鼠腸道細(xì)菌菌群的相似性達(dá)58％；當(dāng)用中劑量螺旋藻灌胃小鼠8d后，糞便樣品中雙歧
3、桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、擬桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量接近正常小鼠，分別達(dá)到7．48×107cfu／g，7．30×107cfu／g，5．02x10’cfu／g，7．09x107cfu／g6．92x100cfu／g，5．8l×105cfu／g，菌群多樣性由1．3212提高到1．5121，與陽性對(duì)照小鼠腸道細(xì)菌菌群的相似性達(dá)63％；當(dāng)用高劑量螺旋藻灌胃小鼠8d后，糞便樣品中細(xì)菌菌群的多樣性指數(shù)最高，達(dá)到1．5455，與陽性對(duì)照小鼠糞便樣品中細(xì)菌菌群的相似性高達(dá)80％。以腹瀉小鼠空回腸、盲腸和結(jié)腸為研究對(duì)象的結(jié)果表明，雖然空回腸可
4、培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量明顯低于盲腸、結(jié)腸，但各部位樣品菌群的變化趨勢(shì)均與糞便樣品一致，即任何劑量的螺旋藻處理，均能夠促進(jìn)腹瀉小鼠腸道雙歧桿菌和乳桿菌的增值，而抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長，由此看來當(dāng)考察可培養(yǎng)細(xì)菌類群的變化時(shí)，糞便樣品能夠反映腸道菌群的變化狀況，只是不能真實(shí)的反映各菌群的準(zhǔn)確數(shù)量。另外，小鼠盲腸、結(jié)腸內(nèi)容物的SSCP條帶與糞便樣品的擴(kuò)增條帶相比，條帶數(shù)量約增加10％以上，說明小鼠盲腸、結(jié)腸內(nèi)腸道菌群的種類要多于糞便樣品，腸道內(nèi)容物總DNA能為研究提供更多的信息。以自然攝食螺旋藻的小鼠為研究對(duì)象的結(jié)果表明，雖然螺旋藻對(duì)可培養(yǎng)細(xì)
5、菌數(shù)量的影響不隨時(shí)間呈現(xiàn)逐漸增高或降低的規(guī)律性變化，但不同處理劑量之間各種生理類群細(xì)菌的變化趨勢(shì)相同，當(dāng)喂食螺旋藻的時(shí)間達(dá)到2個(gè)月時(shí)，與正常攝食飼料的小鼠相比，灌胃高、中、低劑量螺旋藻小鼠糞便中細(xì)菌的多樣性指數(shù)分別增高10％，8．4％，3．4％，相似性系數(shù)分別降低12．8％，7．6％，5．3％，灌胃高、中、低劑量螺旋藻小鼠空回腸、盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物中細(xì)菌的變化與正常小鼠無顯著差異，說明螺旋藻明顯影響了腸道細(xì)菌菌群的構(gòu)成，但這種影響與螺旋藻生理功能之間的關(guān)系還有待于進(jìn)一步研究。關(guān)鍵詞：螺旋藻，腹瀉模型，腸道菌群，ERIC-PCR，
6、單鏈構(gòu)象多態(tài)性AbstraetSpirulinaasthe¨lifenutritionbank”hasmanyfunctionsincludingparticipatinginsynthesi·zeavarietyofvitamins，regulatemetabolism，stimulatethebody。Simmunesystemandimproveimmune．InordertoevaluatetheeffectionofSpirulinaonintestinalbacterialflorainmice，theexperi
7、mentmadediarrheamiceandnormalmiceastheobject，tostudytheeffectofhigh，midd-le，lowdosespirulinaonthenumberofculturablebacteriaandthediverstyofintestinalmicroflo。rainfecal,jejunumandileum，caecum，colon，toexpoundtherelationshipbetweenspirulinaanintestinalmicroflora．Theres
8、ultofstudingthediarrheamiceshowsthat，salinecanrecovertheimbalanceintestinalmicrofloratoacertainextent，afergavagespirulinafor8d，thediversit
